1、湖南省地方标准DB43辣椒抗白粉病室内鉴定技术规程Rules for identification of pepper for resistance to powdery mildew DB43/T 9842015 ICS 65.020.20B 05湖南省质量技术监督局 发 布2015-03-23 实施2015-01-23 发布DB43/T 9842015 I 目 次 前言 1 范围 12 术语和定义 12.1 辣椒白粉病 pepper powdery mildew 12.2 感病对照 12.3 抗病对照 13 辣椒白粉病菌接种体制备 13.1 病原物的分离与鉴定 13.2 接种体的繁殖 13
2、.3 接种体的制备 14 室内抗性鉴定 24.1 鉴定室 24.2 鉴定设计 24.3 鉴定对照材料 24.4 鉴定材料育苗 24.5 接种 25 病情调查 25.1 调查时间 25.2 病情级别划分 25.3 调查方法 36 抗病性评价 36.1 抗病性评价标准 36.2 鉴定结果的有效性判别 37 抗性鉴定记载表格 4附录A(规范性附录) 辣椒抗白粉病鉴定记载表 5DB43/T 9842015 II 前 言 为了规范辣椒白粉病抗病性鉴定,特制定本标准。 本标准的某些内容可能涉及专利,本标准的发布机构不应承担识别这些专利的责任。 本标准由湖南省农业标准化技术委员会提出并归口。 本标准主要起草
3、单位:湖南省蔬菜研究所。 本标准主要起草人:张竹青、郑井元、刘峰、邹学校、马艳青、戴雄泽。 DB43/T 9842015 1 辣椒抗白粉病室内鉴定技术标准 1 范围 本标准规定了辣椒抗白粉病室内鉴定的术语和定义、辣椒白粉病菌接种体制备、室内抗性鉴定、病情调查、抗病性评价以及记载表格。 本标准适用于辣椒白粉病室内抗性鉴定。 2 术语和定义 2.1 辣椒白粉病 pepper powdery mildew 由无性世代为半知菌亚门粉孢属辣椒拟粉孢菌(Oidiopsis taurica (Lev.) Salm),有性世代为子囊菌亚门内丝白粉菌属鞑靼内丝白粉菌(Leveillula taurica(Lev
4、.)Am)引起的,发病初期在叶片的正面或背面出现数量不等、不规则状圆形的退绿斑,叶背出现白色稀疏状霉层,随后退绿斑逐渐扩大连成一片,后期整个叶片布满白粉、后变为灰白色,最终植株黄化、萎蔫、叶片脱落、果实畸形等症状为主的一种辣椒病害。 2.2 感病对照 用于判定试验结果是否有效的感病辣椒品种,本标准中使用的中椒5号为灯笼形甜椒,接种后的病情指数(Disease index)DI50。 2.3 抗病对照 用于试验中对抗性评价的比较,本标准中使用的Primor品种(法国农科院引进)为小灯笼形甜椒,接种后的病情指数DI30。 3 辣椒白粉病菌接种体制备 3.1 病原物的分离与鉴定 采集田间自然发病的具
5、有新鲜菌层的辣椒叶片,在室内分离白粉病菌孢子,配置成孢子悬浮液,采用镜检法对孢子进行形态学鉴定。 3.2 接种体的繁殖 将分离鉴定的孢子悬浮液接种到(1518)叶时期的中椒5号甜椒叶片上,接种后置于白天(2325),夜间(1821)的温室中,先在相对湿度100%的黑暗条件下培养24 h,然后调整相对湿度为(8085)%,光照时间16 h。 3.3 接种体的制备 采集经接种发病且症状非常明显的辣椒叶片,置于盛有灭菌水的大烧杯中,用玻璃棒充分搅拌,将DB43/T 9842015 2混合液用4层纱布过滤,然后用血球计数板调节孢子悬浮液的浓度至(11042104)个/mL,最后在孢子悬浮液中加入吐温2
6、0,使吐温20浓度为1。 4 室内抗性鉴定 4.1 鉴定室 人工接种鉴定室应具备可调节温度、湿度和光照的条件,使人工接种后具备良好的发病环境。 4.2 鉴定设计 鉴定材料随机排列,每份材料重复3次,每一重复10株苗。 4.3 鉴定对照材料 设中椒5号(灯笼形甜椒)为感病对照,Primor小灯笼形甜椒为抗病对照。 4.4 鉴定材料育苗 待鉴定的辣椒种子先在10%的次氯酸钠溶液中浸种(810)min,并不时摇动,用灭菌水冲洗干净后置于28的恒温培养箱中催芽,露白后播种于育苗钵内。育苗基质为草木灰(或草炭)、蛭石、菜地土以2:1:1的比例混合(或沙性土壤与草炭以3:2的比例混匀),每20 kg左右的
7、育苗基质121高温蒸汽灭菌40 min,在25温室或大棚里育苗,幼苗应生长健壮、大小一致。 4.5 接种 4.5.1 接种期 最适接种期为(1518)片真叶。 4.5.2 接种体浓度 (11042104)个分生孢子/mL。 4.5.3 接种方法 采用喷雾法,将孢子悬液均匀喷洒于待鉴定辣椒叶片正反两面,至叶片表面有水珠滴落为止。 4.5.4 接种后的管理 接种后将植株置于白天(2325),夜间(1821)的温室中,先在相对湿度 100%的黑暗条件下培养24 h,然后调整相对湿度为(8085)%,光照时间16 h。 5 病情调查 5.1 调查时间 接种后第15天调查病情。 5.2 病情级别划分 辣
8、椒植株病情级别按照单株感病叶片占全株叶片数的比例进行划分,具体症状描述见表1。 DB43/T 9842015 3 表1 单株感病叶片占全株叶片数的比例 病情级别 病情描述 0 全株无叶片感病 1 感病叶片数量 20% 3 20% 感病叶片数量 40% 5 40% 感病叶片数量 60% 7 60% 感病叶片数量 80% 9 全株叶片感病 5.3 调查方法 调查鉴定材料接种后的发病情况,依据病害症状描述,逐份调查和登记病情级别,计算出病情指数(Disease index:DI)。病情指数按公式(1)计算: 100s = SN nDI )( (1) 公式中: DI 病情指数; s 各病情级别的代表数
9、值; n 各病情级别的植株数; N 调查总植株数; S 最高病情级别的代表数值。 6 抗病性评价 6.1 抗病性评价标准 根据鉴定材料3次重复的病情指数(DI)平均值确定其抗性水平,划分标准见表2。 表2 辣椒对白粉病抗性的评价标准 病情指数(DI) 抗性评价 DI = 0 免疫(I) 0 DI 10 高抗(HR) 10 DI 30 抗病(R) 30 DI 50 中抗(MR) 50 DI 70 感病(S) DI 70 高感(HS) 6.2 鉴定结果的有效性判别 当感病对照材料达到其相应感病程度(DI50),该批次的抗白粉病鉴定结果有效。 DB43/T 9842015 47 抗性鉴定记载表格 辣椒抗白粉病鉴定结果记载表格见附录A。DB43/T 9842015 5 附录A (规范性附录) 辣椒抗白粉病鉴定记载表 病 情 级 别 品 种 名 称 重 复 编 号 0 1 3 5 7 9 病 情 指 数 平 均 病 指 抗 性 评 价 品种来源 播种日期 接种日期 病原分离物编号 调查日期 调查人 鉴定技术负责人 (签字)
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