DB11 T 1186-2015 枣疯病综合防治技术规程.pdf

1、ICS 65.020.20 B 16 备案号： 45803-2015 DB11 北京市地方 标准 DB11/T 1186-2015 枣疯病综合防治技术规程 Technical code of practice for control of Jujube witches broom 2015- 04- 30发布 2015- 08- 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1186-2015 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 病树的分级 . 1 5 防治措施 . 1 5.1 检疫措施 . 1 5.2 建园要求与品种选择

2、. 2 5.3 枣园环境治理 . 2 5.4 栽培管理措施 . 2 5.5 病树清理 . 2 5.6 防治媒介昆虫 . 2 5.7 疯枝清理 . 2 5.8 换头改造 . 2 5.9 输液治疗 . 2 附录 A（资料性附录） 枣疯病识别特征 3 附录 B（资料性附录） 枣疯病病树分级 4 附录 C（资料性附录） 枣疯病植原体 PCR检测和检验方法 5 附录 D（资料性附录） 常见传病叶蝉的生物学特性 7 附录 E（资料性附录） 输液治疗防治枣疯病方法 8 参考文献 . 10 DB11/T 1186-2015 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009 给出的规则起草。 本标准 由北京

3、市 园林绿化局提出 并归口 。 本标准 由北京市 园林绿化局组织实 施。 本标准起草 单位：北京市林业保护站 。 本标准参与起草 单位：中国林业科 学研究院、北京流村王 园果 园。 本标准 主要起草 人：王合、陶万强、刘曦、田国忠、袁菲、潘彦平、任争光、郝少东、冯 术 快、李 志朋、王峰、李杰、赵连祥 。 DB11/T 1186-2015 1 枣疯病综合防治技术规程 1 范围 本标准规定 了 枣疯病的病情 分级和 综合 防治 技术。 本标准适 用于北京地区 枣疯病的防治。 2 规范性引用文件 下列文件 对于 本文件的 应用 是必不可少 的。 凡是注日期的引用文件 ，仅所注日期的 版本 适用 于

4、 本文 件。凡是不注日期 的引用文件，其最新版 本（ 包括所有的 修改 单） 适用 于本文件。 GB 4285 农药安全使 用标准 GB/T 8321.8-2007 农药 合理使 用准则（ 八） GB/T 8321.9-2009 农药 合理使 用准则（ 九） 3 术语和定义 下列术语和定义 适用 于本文件。 3.1 植原体 phytoplasma 原 称类菌 原体 (mycoplasma-like organism, MLO)， 为 单 细胞 原核 生物 ，无细胞壁 ， 寄生 在植物 韧皮 部筛管 中和介体昆虫体 内。 3.2 枣疯病 Jujube witches broom 是 一 种植原体

5、引起的 维管束系统 病害 ，以 枝叶 丛生、 花器返祖为 主要 症状 ， 严重时 可导致 枣树 死 亡 。 注：识别特征参见附录 A。 4 病树的分级 分级标准参见附录 B。 5 防治措施 5.1 检疫措施 DB11/T 1186-2015 2 5.1.1 加 强 枣树 苗木 、接穗 的调运 检疫 ，接穗 、砧木 、苗木等繁殖材 料携带 植原体检测和检验方法参 见附录 C。 5.1.2 发现带 病接穗、 砧木、 苗木等 植物 繁殖材 料应 及时销毁 ，不 得 引 入 新 枣园 或已建 立 的无 病枣园 ， 防止枣疯病 扩散蔓延 。 5.2 建园要求与品种选择 5.2.1 宜在没 有发 生枣疯病

6、的 地区 建园 ，在 栽培枣和 酸枣 发病严重 区建园 时可 选用 抗病、 耐病品种 ， 如星光、 黑腰子 枣、 唐星 、阜星 、嘎嘎 枣、 尜尜 枣、 葫芦 枣、 骏枣 、壶瓶 枣、 洪 赵小 枣、 月光 等品种。 慎 用 易感 病品种 ，如 梨枣 、冬枣 、泡泡红 枣、 金丝 小枣、 赞皇大 枣等 。 5.2.2 宜在无 病区 用健康 酸枣种 子培育 实生 苗和建 优良 品种 采 穗圃； 有条 件的 应推广 应 用脱毒 苗； 在 病区建 采穗 圃，应 在防虫 网室内 。 5.3 枣园环境治理 5.3.1 枣园周边 不宜 栽植 松、 柏、 桑 等植物 ，不 宜在 枣园 内间作芝麻 、 月 季

7、花等 媒介昆虫的 嗜食植物。 5.3.2 枣树发 芽前和生 长期 间应 及时清 除桑 、榆 等其 他植物和杂 草。 5.3.3 彻底刨除 枣园 周围 已经染 病的酸 枣。 5.4 栽培管理措施 因 地 制宜 ，合 理施用 有 机肥 ， 增施 磷钾肥； 适度修 剪，提 高树体 通透 性和光 照强度；控制结果数 量 ，保 持健康 树势 。 5.5 病树清理 5.5.1 对于新 建枣园 或无 病树枣园 ， 发现 病株 ，应 及时 清除 。 5.5.2 对于发 病率较高 ，且 品种 抗病性 较低 的枣园 ，发现 病株，应 及时 刨除 并补 栽抗 病性 强的品种 ， 古树名 木除外 。 5.5.3 刨除

8、病树 后的树 坑应 晾晒 ，待残根风干后再进行补 植。 5.6 防治媒介昆虫 主 要媒介昆虫的 形态 特征和 发 生规 律参见附录 D； 可选用 内吸 性、 触杀 性的 杀虫剂； 使用方法按 照 GB/T 8321.8、 GB/T 8321.9和 GB 4285执行 。 5.7 疯枝清理 对于发 病较轻 （ 级以 下， 含 级）枣树的疯枝 、 带病根 蘖，应 立 即 清 除 。疯枝清理的原则 是 “ 疯 小枝去 大枝 ”， 即从 疯枝的上 一 级次 枝条 基部 去除 ，不 留桩 。 5.8 换头改造 对于发 病较 重 （ 级 以上 ， 含 级） 且有保 存价值 的病树 ， 利 用星 光、 黑腰

9、子等抗 病品种 进行多头 高 接 。高 接时 间一 般在 4月中下旬 5月 下 旬 。 高 接部位 宜 低不 宜高 ，并 及时 清除 砧木 萌蘖 。 5.9 输液治疗 对于发 病较轻 （ 级以 下， 含级）枣树和 古树 名木等 有保 留价值 的病树 ，可 进行树 干输液（ 滴 注 ） 治疗。治疗 时间 为枣树 展叶 后至开 花 前 1周 。输液治疗方法参见附录表 E.1， 药剂 使用量 参见附录 表 E.2。 DB11/T 1186-2015 3 A A 附 录 A （资料性附录） 枣疯病识别特征 A.1 地上部 分 被害植 株出 现叶 片变 小， 枝叶丛 生、 纤细 、小 叶黄 化等。 多出

10、 现在 新生的枣头 上 。花器症状 表现 为花器 退化， 花梗明显 延长 ，是 正常 花梗 的3 6倍 ，萼片 、花 瓣、 雄蕊 发育 成小叶 ，雌蕊 发育 成小枝。 枝叶症状 表现为 1年 生发 育 枝的主 芽和 多年 生发 育枝 上的隐 芽非正 常萌 发， 一年多次萌 生出 细小 枝叶 ， 病枝纤 细， 节间 缩短 ， 形 成“ 丛状 枝 ”。 果实 症状 表现为大 小不 一，果 面着色 不匀 ， 凸凹 不平， 凸起部位 呈 红 色， 凹陷 部位 呈绿 色，果肉疏 松， 失去 食用 价值 。 A.2 地下部 分 根部发 病后 ， 萌生的 根蘖也呈稠密 的丛 枝状， 长到 30cm左右便停

11、止生 长继而枯 死。病 根 发 病 初 期 皮 呈褐色 ，后 期形 成点 发性 溃疡斑 ，最 终死亡 。 DB11/T 1186-2015 4 B B 附 录 B （资料性附录） 枣疯病病树分级 枣疯病病树分级见 表B.1 。 表B.1 枣疯病病树分级 表 病级 表现症状 0 无 疯枝。 仅有 1 2 个 小 病枝，其他枝条外 观正常。 病枝占总枝量的 1/4 以 下，其 他枝条外观正常。 病枝占总枝量的 1/4 1/2以下 ，其他枝条外观正常。 病枝占总枝量的1/2 3/4 以 下， 但尚有枝条外观正常。 病枝占总枝量的3/4 以上（含） ，病枝遍布全树，基本无正常枝条。 DB11/T 11

12、86-2015 5 C C 附 录 C （资料性附录） 枣疯病植原体 PCR检 测和检 验 方法 C.1 枣树和植原体 总DNA 提取 方 法 C.1.1 CTAB碱裂解法 CTAB碱裂解 法总DNA提 取 方法如 下： a）取 枣树树 皮、 叶柄 、叶脉 、 根等 含韧皮部 组织， 用液氮 研磨 成粉末 状。 b） 称 取 0.1 g于 2 mL离心管中, 加入800 mL 65 预热的CTAB 提 取 液（2% CTAB 、 100 mM Tri s-HCl pH 8.0、 1.4 M NaCl、 20 mM EDTA、 0.2% -巯 基 乙醇 ） ， 65 水浴 1 h（ 期 间轻轻

13、混匀 几 次）。 c ） 加入等 体积酚 ：氯仿 ： 异戊醇 （25:24:1 ） 抽 提， 12000 rpm离心 10 min， 取上 清液 至离心 管。 d） 加入等 体积氯仿 轻轻 混 匀，12000 rpm 离心10 min ， 取上 清液 至离心 管。 e） 加入等 体积异丙醇 轻轻混 匀 。 f） 将混 匀的液体转 入 DNA吸 附 柱 CB3（ 吸 附 柱容积 为700 mL左右，可 分次 加入 离心 ）中， 12000 rpm离心30 sec ，弃掉废液。 g） 向吸 附柱 CB3中 加入 700 mL 70%乙醇 ， 12000 rpm离心30 sec ， 弃掉废 液， 将

14、 吸 附柱CB3 放 入 收 集 管 中， 然后 重复洗 脱步骤 。 h） 吸 附 柱 CB3放 入 收集管中，12000 rpm 离心2 min ， 倒掉废液。将 吸附柱CB3 放 入 1.5 mL离 K心 管 并于 室温 开盖放置 数分 钟，以 彻底晾干吸 附材 料中 残 余的 乙醇 。 i） 向吸 附膜 的中 央部 位悬空 滴 加100 mL 1 TE， 室 温放置 2 min 5 min， 12000 rpm离心2 min ， 将溶液 收集 到离心 管中，-20保 存备 用。 C.1.2 试剂盒法 可 直 接用 商品 化植物 基因 组DNA 快 速 提 取 试 剂 盒 提 取 。 C.

15、2 枣疯植原体的PCR 检 测验证 C.2.1 引物以 植原体 16S rRNA基 因保守序 列设计引物 对R16mF2/R2 （ R16mF2:5-CATGCAAGTCGAACGGA- 3，R16mR2:5-CTTAACCCCAATCATCGA-3 ）和 R16F2/R2（ R16F2:5-ACGACTGCTAAGACTGG-3,R1:5-TGA CGGGCGGTGACAAACCCC G-3 ） 进行 直接 PCR或Nested-PCR。 a）直 接 PCR反 应 体 系 (50 mL)： 1 mL5 mL模板 DNA， 1 mL 10 mM dNTP， 5 mL10 PCR buffer

16、， 1 mL4 mL 引物(R16mF2/R16mR2) ， 加 0.5 uL Taq酶， 加蒸馏水至 50 uL 。 扩 增条 件： 94 变 性 5 min； 94 ，45 s; 52 ，30 s; 72 , 90 s ；扩 增 30个35 个 循环 ，然 后 72 ，10 min 。 b） Nested-PCR： 取 直 接 PCR产 物 稀释 40倍后取1 uL 作DNA 模板，引物 为R16F2/R2 ，其它条件同直 接 PCR。 C.2.2 扩 增 产物用1% 琼脂糖凝胶电泳， 然后 于紫外 灯下 检 查1.2 kb （Nested-PCR ）和 1.4 kb（直 接P CR）的特

17、 异扩 增片 段的 有无 。 DB11/T 1186-2015 6 C.2.3 必 要 时回收PCR 扩 增产 物，进行片 段克隆 和测 序，进行 BLAST比对或系统 进化分 析，鉴 定确认 病 原。 DB11/T 1186-2015 7 D D 附 录 D （资料性附录） 常见传 病叶蝉 的生物学 特性 常见传病叶蝉的生物学特性见表 D.1。 表D.1 常见传 病叶蝉 的生物学 特性 生物 学特 性 凹缘菱纹叶蝉 Hishimonus sellatus （ Uhler） ,1896 片 突菱纹叶蝉 Hishimonus lamellatus Cai et Kuoh， 1995 中 华拟菱纹

18、叶蝉 Hishimonoides chinensis Anufriev,1970 红 闪 小 叶蝉 Typhlocyba sp. 形态 特征 属半翅目 Hemiptera， 叶蝉科 Cicadellidae。 成 虫体长 2.8 mm 3.4mm， 至 翅端 长 3.7mm 4.6mm。体 黄绿色， 头部前方突出， 具黄色 光泽， 头顶有数对不甚明显的淡黄褐色小斑 纹，复眼暗绿色，单眼黄色，前翅灰 白色， 半透明， 两翅合拢时呈菱纹 斑 。 虫体的腹面黄色或淡黄绿色，足淡黄 色，腹部背面中央黑褐色。 若虫共 5龄， 体 长 3.9mm 4.3mm， 头 冠 黄 绿 色 ， 疏 生 褐色小斑点。

19、复眼暗 绿色，单眼黄色，胸背面浓褐色，被 黄点。 属半翅目 Hemiptera， 叶蝉科 Cicadellidae。 成 虫体 长 2.75mm 3.1mm,至 翅端长 3.7mm 4.0mm。 成 虫 身 体 呈 污 黄 微 褐色， 腹部背面黑 褐色，侧缘区红黄色， 前翅污白。 整个虫体有 黄褐至暗褐色斑纹，其 中 在 头 冠 中 域偏前的 横槽区内有斑点 1对， 斑点前方近中央各有 1小斑点。 若虫，脱皮 4次, 共五 龄。雌性为黄褐色, 雄 性为黑褐色。 属半翅目 Hemiptera， 叶蝉 科 Cicadellidae。 成 虫体 长 3.3 mm 3.8mm， 头 部 淡 黄色，头顶

20、前缘具暗褐色 斑纹 1对。复眼暗红色。 小盾板淡黄色，具橙褐色 斑点。 若虫共 5龄，淡黄色，体 背黄褐色，有光泽，头部 和胸部背面具不规则褐 纹。 属半翅目 Hemiptera， 叶蝉科 Cicadellidae。 成 虫体狭长美 观， 雌虫体长 1.66 mm 66mm， 雄 虫体长 2.25 mm 2.38mm， 复 眼污白色， 越冬态复眼为黑 褐色。 成虫羽化初时有两种颜 色， 污白色或微黄色， 两天后 变黄白色。 成虫静止时从头的 前缘至后缘沿着头缝的两侧 各有 1条红色纵纹， 头缝处有 断续黄白色条纹，下 接 前 胸背 板红色斑， 近前缘斑纹中间有 微黄白色不很明显的“小” 字形红

21、色斑纹 1个。 羽化初期 为浅黄色， 两天后由微红变红 色 （第一代有少部分斑纹为黄 色，越冬态斑纹更明显）。 发生 规律 北京一年发生 5代，以越冬卵 在枣园 中及周边的桑树表皮下越冬，也可在 月季、蔷薇枝条上越冬。凹缘菱纹叶 蝉在不同寄主上的分布随季节发生变 化。第一代在 5月初由桑树、 月季上 的越冬卵孵化，幼虫在桑树、月季上 生长，5 月中下旬羽化交配后 ，成虫 部分迁飞至枣树上产卵，其后在枣树 上约 1月发生 1代。 9月10 月 份 发 生的第 45 代世代重叠， 进入发 生 高 峰期，9 月份部分回迁到桑树 上产卵 越冬。 一年发生 45 代。越 冬成虫于 5月上旬迁 回至枣产卵

22、，6 9 月 初在枣园中出现 3个 成虫高峰， 随后虫口密 度下降。 北京一年发生 3代，以卵 越冬，卵多产在枣树、酸 枣或其他寄主的一、二年 生枝条上，卵期约 232d。 枣树萌芽期开始孵化， 2d 3d即 达 到 盛 期，第一 代若虫期 （5 月上中旬）和 成 虫 期 （ 5 月 下 旬6 月中 旬） 集中而整齐。 6月中旬 自第二代成虫开始与第一 代成虫后期部分交替，以 后数代交错更加严重。 一年发生 2代， 以成虫在枣树 下及枣林附近杂草丛中越冬， 翌年 5月初枣芽萌发后上树产 卵、取食。5 月下旬 6月上 中旬为产卵盛期， 5月下旬 7 月为若虫发生期，8 月上中旬 为第 1代成虫产

23、卵盛期， 8月 中下旬9 月上中旬为若虫发 生盛期，8 月下旬第 2代成虫 开始羽化并准备越冬。 DB11/T 1186-2015 8 附 录 E （资料性附录） 输液治疗防治枣疯病方 法 输液治疗防治枣疯病方法见 表 E.1，表 E.2。 表 E.1 输液治疗防治枣疯病方 法 使用工具 手摇钻或电钻（钻头孔径 0.4cm） 、 输液器、袋子、管子、 针头。 药剂选择 四环素类农用抗生素 使用条件 树干直径超过 5cm的病树。 使用时间 在枣树展叶后至开花前至少 1周，北京地区通常在 5月份。 使 用 方 法 配药 按照药剂使用说明，用适量的干净清水溶解药剂后，用 46 层纱布或多层卫生纸过滤

24、，以减少沉淀 和杂质，有 利 于 加 快 树体吸收； 治疗药液要随用随配， 配制 好的药液要在 24h内 用 完 。 根 据 树 干 粗 度 和病情严重程度， 确定输液数量， 参见附录 B枣疯病病情分级标准和附表 D.2枣疯病树干 滴注治疗用 药量查算表。 打孔 打孔的位置一般在病树树干上离地面 20cm 30cm处 ， 用 手摇钻或电钻在树干上钻孔径 0.45cm、 深 达 木 质 部 2cm 3cm的 注 药 孔 ； 打 孔 时 钻 体 必 须 保 持 稳 定 ， 使 孔径均匀；钻注药孔时，钻头与树干的夹 角最好在 45左右；注药孔位 置尽可能与树上的疯枝相对应； 要 避免在死亡的木质部打

25、孔 ，同时注药 孔附近不能有树洞和裂缝，避免造成漏液。 输液 输液瓶（袋）应尽量挂高，宜为 1.2m以 上 ， 以加大压差，加快药液流量。为保证液流通畅，要排净 输液管道中的气体。然后将针头斜向下插入，旋紧，避免漏 液。插入针头后，打开输液器 开关，检查 输液瓶 （袋） 是否滴液、 针头 处是否漏液。 不滴液可能是排气不畅或针头堵塞造成的， 漏液可能是针 头插得不紧不严， 而漏液太快可能是注药孔打在了坏死或有裂缝的部位，应 及时纠正。 不漏液且能正 常滴液后，放到最大输液速度处输液，一般 24h左右输完。 使用注意事项 在输液前， 轻病树可按前述手术治疗方法去除疯枝， 一定不能留桩， 否则药液

26、达不到桩上影响输液的 治疗效果。也可以先输液，后去除疯枝，有利于药液到达全树。 DB11/T 1186-2015 9 表 E.2 枣疯病树 干输液治疗用药 量查算表 干径（cm） 干周（cm） 不 同 病级病树参考用药量（500mL： 瓶 ） 1级 2级 3级 4级 5级 5 15.7 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 6 18.84 0.5 0.5 0.5 0.5 1 7 21.98 0.5 0.5 1 1 1 8 25.12 1 1 1 1 1 9 28.26 1 1 1 1 1 10 31.4 1 1 1 1.5 1.5 11 34.54 1 1.5 1.5 1.5 1.5 12

27、37.68 1.5 1.5 1.5 1.5 2 13 40.82 1.5 1.5 2 2 2 14 43.96 2 2 2 2 2.5 15 47.1 2 2 2.5 2.5 2.5 16 50.24 2.5 2.5 2.5 2.5 3 17 53.38 2.5 2.5 3 3 3 18 56.52 3 3 3 3 3.5 19 59.66 3 3 3.5 3.5 3.5 20 62.8 3.5 3.5 3.5 4 4 21 65.94 3.5 4 4 4 4.5 22 69.08 4 4 4.5 4.5 5 23 72.22 4.5 4.5 5 5 5 24 75.36 5 5 5 5.5

28、5.5 25 78.5 5 5.5 5.5 6 6 26 81.64 5.5 6 6 6 6.5 27 84.78 6 6 6.5 6.5 7 28 87.92 6.5 6.5 7 7.5 8 29 91.06 7 7.5 8 8 8.5 30 94.2 8 8 8.5 8.5 9 E DB11/T 1186-2015 10 参 考 文 献 1 刘 孟军 ，赵 锦 ，周 俊 义 .枣疯病病 情分级体 系研究 J.河北农业 大学学 报， 2006， 29(1):31-33 2 樊 新萍 ，乔永胜 ，田 建保. 枣疯病 研究 进展 J.山西农业 大学学 报， 2006，5(6):14-17 3 潘

29、 青华 .枣疯病 研究 进 展及防治措施 J. 北京农业科学 ，2002， 3:4-8,21 4 刘 孟军 ，赵 锦， 周俊 义. 枣疯病 M.北京：中国农业 出版 社， 2010 5 田国忠，张 志善，李志 清 等 .我国不同 地区枣疯病 发 生 动态 和 主导 因 子分析 J. 林业科 学， 2002， 38（ 2） ：83-91 6 温 秀军，郭晓军 ，田国忠等. 枣树品种抗枣疯病的抗性鉴定及抗病机理 研究J. 林业科学 2005, 41(3):88-96 7 田国忠， 徐启聪 ，李 永 等 . 野 生酸 枣疯病与栽培 大枣疯病 发生的 关系 J. 植物保护 学报， 2009, 36（6

30、 ）：529-536 8 田国忠，李志 清 ， 胡佳 续 等. 我 国部 分枣树品种（ 系 ）对 枣疯病的 抗性 鉴定研究 J.林业科技 开 发 ，2013 ， 27 （ 3） ：19-25 9 赵京 芬， 胡佳 续 ， 宋 传生 等 .北京市 丰台 区主 栽枣树品种 对枣疯病 抗性 试验 J .中国 森林 病虫 ， 2010， 3：11-14 10 徐启聪 ，田国忠，王 振 亮 等 .中国 各地不 同枣树品种上 枣疯病植原体的 PCR检测 及分 子变 异分 析J . 微生物学 报， 2009， 49（ 11） ：1510-1519 11 孙淑梅 ， 张凤舞 ，田 旭 东 .枣疯病的媒介昆虫 凹缘 菱纹 叶蝉生物学和防治 研究J.植 保学 报， 1988， 15(3):173-177 12 王焯，于保 文， 周佩珍 等 . 枣疯病传 毒昆虫 研究 I. 传毒 昆虫 中国 拟菱纹叶蝉 J.植物病 理学报 ，1981， 3：25-29 13 王焯 ，刘 秀芳 ，周 佩珍 等 .枣疯病 综合 防治 技术研究J.中国果 树， 1988，2：40-41 14 田砚亭 ，王 红 艳 ，牛辰 等. 枣树 脱除 类菌 原体 (MLO)技术的 研究 J. 北京林业 大 学学 报， 1993， 15:20-26 _