DB11 T 1459.1-2017 实验动物 微生物学等级及监测 第1部分 实验用猪.pdf

1、ICS 65.020.30 B 44 DB11 北京市地方标准 DB11/T 1459.12017 实验 动物 微生 物学 等级 及监 测 第 1 部 分： 实验 用猪 Laboratory animalMicrobiological standards and monitoring Part 1: Experimental pig 2017 - 09 - 14 发布 2018 - 01 - 01 实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1459.12017 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引 用文件 1 3 术语与定 义 2 4 微生物学 等级分类 2 5 检测要求 2 6

2、 检测程序 3 7 检测方法 4 8 检测规则 6 9 检测判定 6 10 判定结 论 . 6 11 报告 . 7 I DB11/T 1459.12007 前 言 DB11/T 1459实验动物 微生物学等级及监测拟分为以下部分： 第1 部分： 实验用猪； 第2 部分： 实验用牛； 第3 部分： 实验用羊； 本部分为DB11/T 1459的第1 部分。 本部分按照GB/T 1.1 2009 给出的规 则起草。 本部分由北京市科学技术委员会提出并归口。 本部分由北京市科学技术委员会组织实施。 本部分起草单位：中国兽医药品监察所、北京市实验动物管理办公室。 本部分主要起草人：康凯、姚文生、范学政、

3、印春生、吴思捷、任小侠、刘莹、王锡乐、刘文菊。 II DB11/T 1459.12017 实验动 物 微生 物学等 级及监 测 第1 部分 ：实验 用猪 1 范围 本部分规定了实验用猪微生物学等级分类、 检测要求、 检测程序、 检测方法、 检测规则、 结果判定、 判定结论和报告等。 本部分适用于实验用猪微生物学等级监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 14926.46 实验动 物 钩端螺旋 体检测方法 GB/T 16551 猪瘟诊

4、断技 术 GB/T 18090 猪繁殖与呼 吸综合征诊断方法 GB/T 18638 流行性乙型 脑炎病毒诊断技术 GB/T 18641 伪狂犬病诊 断技术 GB/T 18646 动物布鲁氏 菌病诊断技术 GB/T 18935 口蹄疫诊断 技术 GB/T 19915.1 猪链球菌2 型平板和试 管凝集试验操作规程 GB/T 19915.2 猪链球菌2 型分离鉴定 操作规程 GB/T 19915.3 猪链球菌2 型PCR 定型 检测技术 GB/T 19915.7 猪链球菌2 型荧光PCR检测方法 GB/T 21674 猪圆环病毒 聚合酶链反应试验方法 GB/T 22333 日本乙型脑 炎病毒 反转

5、 录聚合酶链反应试验方法 GB/T 22915 口蹄疫病毒 荧光RT-PCR检测方法 GB/T 27517 鉴别猪繁殖 与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR 方法 GB/T 27528 口蹄疫病毒 实时荧光RT-PCR 检测方法 GB/T 27540 猪瘟病毒实 时荧光RT-PCR 检测方法 NY/T 537 猪放线杆菌胸膜肺炎诊断技术 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T 544 猪流行性腹泻诊断技术 NY/T 545 猪痢疾诊断技术 NY/T 546 猪萎缩性鼻炎诊断技术 NY/T 548 猪传染性胃肠炎诊断技术 NY/T 564 猪巴氏杆菌病诊断

6、技术 NY/T 566 猪丹毒诊断技术 NY/T 1186 猪支原体肺炎诊断技术 1 DB11/T 1459.12017 NY/T 2417 副猪嗜血杆菌PCR 检测方 法 SN/T 1207 猪痢疾检疫技术规范 SN/T 1447 猪传染性胸膜肺炎检疫技术规范 SN/T 1874 猪细小病毒病聚合酶链反应操作规程 SN/T 1919 猪细小病毒病红细胞凝集抑制试验操作规程 DB11/T 828.1 实验用小 型猪 第1 部 分：微生物学等级及监测 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实验用猪 experimental pig 经人工饲育， 对其携带的病原微生物和寄生虫实行控

7、制， 遗传背景明确或者来源清楚， 用于科学研 究、教学、生产和检定以及其它科学实验的猪。 3.2 普通级猪 conventional pig 不携带所规定的重要人兽共患病和猪烈性传染病病原微生物的实验用猪。 普通级猪中未免疫特定的疫苗， 且经检测不携带实验要求排除的特定病原微生物抗原抗体的实验用 猪，称为无特定抗原抗体实验用猪。 3.3 无特定病原体级猪 specific pathogen free pig 除普通级应排除的病原外， 不携带所规定的潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的微生物的实 验用猪。 4 微生物学等级分类 实验用猪依据病原微生物控制要求，分为普通级猪和无特定病原体级猪。

8、普通级猪应 不携带表1 中 所列的前8 种 病原微生物 ；无特定病 原体级猪应 不携带表1 中 所列的所有 病 原微生物。 5 检测要求 5.1 临床观察 实验用猪外观检查应无异常。 5.2 微生物检测项目 各等级实验用猪病原微生物检测项目见表1 。 2 DB11/T 1459.12017 表1 各等级实验用猪病原微生物检测项目 动物等级 病原微生物 检测要求 普 通 级 日本脑炎病毒Japanese encephalitis virus 猪链球菌2 型Streptococcus suis serotype 2 口蹄疫病毒Food and mouth disease virus 猪瘟病毒Cla

9、ssical swine fever virus 高致病性猪繁 殖与呼吸综合 征病毒 Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus 布鲁氏菌Brucella 钩端螺旋体Leptospira 红斑丹毒丝菌 Erysipelothrix rhusiopathiae 无 特 定 病 原 体 级 伪狂犬病病毒Pseudorabies virus 猪圆环病毒2 型Porcine circovirus 2 猪细小病毒Porcine parvovirus 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Porcine reproducti

10、ve and respiratory syndrome virus 猪胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniaes 猪肺炎支原体Mycoplasma hyopneumoniae 猪痢疾短螺旋体Brachyspira hyodysenteriae 传染性胃肠炎病毒Transmissible gastroenteritis virus 猪流行性腹泻病毒Porcine epidemic diarrhea virus 支气管败血波氏杆菌Bordetella bronchiseptica 多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida 副猪嗜血杆菌Haemo

11、philus Parasuis 注1： 应检测项目，普通级可免疫，无特定抗原抗体实验用猪和无特定病原体级不可免疫。 注2： 应检测项目。 注3： 必要时检测项目。 5.3 检测项目分类 依据实验用 猪病原微生 物的控制要 求，对表1 中 病原微生物 的检测要求 分为应检测 项目、必要 时检 测项目。 5.3.1 应检测项目 对实验用猪进行质量评价时必须检测的项目。 5.3.2 必要时检测项目 申请生产许可证、 从国外引进实验用猪、 疑有该病原微生物感染和实验特殊要求时应增加的检测项 目。 6 检测程序 3 DB11/T 1459.12017 检测程序见图1 。 注1：宜 选择 耳缘 静 脉或前

12、 腔静 脉 进行釆 血。 釆 血方法 以及毛发 、 皮屑 、 鼻 拭子、 咽拭 子 、肛拭 子（ 或 新鲜粪 便） 的采样方法应参照NY/T 541进行。 注2：检测结果存疑， 需要进一步确诊时，应 结合临床症状和前期检测结果， 按照表2中检测标准的要求采集动物组 织或特定样本进行进一步检测。 图1 检测程序 7 检测方法 实验用猪病原微生物的检测方法见表2 。 编号 外观检查 采样 耳后、背部毛发或皮屑* 检测* 结果判定 采血* 鼻拭子、咽喉拭子、肛拭子（或新鲜粪便）* 判定结论 麻醉 4 DB11/T 1459.12017 表2 实验用猪病原微生物检测方法 病原微生物 检测方法 检测标准

13、 适用范围 日本脑炎病毒 GB/T 18638 抗体检测 * 、 抗原 检测（血样 * ） GB/T 22333 核酸检测（脑组织） 猪链球菌2 型 GB/T 19915.1 抗体检测 GB/T 19915.23 抗原检测（动物组织、鼻腔拭子） GB/T 19915.7 核酸检测（咽喉拭子、血样、动物组织） 口蹄疫病毒 GB/T 18935 抗体检测、核酸检测（动物组织） GB/T 22915 核酸检测（血样、咽喉拭子） GB/T 27528 核酸检测（水泡液） 猪瘟病毒 GB/T 16551 抗体检测、核酸检测（动物组织） GB/T 27540 核酸检测（血样、粪便、扁桃体） 高致病性猪繁殖

14、与呼吸综合征病毒 GB/T 27517 核酸检测（鼻拭子、肛拭子、血样、动物组织） 布鲁氏菌 GB/T 18646 抗体检测（血清或奶样） 钩端螺旋体 GB/T 14926.46 抗体检测 红斑丹毒丝菌 NY/T 566 抗体检测、抗原检测（动物组织） 伪狂犬病病毒 GB/T 18641 抗体检测、抗原检测（动物组织） 、核酸检测（鼻拭子） 猪圆环病毒2 型 GB/T 21674 血清、核酸检测（动物组织） DB11/T828.1 附录A 抗体检测 猪细小病毒 SN/T 1874 核酸检测（动物组织、公猪精液） SN/T 1919 抗体检测 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GB/T 18090 抗体检

15、测、抗原检测（动物组织） 核酸检测（动物组织、血样、精液） 猪胸膜肺炎放线杆菌 NY/T 537 抗体检测、抗原检测（鼻拭子、动物组织） SN/T 1447 核酸检测（鼻拭子、动物组织） 猪肺炎支原体 NY/T 1186 抗体检测、抗原检测（咽喉拭子、鼻拭子、动物组织） 猪痢疾短螺旋体 NY/T 545 镜检（粪便、大肠组织） SN/T 1207 核酸检测（粪便、大肠组织） 传染性胃肠炎病毒 NY/T 548 抗体检测、抗原检测（动物组织、粪便） 核酸检测（动物组织、粪便） 猪流行性腹泻病毒 NY/T 544 抗体检测、抗原检测（动物组织、粪便） 核酸检测（动物组织、粪便） 支气管败血波氏杆菌

16、 NY/T 546 抗体检测、抗原检测（鼻拭子） 多杀性巴氏杆菌 NY/T 546 猪 传染性 萎缩 性鼻炎病 例中 产毒素性 多杀 性巴氏杆 菌检 测 （鼻拭子或病料） NY/T 564 猪巴氏杆菌病病例中多杀性巴氏杆菌的检测（病料） 副猪嗜血杆菌 NY/T 2417 核酸检测（气管分泌物、肺脏、关节液） 注 1：如无注明，用于抗体检测的样本均为血清。 注 2：抗原检测、核酸检测后“（）”中注明的是可用于检测的样本来源。 5 DB11/T 1459.12017 8 检测规则 8.1 检测频率 每6 个月应至 少检测1 次。 8.2 抽样 8.2.1 抽样方式 应选择2 月龄 以上的实验用猪用

17、于检测，随机抽样。 8.2.2 抽样数量 根据实验用猪群体大小，抽样数量见表3 。 表3 抽样数量 群体大小（头） 抽样数量 少于100 应不少于5 头 100500 应不少于10 头 大于500 应不少于15 头 8.2.3 方法 8.2.3.1 按 病毒、细菌、真菌、寄生虫检测要求可进行联合采样。 8.2.3.2 采 样方法应按照 NY/T 541 进行。 8.3 样本要求 样本应有明显标识，写明检品名称、品系、等级、数量及检测项目等内容，安全送达实验室。 9 检测判定 9.1 抗体检测 免疫项目，群体免疫合格率大于等于70% ，应判 定为合格。 非免疫项目，抗体阴性，应判定为合格。 9.2 抗原和核酸检测 未见阳性结果，应判定为合格。 10 判定结论 在检测的各等级实验用猪中， 如有任一指标不符合该等级实验用猪的标准指标要求， 应判定实验用 猪不符合该等级标准要求。 11 报告 6 DB11/T 1459.12017 应根据检测结果，出具报告。 _ 7