CNS 12632-2004 Method of test for fruit and vegetable juices and drinks－Determination of free amino acids《水果及蔬菜汁饮料检验法－游离胺基酸之测定》.pdf

1、 1 印行年月 94 年 10 月 本標準非經本局同意不得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 類號 ICS 67.160.20 N622112632經濟部標準檢驗局印行 公布日期 修訂公布日期 78 年 11 月 22 日 93 年 8 月 16 日 (共 2 頁 )水果及蔬菜汁飲料檢驗法 游離胺基酸之測定 Method of test for fruit and vegetable juices and drinks Determination of free amino acids 1. 適用範圍：本標準規定水果及蔬菜汁飲料中游離胺基酸之測定方法。 2. 檢驗方法 2.1 裝置、器具及材

2、料。 2.1.1 冷凍離心機或超高速離心機： 12000 rpm 以上。 2.1.2 濾膜：孔徑 0.2m， polyvinylidene difluoride 材質。 2.1.3 胺基酸分析儀 (Amino acid analyzer)。 2.1.3.1 前管柱：填充物 LKB Ultropac I, Biotronik, BTC-F, Durrum C-3 或同級品。 2.1.3.2 管柱：填充物 Durrum DC-6A, Biotronik BTC 3118, Biotronik BTC 2710, LKB Ultropac 8 或同級品。管柱材質可為玻璃或不銹鋼管柱，內徑長度分別為

3、3.2-9mm 140-500mm。 2.2 試藥：檸檬酸鋰鹽 (Tri-lithium citrate tetrahydrate)、氯化鋰 (Lithium chloride)、氫氧化鋰 (Lithium hydroxide)、酚 (Phenol)、濃鹽酸 (Hydrochloric acid, 37%)、乙氧基乙醇 (Ethylene glycol monoethyl ether) 或甲醇 (Methanol) 、硼酸 (Boric acid)、聚氧乙烯 (Brij 35)， 30%水溶液、硫二乙醇 (2,2 Thiodiethanol)、寧海準(Ninhydrin)溶液、醋酸鈉或醋酸鉀、

4、冰醋酸、乙二醇或乙氧 基乙醇、 15%三氯化鈦溶液 (Titanium (III) chloride solution, 15%)、還原態寧海準 (Hydrindantin)、檸檬酸鈉鹽 (Tri-sodium citrate)。 2.2.1 緩衝液：應依據各廠牌胺基酸分析儀之指示，配製 4 至 6 種不同 pH 值與莫耳濃度的緩衝液， pH 值範圍由 pH2.6 至 pH4.0。亦可使用已配製好的市售緩衝液產品。 2.2.2 指示劑：應依據各廠牌胺基酸 分析儀之指示配製。亦可使用已配製好的市售緩衝液產品。 2.2.3 標準溶液配製以檸檬酸鋰溶液 (pH 值 2.0 或 2.2，濃度依市售廠牌

5、而定 )配製以下標準溶液，每一種胺基酸標準品需經稱重後適當稀釋，儲存於 -18以下可保存 1 個月。 2.2.3.1 A 標準溶液：應包含以下胺基酸： Aspartic acid Threonine Serine Glutamic acid Proline Glycine Alanine Valine Methionine 2 CNS 12632, N 6221 Phenylalanine Amino butyric acid Ethanolamine Amonia Ornithine Lysine Histidine Arginine 2.2.3.2 B 標準溶液：應包含以下胺基酸： Asp

6、aragine Glutamine 2.2.3.3 C 標準溶液：僅含內標準品，可使用 Nor-Leucine 或 Nor-Valine 2.2.3.4 混合標準溶液：將 A、 B、 C 三種標準溶液以檸檬酸鋰溶液經適當稀釋倍數混合，上機時使用。 2.3 步驟 2.3.1 取試樣 1mL 於離心管中，加入已知濃度與量的 C 標準溶液 (第 2.2.3.3 節 )，以 12,000 rpm 離心 15 分鐘，經濾膜過濾後，視樣品濃度而定，加入檸檬酸鋰溶液 (pH 值 2.0-2.2)，以適當倍數稀釋 (通常為 1 至 10 倍 )混合後，以胺基酸自動分析儀分析。 2.3.2 分析條件視各廠牌胺基

7、酸自動分析儀而定，分析管柱溫度控制於 30-80之間。使用分析管柱前應先以氫氧化鋰溶液 (0.2 至 0.4N)進行管柱再生之步驟。 2.4 鑑別試驗及含量測定 2.4.1 鑑別試驗：以胺基酸混合標準溶液的滯留時間為鑑別標準。 2.4.2 含量測定：試樣中各種胺基酸波峰面積與內標準品波 峰面積比所得之比值，比對混合標準溶液 (第 2.2.3.4 節 )，並注意使用內標準品量與稀釋倍數，換算標準品濃度以求得各胺基酸之含量。 相對應國際標準： IFU Method No.57, 1989, Determination of Free Amino Acids 修訂日期：第一次修訂： 80 年 6 月 25 日