CNS 15075-2007 Determination of β- Agonists salbutamol in swine hair《猪只毛发中受体素之检验法－SALBUTAMOL之测定》.pdf

1、1 印月964月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 65.020.30 N419915075經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 964月10日 月日 (共3頁)豬隻毛髮中受體素之檢驗法salbutamol 之測定 Determination of -Agonists salbutamol in swine hair 1. 適用範圍：本標準規定豬隻毛髮中salbutamol受體素之檢驗方法。 2. 檢驗方法：氣相層析儀/質譜分析法(gas chromatography/mass spectrometry; GC/MS)。 2.1 裝置 2.1.1 氣相

2、層析儀/電子撞擊質譜儀(GC/electron impact mass spectrometer; EIMS) 2.1.1.1 層析管：DB-1MS(DB=Durabond)，內膜厚度0.25 m，內徑0.25 mm30 m或同級品。 2.1.2 試管振盪器(vortex) 2.1.3 離心機 2.1.4 抽氣泵(pump) 2.1.5 吹氮氣裝置 2.1.6 烘箱 2.2 試藥 2.2.1 甲醇(methanol)：LC級 2.2.2 乙腈(acetonitrile)：LC級 2.2.3 乙酸乙酯(ethylacetate)：LC級 2.2.4 37%濃鹽酸 2.2.5 氫氧化鈉 2.2.6

3、 BSTFA(N,O-Bistrimethylsilyltrifluoroacetamide)衍生劑 2.2.7 二次蒸餾水或去離子水 2.2.8 salbutamol標準品(Sigma)：儲存在陰暗低溫處。 2.3 器具及材料 2.3.1 褐色定量瓶 2.3.2 尖底離心管15 mL 2.3.3 C18固相萃取匣500 mg 2.3.4 GC樣品瓶：尖底1.5 mL。 2.4 試劑之調製 2.4.1 2 N NaOH溶液 取8 g NaOH溶於50 mL去離子水中，定量至100 mL。 2.4.2 5 N NaOH溶液 取20 g NaOH溶於50 mL去離子水中，定量至100 mL。 2

4、CNS 15075, N 4199 2.5 標準溶液配製：正確秤取標準品10 mg置於100 mL褐色定量瓶中，以甲醇溶解，並加至100 mL為標準原液。此標準原液儲存於510之冰箱內，三個月內可使用。使用時以甲醇稀釋標準品分別為100、50、25、12.5及6.25 ng/mL，各取0.1 mL進行衍生化反應以GC-MS分析。 2.6 衍生化反應：取0.1 mL甲醇稀釋溶液，於GC用之小瓶子中，置入吹氮裝置吹乾後，加入BSTFA 0.1 mL以試管振盪器振盪，置於烘箱以80加熱40 min，使salbutamol經trimethylsilylation(TMS)衍生化產生salbutamol

5、-3TMS。 2.7 檢液之調製 2.7.1 萃取：正確秤取毛髮樣品0.1 g，置於15 mL離心管中，以蒸餾水清洗之後，加入2 N NaOH 5 mL，振盪後，置入80烘箱中30 min(加熱約15 min時，取出試管將管壁上的毛髮震下)，冷卻至室溫後，加入37% HCl 1 mL，以4000 rpm(約2,000 g)離心5分鐘，將液體倒出至另一15 mL離心管中，以5 N NaOH調整pH至89，以4000 rpm離心5 min後靜置。 2.7.2 淨化：裝置C18固相萃取匣，先後以5 mL甲醇及5 mL二次蒸餾水活化管柱，將離心後之萃取液通過已洗淨處理之C18固相萃取匣，以二次蒸餾水5

6、 mL洗淨，抽乾10 min，以乙腈2 mL沖洗，抽乾5 min，以2 mL甲醇沖提出，並收集至15 mL離心管中。將收集之甲醇溶液以氮氣吹乾，添加100 L的二次蒸餾水，震盪後再加入1 mL之乙酸乙酯，經過4000 rpm離心5 min，取上層液裝入GC樣品瓶中，以氮氣吹乾後，進行衍生化反應後，以GC-MS分析。 2.8 鑑別試驗及含量測定 2.8.1 儀器分析條件 層析溫度：初溫70，恆溫1.5 min後以20 /min上升至230 中溫：230，恆溫5 min後以30 /min上升至300 終溫：300，恆溫5 min 注入器溫度：280 氦氣流速：1 mL/min 注入模式：不分流(s

7、plitless) 注入量：1 L 偵測模式：selective ion monitoring(SIM) 2.8.2 標準曲線製作 精確量取檢液及標準液衍生物各1 L，注入GC-MS中，參照上列條件進行層析，就檢液及標準溶液中salbutamol衍生物所得波峰之滯留時間及所得圖譜比對鑑別之。取稀釋標準品後5種濃度標準溶液所測得之波峰，做出標準曲線，求出檢體中salbutamol之含量(ppb)。 飼料樣品每g中含salbutamol數值(ng)CV/W。 C： 由標準曲線所求得樣品中salbutamol之濃度(ppb)=(面積截距)/斜率。 3 CNS 15075, N 4199 V：檢體最後經定量之體積(mL) W：取樣分析之重量(g) 備考： salbutamol衍生物取其主要子片段(salbutamol:m/z 86、369)，進選擇性子偵測模式(selective ion monitoring;SIM mode)偵測，並取m/z 86、m/z 369子之波鋒面積及濃做出標準曲線。