DIN 58910-2-2000 Haemostaseology - Determination of thromboplastin (prothrombin) time - Part 2 Reference measurement procedure for the determination in citrated venous blood《止血学 促凝.pdf

1、h DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise,nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlinh No part of this standard may be reproduced without the prior perm

2、ission of DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin.Beuth Verlag GmbH, Berlin, has the exclusive right of sale for German Standards (DIN-Normen).Ref. Nr. DIN 58910-2 : 2000-03Preisgr. 06 Vertr.-Nr. 0006Mrz 2000DEUTSCHE NORMHmostaseologieThromboplastinzeitbestimmungTeil 2: Referenzmeverfahrenfr

3、die Bestimmung in vensem Citratblut58910-2Normenausschu Medizin (NAMed) im DIN Deutsches Institut fr Normung e.V.Ersatz fr Ausgabe 1994-06Supersedes June 1994 editionICS 11.100Haemostaseology Determination of thromboplastin (prothrombin) time Part 2: Reference measurement procedure for the determina

4、tion in citratedvenous bloodHmostasiologie Dtermination du temps de Quick (temps de prothrombine) Partie 2: Mode opratoire de mesure de rfrence pour la dtermination sur lesang veineux citratVorwortDiese Norm wurde vom Arbeitsausschu C 5 Hmosta-seologie“ des Normenausschusses Medizin (NAMed) imDIN De

5、utsches Institut fr Normung e. V. in Zusammen-arbeit mit der Gesellschaft fr Thrombose- und Hmosta-seforschung e. V. erarbeitet.DIN 58910 Thromboplastinzeitbestimmung“ besteht aus: Teil 1: Referenzmeverfahren fr die Bestimmung invensem Citratplasma Teil 2: Referenzmeverfahren fr die Bestimmung inven

6、sem Citratblut Teil 3: Referenzmeverfahren fr die Bestimmung inKapillarcitratblut Teil 4: Referenzmeverfahren fr die Bestimmung inKapillarvollblutnderungenGegenber der Ausgabe Juni 1994 wurde folgende nde-rung vorgenommen: Die Norm wurde redaktionell berarbeitet.Frhere AusgabenDIN 58910-2: 1983-10,

7、1994-06Fortsetzung Seite 2 bis 4In case of doubt, the German-language version should beconsulted as the authoritative text.ForewordThis standard has been prepared by the Technical Com-mittee C 5 “Hmostaseologie” of the NormenausschuMedizin (Medicine Standards Committee) of DINDeutsches Institut fr N

8、ormung e. V. in cooperation withthe Gesellschaft fr Thrombose- und Hmostase-forschung e. V.DIN 58910 “Determination of thromboplastin (prothrom-bin) time” consists of: Part 1: Reference measurement procedure for thedetermination in plasma from citrated venous blood Part 2: Reference measurement proc

9、edure for thedetermination in citrated venous blood Part 3: Reference measurement procedure for thedetermination in citrated capillary blood Part 4: Reference measurement procedure for thedetermination in capillary bloodAmendmentsThe following amendment has been made to theJune 1994 edition: The sta

10、ndard has been editorially revised.Previous editionsDIN 58910-2: 1983-10, 1994-06Continued on pages 2 to 4B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 2DIN 58910-2 : 2000-031 AnwendungsbereichDiese Norm gilt fr die Bestimmung der Thromboplastin-zeit (TPZ) in vensem Citr

11、atblut.Die Thromboplastinzeitbestimmung wird angewendeta) zur Kontrolle einer pharmakotherapeutischen Beein-flussung der Blutgerinnung, insbesondere bei derBehandlung mit Vitamin-K-Antagonisten;b) als Globaltest fr das exogene System der Blutgerin-nung und zur Beurteilung der Synthesefunktion derLeb

12、er.Fr die Ermittlung der Thromboplastinzeiten mit dem indieser Norm beschriebenen Verfahren ergeben sich nurbei Verwendung qualitativ gleicher Thromboplastine ver-gleichbare Ergebnisse.ANMERKUNG: Unter qualitativ gleich“ ist gleicheEmpfindlichkeit gegenber gerinnungsfrdernden undgerinnungshemmenden

13、Faktoren zu verstehen.2 Normative VerweisungenDiese Norm enthlt durch datierte oder undatierte Verwei-sungen Festlegungen aus anderen Publikationen. Diesenormativen Verweisungen sind an den jeweiligen Stellenim Text zitiert, und die Publikationen sind nachstehendaufgefhrt. Bei datierten Verweisungen

14、 gehren spterenderungen oder berarbeitungen dieser Publikationennur zu dieser Norm, falls sie durch nderung oder ber-arbeitung eingearbeitet sind. Bei undatierten Verweisun-gengiltdieletzteAusgabederinBezuggenommenenPublikation.DIN 12650-2Mechanische, physikalische und elektrische Labor-gerte Volume

15、nmegerte mit Hubkolben Kol-benhubpipettenDIN 58905-1Hmostaseologie Blutentnahme Teil 1: Gewin-nung von vensem Citratplasma fr hmostaseolo-gische AnalysenDIN 58910-1Hmostaseologie Thromboplastinzeitbestimmung Teil 1: Referenzmeverfahren fr die Bestimmungin vensem CitratplasmaDIN 58939-1Hmostaseologie

16、 Referenzplasma Teil 1: Anfor-derungen, HerstellungDIN 58970-2Laborzentrifugen Zentrifugenrhrchen fr RZB bis40003BegrifeFr die Anwendung dieser Norm gelten die folgendenBegriffe:3.1 Thromboplastinzeit (TPZ)von vensem CitratblutDie In-vitro-Gerinnungszeit von vensem Citratblut nachZusatz von Calciumi

17、onen in Gegenwart eines Gewebe-thromboplastins.ANMERKUNG: Die Thromboplastinzeit von vensemCitratblut wird in Sekunden gemessen.1ScopeThis standard is applicable to the determination of thethromboplastin (prothrombin) time (PT) in citrated venousblood.The determination of thromboplastin (prothrombin

18、) time isused:a) for monitoring the influence of pharmacotherapy onblood coagulation, especially in the case of treatmentwith vitamin K antagonists;b) as a global test for the exogenous system of bloodcoagulation and for the evaluation of the synthesisfunction of the liver.When determining thrombopl

19、astin (prothrombin) times bythe procedure described in this standard, the results areonly comparable if qualitatively similar thromboplastinsare used.NOTE: “Qualitatively similar” means similar sensitivity tocoagulant and anticoagulant factors.2 Normative referencesThis standard incorporates by date

20、d or undated referenceprovisions from other publications. These normativereferences are cited at the appropriate places in the textand the publications are listed hereafter. For datedreferences, subsequent amendments to or revisions ofany of these publications apply to this standard only whenincorpo

21、rated in it by amendment or revision. For undatedreferences the latest edition of the publication referred toapplies.DIN 12650-2Mechanical, physical and electrical laboratory appara-tus Piston-operated volumetric apparatus PistonpipettesDIN 58905-1Haemostaseology Blood collection Part 1:Preparation

22、of plasma from citrated venous blood forcoagulation testingDIN 58910-1Haemostaseology Determination of thromboplastin(prothrombin) time Part 1: Reference measurementprocedure for the determination in plasma fromcitrated venous bloodDIN 58939-1Haemostaseology Reference plasma Part 1:Requirements, pre

23、parationDIN 58970-2Laboratory centrifuges Centrifuge tubes for relativecentrifugal acceleration up to 40003 Terms and definitionsFor the purposes of this standard, the following terms anddefinitions apply:3.1 Thromboplastin (prothrombin) time (PT)of citrated venous bloodThe in vitro clotting time of

24、 citrated venous blood afteradding calcium ions in the presence of a tissue thrombo-plastin.NOTE: The thromboplastin (prothrombin) time of citratedvenous blood is measured in seconds.B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 3DIN 58910-2 : 2000-033.2 Gewebethrombopla

25、stineLipoproteine in wrigen Extrakten aus bestimmtenWarmbltergeweben, die in Gegenwart einer definiertenCalciumionenkonzentration die Gerinnungszeit vonmenschlichem oder tierischem Blut bzw. Plasma um einMehrfaches verkrzen.3.3 Normales Bezugsblut (vens)Ein nach DIN 58905-1 gewonnenes venses Citratb

26、luteines gesunden Spenders, dessen Thromboplastinzeit imVerhltnis zur Thromboplastinzeit des aus 6 Volumen-teilen Plasma und 4 Volumenteilen Natriumchloridlsungmit c(NaCl)=0,15mol/l hergestellten verdnnten Refe-renzplasmas nach DIN 58939-1 den Thromboplastinzeit-quotienten 1 t 0,05 ergeben mu.4 Beze

27、ichnungBezeichnung der Bestimmung der Thromboplastinzeit(TPZ) in vensem Citratblut (B):TPZ-Bestimmung DIN 58910 B5 Entnahme und Aufbewahrung des Blutes5.1 BlutentnahmeDie Blutentnahme erfolgt nach DIN 58905-1.5.2 Aufbewahrung des vensen CitratblutesDas vense Citratblut wird unmittelbar nach der Ent-

28、nahme in ein Zentrifugenrhrchen aus Kunststoff, z. B.Rhrchen DIN 58970 14 100 K, berfhrt unddieses bei einer Temperatur von 189Cbis229Cver-schlossen aufbewahrt. Die Bestimmung ist sptestens 4 hnach der Blutentnahme durchzufhren.6 DurchfhrungUnmittelbar vor der Untersuchung ist das vense Citrat-blut

29、vorsichtig durch mehrmaliges Neigen des Zentrifu-genrhrchens unter Vermeidung von Schaumbildung zumischen. Fr die Durchfhrung der Bestimmung wird diemanuelle Hkchenmethode angewendet.ANMERKUNG: Die Hkchenmethode wurde wegen derguten Reproduzierbarkeit und einfachen Handhabungausgewhlt. Bei Verwendun

30、g von Thromboplastinrea-genzien mit langen Gerinnungszeiten in normalemBezugsblut (vens) kann auch die Kippmethodeangewendet werden.In einem Wasserbad mit einer Temperatur von(37 t 0,5)9C werden unsilikonisierte Zentrifugenrhrchenaus Glas, z. B. Rhrchen DIN 58970 14 100 G1, min-destens 5 min vorgewr

31、mt. In die Zentrifugenrhrchenwerden mit einer Kolbenhubpipette nach DIN 12650-20,1 ml venses Citratblut gegeben und 1 min darin belas-sen. Danach werden dem vensen Citratblut 0,2 ml calci-umionenhaltige Gewebethromboplastinsuspension1),dienach vorschriftsmiger Rekonstitution im Wasserbad auf(37 t 0,

32、5)9C vorgewrmt wurde, mit der Kolbenhub-pipette zugegeben und sorgfltig gemischt.1)Thromboplastine, die auf andere Weise als durchGewebeextraktion gewonnen wurden und vergleichbareErgebnisse liefern, drfen auch verwendet werden.3.2 Tissue thromboplastinsLipoproteins contained in aqueous extracts fro

33、m certaintissues of warm-blooded animals which, in the presenceof a specified calcium ion concentration, considerablyshorten the clotting time of blood or plasma of human oranimal origin.3.3 Normal blood (venous)Citrated venous blood of a healthy donor collected asdescribed in DIN 58905-1, the ratio

34、 of the thromboplastin(prothrombin) time of which in relation to the thrombo-plastin (prothrombin) time of the diluted reference plasmaas described in DIN 58939-1 (prepared by dilution of6 parts by volume of plasma with 4 parts by volume ofsodium chloride solution containing 0,15 mol/l NaCl)shallamo

35、unt to 1 t 0,05.4DesignationDesignation of the determination of thromboplastin time(PT) in citrated venous blood (B):Determination of PT DIN 58910 B5 Collection and storage of blood5.1 Blood collectionBlood collection shall be carried out as described inDIN 58905-1.5.2 Storage of citrated venous blo

36、odImmediately after collection, the citrated venous bloodshall be transferred into a centrifuge plastics tube, e.g.tube DIN 58970 14 100 K, then be capped andstored at a temperature of 189Cto229C. The determina-tion shall be carried out 4 h after the blood collection atthe latest.6 ProcedureImmediat

37、ely before the determination, the citrated venousblood shall be mixed by carefully tilting the centrifuge tubeseveral times back and forth while avoiding the formationof foam. The manual hook method shall be used to per-form the determination.NOTE: The hook method was selected because of itsgood rep

38、roducibility and easy execution. If thrombo-plastin reagents with long clotting times in normalreference blood (venous) are used, the tilt techniquemay also be used.Unsiliconized centrifuge glass tubes, e.g. tubesDIN 58970 14 100 G1, are prewarmed for at least5 min in a waterbath to a temperature of

39、 (37 t 0,5)9C.0,1 ml of citrated blood shall be pipetted into the centri-fuge tubes by means of a piston pipette as described inDIN 12650-2 and then incubated for 1 min. The tissuethromboplastin suspension1)containing calcium ions isreconstituted according to the instructions of the manu-facturer an

40、d prewarmed to (37 t 0,5)9C in a waterbath.Then 0,2 ml of this suspension are added to the citratedvenous blood by means of a piston pipette and gentlymixed.1)Thromboplastins prepared in a way other than byextraction of tissues that lead to comparable resultsmay also be used.B55EB1B3E14C22109E918E8E

41、A43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 4DIN 58910-2 : 2000-03Gleichzeitig mit der Zugabe wird eine Stoppuhr in GanggesetztundeinHkchenausPlatininregelmigenAbstnden von etwa 0,5 s durch das Reaktionsgemischgefhrt. Beim Auftreten eines ersten, am Hkchen erkenn-baren Gerinnsels wird die Uhr

42、 gestoppt, die angezeigteReaktionszeit festgestellt und als Thromboplastinzeitangegeben.ANMERKUNG: Bei der Kippmethode ist das Zentrifugen-rhrchen in regelmigen Abstnden von etwa 1 s zuneigen und der Eintritt der Gerinnung zu beobachten.Eine zweite Bestimmung ist in gleicher Weise durchzu-fhren. Fal

43、ls beide Thromboplastinzeiten mehr als t 3%vom Mittelwert abweichen, ist eine erneute Doppelbestim-mung erforderlich. Der Mittelwert der Doppelbestimmungist die Thromboplastinzeit der vensen Citratblutprobe.7 ErgebnismitteilungDie Thromboplastinzeit der vensen Citratblutprobe wirdals Zwischenergebni

44、s ber die Thromboplastinzeit desunter 3.3 beschriebenen normalen Bezugsblutes (vens)zur Bildung des QuotientenQ-TPZ =TPZ der vensen CitratblutprobeTPZ des normalen Bezugsblutes (vens)verwendet.Die Angabe als INR (siehe DIN 58910-1) ist zulssig,sofern vom Hersteller des Thromboplastinreagenzes einISI

45、 1 fr die Methode angegeben ist.ANMERKUNG: Die Gerinnungsaktivitt kann aus dergemessenen Gerinnungszeit auch in Prozent der Akti-vitt eines normalen Bezugsblutes (vens) ber eineBezugskurve in Koordinatennetzen mit logarithmi-scher bzw. reziproker Achsenteilung ermittelt werden.Literaturhinweise1 Bee

46、ser, H. et al.: Kontrolle der oralen Antikoagulanti-entherapie II: Standardisierung von Hepato Quicknach dem WHO-Modell fr den Einsatz von Kapillar-vollblut; Lab. med. 15 (1991), 158163A stopwatch is started simultaneously when adding thesuspension. A platinum hook is passed through thereaction mixt

47、ure at regular intervals of about 0,5 s. Thestopwatch is stopped when the first clot can be detectedon the hook and the measured clotting time is recordedand indicated as thromboplastin (prothrombin) time.NOTE: When the tilt-technique is applied, the centrifugetube shall be tilted back and forth at regular intervalsof about 1 s until the first clot can be observed.A second determination shall be carried out in the sameway. If both thromboplastin (prothrombin) times deviate bymore than t 3% from the