DIN 58939-1-2000 Haemostaseology - Reference plasma - Part 1 Requirements preparation《止血学 基准血浆 第1部分 要求和制备》.pdf

1、h DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise,nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlinh No part of this standard may be reproduced without the prior perm

2、ission of DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin.Beuth Verlag GmbH, Berlin, has the exclusive right of sale for German Standards (DIN-Normen).Ref. Nr. DIN 58939-1: 2000-03Preisgr. 07 Vertr.-Nr. 0007Mrz 2000DEUTSCHE NORMHmostaseologieReferenzplasmaTeil 1: Anforderungen, Herstellung58939-1Norm

3、enausschu Medizin (NAMed) im DIN Deutsches Institut fr Normung e.V.Ersatz fr Ausgabe 1994-06Supersedes June 1994 editionICS 11.100Haemostaseology Reference plasma Part 1: Requirements,preparationHmostasiologie Plasma de rfrence Partie 1: Critres,prparationVorwortDiese Norm wurde vom Arbeitsausschu C

4、 5 Hmo-staseologie“ des Normenausschusses Medizin (NAMed)im DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. in Zusammen-arbeit mit der Gesellschaft fr Thrombose- und Hmo-staseforschung e.V. erarbeitet.nderungenGegenber der Ausgabe Juni 1994 wurde folgende nde-rung vorgenommen: Die Norm wurde redaktionell ber

5、arbeitet.Frhere AusgabenDIN 58939-1: 1979-01, 1987-05, 1994-061 AnwendungsbereichDiese Norm gilt fr die Herstellung und Aufbewahrungeines Referenzplasmas im Bereich der Hmostaseologie.2 Normative VerweisungenDiese Norm enthlt durch datierte oder undatierte Verwei-sungen Festlegungen aus anderen Publ

6、ikationen. Diesenormativen Verweisungen sind an den jeweiligen Stellenim Text zitiert, und die Publikationen sind nachstehendaufgefhrt. Bei datierten Verweisungen gehren spterenderungen oder berarbeitungen dieser PublikationennurzudieserNorm,fallssiedurchnderungoderberar-beitung eingearbeitet sind.

7、Bei undatierten Verweisungengilt die letzte Ausgabe der in Bezug genommenen Publi-kation.Fortsetzung Seite 2 bis 6In case of doubt, the German-language version should beconsulted as the authoritative text.ForewordThis standard has been prepared by the Technical Com-mittee C 5 “Hmostaseologie” of the

8、 NormenausschuMedizin (Medicine Standards Committee) of DINDeutsches Institut fr Normung e.V. in cooperation withthe Gesellschaft fr Thrombose- und Hmostase-forschung e.V.AmendmentsThe following amendment has been made to theJune 1994 edition: The standard has been editorially revised.Previous editi

9、onsDIN 58939-1: 1979-01, 1987-05, 1994-061ScopeThis standard is applicable to the preparation and storageof a reference plasma in the field of haemostaseology.2 Normative referencesThis standard incorporates by dated or undated referenceprovisions from other publications. These normative refer-ences

10、 are cited at the appropriate places in the text andthe publications are listed hereafter. For dated references,subsequent amendments to or revisions of any of thesepublications apply to this standard only when incorpo-rated in it by amendment or revision. For undated refer-ences the latest edition

11、of the publication referred toapplies.Continued on pages 2 to 6B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 2DIN 58939-1: 2000-03DIN 50014Klimate und ihre technische Anwendung Normalkli-mateDIN 58361-1Transfusion, Infusion Transfusionsbehltnisse undZubehr Transfusionsfl

12、aschen (schwer)DIN 58970-1Laborzentrifugen Begriffe, Anforderungen3BegrifeFr die Anwendung dieser Norm gelten die folgendenBegriffe:3.1 ReferenzplasmaEin gepooltes Normalplasma, das bei Verwendung dergleichen Reagenzien, Methoden und Arbeitstechnik anverschiedenen Orten die gleiche Gerinnungsfhigkei

13、taufweist und an zentraler Stelle bei 709C tiefgefrorenoder lyophilisiert gelagert wird.3.2 Gepooltes NormalplasmaEin Plasma, das die Anforderungen nach Abschnitt 5erfllt und das nach 6.1 bis 6.5 gewonnen wird.3.3 Kalibrierung eines Plasmasfr die vergleichendeThromboplastinzeitbestimmungFeststellung

14、 der Gerinnungsfhigkeit des Plasmas bezo-gen auf den Wert der Gerinnungsfhigkeit des Referenz-plasmas.3.4 Vergleichende ThromboplastinzeitDer Vergleich der Gerinnungszeiten von Plasmen mitThromboplastinen unterschiedlicher Herkunft und Emp-findlichkeit in bezug auf die Thromboplastinzeiten desRefere

15、nzplasmas mit der jeweiligen Thromboplastinpr-paration.3.5 GerinnungsfhigkeitDie Gesamtheit seiner gerinnungsfrdernden und gerin-nungshemmenden Aktivitten, die die Gerinnung des ls-lichen Fibrinogens in das unlsliche Fibrin bewirken.ANMERKUNG: Ein quantitatives Ma fr die Gerinnungs-fhigkeit ist die

16、Gerinnungszeit.3.6 GerinnungszeitDie Dauer vom Zeitpunkt der Auslsung der Gerinnungs-aktivierung durch Komplettierung des Reaktions-gemisches bis zur ersten Wahrnehmung eines Fibrin-gerinnsels.4 BezeichnungBezeichnung des Referenzplasmas (RP):Referenzplasma DIN 58939 RP5 Anforderungen5.1 Spender5.1.

17、1 Die Spender mssen mnnlichen Geschlechts undzwischen 20 und 40 Jahre alt sein.ANMERKUNG: Es sollte mglichst immer dasselbe Spen-derkollektiv verwendet werden.DIN 50014Climates and their technical application StandardatmospheresDIN 58361-1Transfusion, infusion Transfusion containers andaccessories T

18、ransfusion bottles (heavy)DIN 58970-1Laboratory centrifuges Concepts, requirements3 Terms and definitionsFor the purposes of this standard, the following terms anddefinitions apply:3.1 Reference plasmaA normal pooled plasma having the same coagulability atdifferent locations when using the same reag

19、ents, meth-ods and techniques. The reference plasma is stored at acentral location either deep-frozen at 709Corlyophi-lized.3.2 Normal pooled plasmaA plasma meeting the requirements as specified inclause 5 and processed as described in 6.1 to 6.5.3.3 Calibration of a plasmafor comparative thrombopla

20、stintime determinationThe determination of the coagulability of a plasma relatedto coagulability of the reference plasma.3.4 Comparative thromboplastin timeThe comparison of the clotting times of plasmas usingthromboplastins of different sources and sensitivity inrelation to the thromboplastin times

21、 of the referenceplasma using the corresponding thromboplastin prepara-tion.3.5 CoagulabilityThe total of its coagulant and anticoagulant activitieswhich cause the coagulation of soluble fibrinogen forminginsoluble fibrin.NOTE: A quantitative measurement of coagulability isrepresented by the clottin

22、g time.3.6 Clotting timeThe period of time from the triggering of the coagulationactivation by completion of the reaction mixture to theoccurrence of the first detectable fibrin clot.4DesignationDesignationofthereferenceplasma(RP):Reference plasma DIN 58939 RP5Requirements5.1 Donors5.1.1 Donors shal

23、l be male and between 20 and40 years old.NOTE: If at all possible, the identical collective of donorsshould be used.B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 3DIN 58939-1: 2000-035.1.2 Die Spender mssen Nichtraucher sein und dr-fen nicht unter dem Einflu von Medikame

24、nten stehen.5.1.3 Die Spender mssen morgens nchtern und aus-geruht kommen. Sie drfen mindestens 2 h vor der Blut-entnahme keinen krperlichen Anstrengungen ausge-setzt sein.5.1.4 Die Spender mssen vor der Blutentnahme einleichtes Frhstck zu sich nehmen, das ausa) schwarzem Tee oder Kaffeeundb) Zwieba

25、ck, Brot oder Semmel mit Marmeladezu bestehen hat.5.1.5 Die Spender mssen sich physisch gesund fhlenund bei folgenden Voruntersuchungen im fr die Klini-sche Chemie und Hmatologie gltigen Referenzbereichliegen:a) Hmatokritb) Enzymbestimmungen: Aspartat-Amino-Transferase ASAT (EC 2.6.1.1)1) Alanin-Ami

26、no-Transferase ALAT (EC 2.6.1.2)1) Gamma-Glutamyl-Transpeptidase g-GT(EC 2.3.2.2)1)c) Erythrozyten-Sedimentation (ESR)d) Prfung des Plasmas auf Lipmie (OD320 2,0)e) Bestimmung (2fach) der Thromboplastinzeit (TPZ)f) Bestimmung (2fach) der aktivierten partiellen Throm-boplastinzeit (APTT)Die Thrombopl

27、astinzeit und aktivierte partielle Thrombo-plastinzeit der Spender werden bestimmt. Aus den erhal-tenen Werten wird der Mittelwert gebildet und die Stan-dardabweichung berechnet. Die Werte der Spender, dieauerhalb des 2s-Bereiches liegen, werden eliminiert.Aus den verbleibenden Werten wird erneut de

28、r Mittelwertgebildet.g) Bestimmung des Faktors VDie Bestimmung des Faktors V wird mit der Einstufen-methode durchgefhrt.h) FibrinogenDie Fibrinogenkonzentration mu im Bereich von1,5 g/l bis 4 g/l bei Bestimmung mit der Methodenach Clauss liegen.i) Hepatitis B, Hepatitis C, HIV 1 und HIV 2Die Spender

29、 mssen unter Anwendung der in derTransfusionsmedizin anerkannten Methoden zurSpenderauswahl antigen- bzw. antikrpernegativ sein.Spender mit bekannten Gerinnungsdefekten sind auszu-schlieen.Die Voruntersuchungen sind an einem Tag durchzufh-ren. Die Gerinnungsuntersuchungen sind innerhalb einerZeitspa

30、nne von 2 h bis 4 h nach Blutentnahme durchzu-fhren.Die Zeitspanne zwischen Voruntersuchungen und Blut-entnahme fr die Herstellung des Pools darf 7 Tage nichtberschreiten.In den Einzelspenderplasmen zur Herstellung des Poolssind die unter 6.2.2 aufgefhrten Kontrollen durchzu-fhren.5.2 Gepooltes Norm

31、alplasma5.2.1 Fr die Bildung eines Pools sind mindestens30 Spenderplasmen erforderlich.1)Bezeichnung nach IUPAC (International Union of Pureand Applied Chemistry)5.1.2 Donors shall be non-smokers and shall not havetaken medication.5.1.3 Donors shall arrive in the morning, rested and withan empty sto

32、mach. They shall not have been subject toany physical strain for at least 2 h prior to donating blood.5.1.4 Before the collection of blood, donors shall have alight breakfast which shall consist ofa) black tea or coffeeandb) rusk, bread or rolls with jam.5.1.5 Donors shall feel physically healthy an

33、d be withinthe reference interval valid in clinical chemistry and hae-matology when performing the following preliminaryexaminations:a) haematocritb) enzyme determinations: aspartate aminotransferase ASAT (EC 2.6.1.1)1) alanine aminotransferase ALAT (EC 2.6.1.2)1) gamma glutamyle transpeptidase g-GT

34、(EC 2.3.2.2)1)c) erythrocyte sedimentation reaction (ESR)d) examination of plasma for lipaemia (OD320 2,0)e) determination (in duplicate) of thromboplastin (pro-thrombin) time (PT)f) determination (in duplicate) of activated partial throm-boplastin time (APTT)The thromboplastin (prothrombin) time an

35、d the activatedpartial thromboplastin time of the donors are determined.Thearithmeticmeanandthestandarddeviationarecal-culated from the obtained results. The values of thedonors which are outside of the 2 s range are eliminated.The arithmetic mean is recalculated using the remainingvalues.g) factor

36、V determinationFactor V is determined using the one-stage method.h) fibrinogenThe fibrinogen concentration shall be in the rangefrom 1,5 g/l to 4 g/l when using the Clauss method.i) hepatitis B, hepatitis C, HIV 1 and HIV 2The donors shall be negative when tested for antigensand antibodies respectiv

37、ely by methods recognized intransfusion medicine for the selection of donors.Donors with known defects in the coagulation systemshall be excluded.The preliminary examinations shall be performed within aday. The coagulation tests shall be carried out within aperiod of time ranging from 2 h to 4 h aft

38、er the collectionof blood.The period of time between preliminary examinations andcollection of blood for the preparation of the pool shall notexceed 7 days.Thecontrolslistedin6.2.2shallbecarriedoutintheindi-vidual donor plasmas to be used for the preparation of thepool.5.2 Normal pooled plasma5.2.1

39、To form a pool, at least 30 donor plasmas arerequired.1)Designation as specified by IUPAC (International Unionof Pure and Applied Chemistry)B55EB1B3E14C22109E918E8EA43EDB30F09CC9B7EF8DD9NormCD - Stand 2007-03 Seite 4DIN 58939-1: 2000-035.2.2 Das Poolen der Einzelspenderplasmen muinnerhalb von 8 h na

40、ch der Blutentnahme durchgefhrtwerden.5.2.3 Bei Prfung nach Abschnitt 7 darf der Pool nur solange verwendet werden, wie die prozentuale Abwei-chung der Quotienten der Thromboplastinzeit aus denmiteingelagerten lyophilisierten anormalen Plasmen zudem Referenzplasma nicht grer als 5% ist.5.3 Blutentna

41、hme5.3.1 Die Blutentnahme ist vens am liegenden Spen-der durchzufhren.5.3.2 Der Staudruck mu 5,32kPa (40mmHg) betra-gen.5.3.3 Das abzunehmende Blutvolumen betrgt 450 ml.5.3.4 Das Blut wird in fabrikneuen 500-ml-Transfusions-flaschen nach DIN 58361-1 abgefllt. Die Transfusionsfla-schen mssen silikoni

42、siert und anschlieend sterilisiertsein.5.3.5 9 Volumenteile Blut werden unter Vorlage von1 Volumenteil sterile Trinatriumcitratlsung mitc (Na3C6H5O7)=0,11mol/l entnommen. Das Mischungs-verhltnis ist genau einzuhalten.6 Plasmagewinnung6.1 Erstes Zentrifugieren6.1.1 Das Blut in den Transfusionsflasche

43、n wird beieiner relativen Zentrifugalbeschleunigung2)von 2 000 beieiner Temperatur des Zentrifugeninnenraums von 159C20 min zentrifugiert.6.1.2 Nach Beendigung des Zentrifugierens darf dieauslaufende Zentrifuge nicht abgebremst werden.6.2 Erstes Abhebern6.2.1 Das Plasma wird mit einem berleitungsger

44、tunter Schonen des buffy coat“ (bis 1 cm ber dem buffycoat“) abgehebert.6.2.2 In den Einzelspenderplasmen werden folgendeKontrollen durchgefhrt:a) Hepatitis B, Hepatitis C, HIV 1 und HIV 2Die Einzelspenderplasmen mssen unter Anwendungder in der Transfusionsmedizin anerkannten Metho-den zur Spenderau

45、swahl antigen- bzw. antikrper-negativ sein.b) Prfung des Plasmas auf Lipmie (OD320 2,0)c) HmolyseEs darf keine sichtbare Hmolyse vorliegen.d) ThromboplastinzeitDie Thromboplastinzeit mu innerhalb des in 5.1.5ermittelten 2s-Bereiches liegen.6.2.3 Unmittelbar nach dem Abhebern und der Ent-nahme der Pr

46、oben fr die Kontrolluntersuchungen wirddas Plasma mit einer 40 %igen N-2-Hydroxyethylpiper-azin-N-2-Ethansulfonsure-Lsung HEPES-Lsung(pH = 7,4 bei 209C) versetzt, so da die Endkonzen-tration 11,9 g/l betrgt.2)Siehe DIN 58970-15.2.2 Pooling of individual donor plasmas shall be car-riedoutwithin8hafte

47、rthecollectionofblood.5.2.3 When tested as described in clause 7, the poolmaybeusedonlyaslongasthepercentagedeviationofthe ratios of the thromboplastin (prothrombin) time of themutually stored lyophilized abnormal plasmas in relationto the reference plasma does not exceed 5%.5.3 Collection of blood5.3.1 Venous blood shall be drawn from the recliningdonor.5.3.2 The pressure of tourniquet shall be 5,32 kPa(40 mmHg).5.3.3 The volume of blood to be drawn shall be 450 ml.5.3.4 The blood shall be filled into brand-new 500 mltransfusion bottles complyi