DIN EN ISO 20079-2006 Water quality - Determination of the toxic effect of water constituents and waste water on duckweed (Lemna minor) - Duckweed growth inhibition test (ISO 20079.pdf

1、Dezember 2006DEUTSCHE NORM Normenausschuss Wasserwesen (NAW) im DINPreisgruppe 12DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 13.060.70!,p3:“9771623www.din.deDDIN EN ISO 2

2、0079Wasserbeschaffenheit Bestimmung der toxischen Wirkung von Wasserinhaltsstoffen undWasserlinsen-Wachstumshemmtest (ISO 20079:2005);Deutsche Fassung EN ISO 20079:2006Water quality Determination of the toxic effect of water constituents and waste water on duckweedDuckweed growth inhibition test (IS

3、O 20079:2005);German version EN ISO 20079:2006Qualit de leau Dtermination de leffet toxique des constituants de leau et des eaux rsiduaires vis-visEssai dinhibition de la croissance des lentilles deau (ISO 20079:2005);Version allemande EN ISO 20079:2006Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag Gmb

4、H, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 38 SeitenAbwasser gegenber Wasserlinsen (Lemna minor) (Lemna minor) des lentilles deau (Lemna minor) DIN EN ISO 20079:2006-122Diese Norm ist Bestandteil der ReiheDeutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- undSchlammuntersuchung Testverfahren mit Wasser

5、organismen (Gruppe L)und beschreibt das VerfahrenBestimmung der toxischen Wirkung von Wasserinhaltsstoffen undAbwasser gegenber Wasserlinsen (Lemna minor) Wasserlinsen-Wachstumshemmtest (L 49).Nationales VorwortDieses Dokument (DIN EN ISO 20079:2006) wurde vom Technischen KomiteeISO/TC 147 Wasserbes

6、chaffenheit“ in Zusammenarbeit mit dem TechnischenKomitee CEN/TC 230 Wasseranalytik“ erarbeitet, dessen Sekretariat vom DIN(Deutschland) gehalten wird.Das zustndige deutsche Gremium ist der NA 119-01-03-05-01 AK Biotests“des NA 119-01-03 AA Wasseruntersuchung“ im Normenausschuss Wasser-wesen (NAW).D

7、iese Norm wurde fr die Umsetzung der Richtlinie 2000/60/EG des europi-schen Parlaments und des Rates vom 23. Oktober 2000 zur Schaffung einesOrdnungsrahmens fr Manahmen der Gemeinschaft im Bereich derWasserpolitik1)entwickelt.Fr die Durchfhrung des Verfahrens im nationalen Anwendungsbereich istaussc

8、hlielich das modifiziertes STEINBERG-Medium zu benutzen.Es ist erforderlich, bei den Untersuchungen nach dieser Norm Fachleute oderFacheinrichtungen einzuschalten und bestehende Sicherheitsvorschriften zubeachten.Bei Anwendung der Norm ist im Einzelfall je nach Aufgabenstellung zu prfen,ob und inwie

9、weit die Festlegung von zustzlichen Randbedingungen erforder-lich ist.Die als DIN-Normen verffentlichten Einheitsverfahren sind bei der BeuthVerlag GmbH einzeln oder zusammengefasst erhltlich. Auerdem werden diegenormten Einheitsverfahren in der Loseblatt-Sammlung Deutsche Einheits-verfahren zur Was

10、ser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung“ gemeinsamvom Beuth Verlag GmbH und von dem Wiley-VCH Verlag publiziert.Alle fr die Abwasserverordnung (AbwV) enthalten in der neuen Verordnungzu 7a des Gesetzes zur Ordnung des Wasserhaushaltes (WHG) ber Anfor-derungen an das Einleiten von Abwasser in Gewsser

11、 und zur Anpassung desAbwasserabgabengesetzes“ relevanten Einheitsverfahren sind zusammen1) Nachgewiesen in der DITR-Datenbank, zu beziehen bei: Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin.DIN EN ISO 20079:2006-123mit der AbwV und dem WHG und allen noch fortgeltenden Abwasserverwal-tungsvorschriften als Losebla

12、ttsammlung Analysenverfahren in der Abwasser-verordnung Rechtsvorschriften und Normen“ mit dem Ergnzungsband 1(DIN-Normen), Ergnzungsband 2 (DIN-EN- und DIN-EN-ISO-Normen) unddem Ergnzungsband 3 (DIN-, DIN-EN- und DIN-EN-ISO-Normen) herausge-geben worden.Normen oder Norm-Entwrfe mit dem Gruppentitel

13、 Deutsche Einheitsverfah-ren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung“ sind in folgendeGebiete (Haupttitel) aufgeteilt:Allgemeine Angaben (Gruppe A) (DIN 38402)Sensorische Verfahren (Gruppe B) (DIN 38403)Physikalische und physikalisch-chemische Kenngren (Gruppe C) (DIN 38404)Anionen (Gruppe D)

14、 (DIN 38405)Kationen (Gruppe E) (DIN 38406)Gemeinsam erfassbare Stoffgruppen (Gruppe F) (DIN 38407)Gasfrmige Bestandteile (Gruppe G) (DIN 38408)Summarische Wirkungs- und Stoffkenngren (Gruppe H) (DIN 38409)Biologisch-kologische Gewsseruntersuchung (Gruppe M) (DIN 38410)Mikrobiologische Verfahren (Gr

15、uppe K) (DIN 38411)Testverfahren mit Wasserorganismen (Gruppe L) (DIN 38412)Einzelkomponenten (Gruppe P) (DIN 38413)Schlamm und Sedimente (Gruppe S) (DIN 38414)Suborganismische Testverfahren (Gruppe T) (DIN 38415).Auer den in der Reihe DIN 38402 bis DIN 38415 genormten Untersuchungs-verfahren liegen

16、 eine Reihe Internationaler und Europischer Normen als DIN-EN-, DIN-EN-ISO- und DIN-ISO-Normen vor, die ebenfalls Bestandteil derDeutschen Einheitsverfahren“ sind.ber die bisher erschienenen Teile dieser Normen gibt die Geschftsstelle desNormenausschusses Wasserwesen (NAW) im DIN Deutsches Institut

17、frNormung e.V., Telefon 030 26012448, oder die Beuth Verlag GmbH, 10772Berlin (Hausanschrift: Burggrafenstr. 6, 10787 Berlin), Auskunft.Fr die in diesem Dokument zitierten Internationalen Normen wird im Folgen-den auf die entsprechenden Deutschen Normen hingewiesen:ISO 5667-16 siehe DIN EN ISO 5667-

18、16ISO 10260 siehe DIN 38412-16ISO/IEC 17025 siehe DIN EN ISO/IEC 17025DIN EN ISO 20079:2006-124Nationaler Anhang NA(informativ)LiteraturhinweiseDIN EN ISO 5667-16, Wasserbeschaffenheit Probenahme Teil 16: Anlei-tung zur Probenahme und Durchfhrung biologischer TestverfahrenDIN 38412-16, Deutsche Einh

19、eitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- undSchlammuntersuchung Testverfahren mit Wasserorganismen (Gruppe L) Teil 16: Bestimmung des Chlorophyll-a-Gehaltes von Oberflchenwasser (L 16)DIN EN ISO/IEC 17025, Allgemeine Anforderungen an die Kompetenz von Prf-und KalibrierlaboratorienEUROPISCHE NORM EUROPEA

20、N STANDARD NORME EUROPENNE EN ISO 20079 September 2006 ICS 13.060.70 Deutsche Fassung Wasserbeschaffenheit Bestimmung der toxischen Wirkung von Wasserinhaltsstoffen und Abwasser gegenber Wasserlinsen (Lemna minor) Wasserlinsen-Wachstumshemmtest (ISO 20079:2005) Water quality Determination of the tox

21、ic effect of water constituents and waste water on duckweed (Lemna minor) Duckweed growth inhibition test (ISO 20079:2005) Qualit de leau Dtermination de leffet toxique des constituants de leau et des eaux rsiduaires vis-vis des lentilles deau (Lemna minor) Essai dinhibition de la croissance des len

22、tilles deau (ISO 20079:2005) Diese Europische Norm wurde vom CEN am 17. August 2006 angenommen. Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschftsordnung zu erfllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denendieser Europischen Norm ohne jede nderung der Status einer nationalen Norm

23、zu geben ist. Auf dem letzten Stand befindliche Listen dieser nationalen Normen mit ihren bibliographischen Angaben sind beim Management-Zentrum oder bei jedem CEN-Mitglied auf Anfrage erhltlich. Diese Europische Norm besteht in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Franzsisch). Eine Fassun

24、g in einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch bersetzung in seine Landessprache gemacht und dem Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, D

25、nemark, Deutschland, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland,Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien,Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, Ungarn, dem Vereinigten

26、Knigreich und Zypern.EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMIT EUROPEN DE NORMALISATIONManagement-Zentrum: rue de Stassart, 36 B-1050 Brssel 2006 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitglieder

27、n von CEN vorbehalten.Ref. Nr. EN ISO 20079:2006 DEN ISO 20079:2006 (D)2InhaltSeiteVorwort 3Einleitung . 41 Anwendungsbereich 52 Normative Verweisungen . 53Begrife. 54 Grundlage des Verfahrens . 85Strungen 86Gerte. 87Reagenzien 98 Testorganismen 129 Stamm- und Vorkulturen . 1210 Durchfhrung 1311 Glt

28、igkeitskriterien 1712 Angabe der Ergebnisse . 1713 Berechnung der EC(r)xWerte fr die Frondanzahl und denzweiten Beobachtungsparameter . 1914 Angabe der Ergebnisse . 1915 Verfahrenskenndaten . 1916 Untersuchungsbericht 20Anhang A (informativ) Herstellung der Nhrmedien 22Anhang B (informativ) Bestimmu

29、ng des LID-Wertes fr Abwasser ein vereinfachtes Verfahren zur Abwasserprfung . 28Anhang C (informativ) Bezugsquellen fr Lemna minor 32Literaturhinweise 33EN ISO 20079:2006 (D)3VorwortDer Text von ISO 20079:2005 wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 147Wasserbeschaffenheit“ der Internationalen Organis

30、ation fr Normung (ISO)erarbeitet und als EN ISO 20079:2006 durch das Technische Komitee CEN/TC 230 Wasseranalytik“ bernommen, dessen Sekretariat vom DIN gehaltenwird.Diese Europische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten,entweder durch Verffentlichung eines identischen Textes oder durc

31、h Anerken-nung bis Mrz 2007, und etwaige entgegenstehende nationale Normen ms-sen bis Mrz 2007 zurckgezogen werden.Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalenNormungsinstitute der folgenden Lnder gehalten, diese Europische Norm zubernehmen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Estland

32、 Finnland, Frankreich,Griechenland, Irland, Island, Italien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Nieder-lande, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, Schweiz,Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Ungarn, VereinigtesKnigreich und Zypern.AnerkennungsnotizDer Text von

33、 ISO 20079:2005 wurde vom CEN als EN ISO 20079:2006 ohneirgendeine Abnderung genehmigt.EN ISO 20079:2006 (D)4EinleitungDie Wasserlinse Lemna minor dient als Modellorganismus fr hhere Wasser-pflanzen. Wasserlinsen sind monokotyle, frei auf dem Wasser treibende Angio-spermen und werden innerhalb der U

34、nterklasse der Arecidae den Araleszugeordnet. Wasserlinsen sind sehr schnell wachsende hhere Pflanzen, die instehenden Gewssern von den Tropen ber die gemigte bis in die arktischeZone weltweit verbreitet sind. In ihrer kologischen Funktion steht diese Art alsPrimrproduzent am Anfang der Nahrungskett

35、e fr Wasservgel, Fische undKleintiere. Auerdem dient sie vielen kleinen Wirbellosen als Substrat undHabitat.Wasserlinsen knnen durch Wasserinhaltsstoffe und Abwasser (siehe AnhangB) geschdigt werden. Die daraus resultierende Wachstumshemmung wird aufder Basis von Beobachtungsparametern (Frondanzahl,

36、 Frondflche, Chloro-phyll, Trockenmasse) mithilfe einer Reihe definierter Berechnungsverfahrenermittelt.Fr die Berechnung toxischer Effekte durch Wasserinhaltsstoffe (z. B. Chemika-lien, Pflanzenbehandlungsmittel) werden EC-Werte ermittelt. Es werden min-destens zwei Beobachtungsparameter auf der Ba

37、sis der mittleren spezifischenWachstumsraten ausgewertet.Das Verfahren wurde fr die Messung der Reaktion auf in Wasser gelste Sub-stanzen entwickelt. Dies beinhaltet die Definition einer festgelegten Verdn-nungsstufe oder Konzentration einer Probe, bei der ein Beobachtungsparame-ter (Endpunkt) zu ei

38、nem definierten Prozentsatz gegenber der Kontrollegehemmt worden ist.WARNUNG Anwender dieser Internationalen Norm sollten mit der bli-chen Laborpraxis vertraut sein. Diese Norm erhebt nicht den Anspruch,alle falls vorhanden sicherheitsrelevanten Aspekte abzudecken, diemit deren Anwendung verbunden s

39、ind. Es liegt in der Verantwortlichkeitder Anwender, geeignete Manahmen und Vorgehensweisen fr Gesund-heits- und Arbeitssicherheit festzulegen. Die Einhaltung jeweils geltender,nationaler Vorschriften ist sicherzustellen.WICHTIG Es ist erforderlich, bei den Untersuchungen nach dieser Inter-nationale

40、n Norm Fachleute oder Facheinrichtungen einzuschalten.EN ISO 20079:2006 (D)51 AnwendungsbereichDiese Internationale Norm legt die Bestimmung der wachstumshemmendenWirkung von im Wasser enthaltenen Substanzen und Gemischen sowie vonbehandelten kommunalen und industriellen Abwssern auf Wasserlinsen(Le

41、mna minor)fest.2 Normative VerweisungenDie folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokumentserforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Aus-gabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezuggenommenen Dokuments (einschlielich aller

42、 nderungen).ISO 5667-16, Water quality Sampling Part 16: Guidance on biotesting ofsamplesISO 10260, Water quality Measurement of biochemical parameters Spec-trometric determination of the chlorophyll-a concentration3BegrifeFr die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe.3.1axenische

43、KulturenMonokulturen von Organismen einer Art, frei von Pilzen, Algen und anderenMakrophytenarten3.2AuswerteparameterParameter zur Bestimmung der Toxizitt, die durch verschiedene Berechnungs-verfahren fr einen der Beobachtungsparameter ermittelt werdenBEISPIEL Wachstumsraten auf Basis der Frondanzah

44、l, der Frondflche, des Chlorophyllgehal-tes und der Tockenmasse sind in dieser Internationalen Norm Auswerteparameter.3.3ChloroseVerlust von Pigment (Vergilbung) der Fronds3.4KolonieAggregation von miteinander verbundenen Mutter- und Tochterfronds, gele-gentlich als Pflanze bezeichnet3.5Kontrollansa

45、tzKontrollmedium, einschlielich der fr die Untersuchung verwendeten Organis-menEN ISO 20079:2006 (D)63.6KontrollmediumMischung aus Verdnnungswasser und/oder Nhrmedium, das im Test ver-wendet wird3.7VerdnnungswasserWasser, welches zur Untersuchungsprobe hinzugegeben wird, um eine Seriedefinierter Ver

46、dnnungen herzustellen3.8VerdopplungszeitQuotient aus dem natrlichen Logarithmus von 2 (ln 2) und der mittleren spezi-fischen Wachstumsrate3.9effektive KonzentrationKonzentration einer Untersuchungsprobe (ECx), bei der im Vergleich zur Kon-trolle eine Hemmung des Wachstums von x % ermittelt wurdeANME

47、RKUNG Um einen auf Basis der Wachstumsrate ermittelten EC-Wert eindeutig zubezeichnen, wird vorgeschlagen, das Symbol EC(r)“ zu verwenden, dem in Klammern der inBezug genommene Beobachtungsparameter angefgt wird, z. B. EC(r)(Frondanzahl).3.10Frondindividuelle blattanaloge Struktur einer Wasserlinsen

48、kolonie; kleinste vermeh-rungsfhige Einheit (Individuum)3.11Frondflchesenkrecht von oben sichtbare Gesamtflche aller Fronds3.12FrondanzahlGesamtanzahl aller Fronds, einschlielich derer, die von oben sichtbar untereinem Mutterfrond hervorgeschoben ohne Vergrerungshilfe sichtbar sind3.13Wachstumzeitab

49、hngige Zunahme der Biomasse als Ergebnis der Ausbildung neuenGewebesANMERKUNG In diesem Verfahren bezieht sich das Wachstum auf jeden Beobachtungspara-meter.3.14WachstumsrateAuswerteparameter, definiert als Quotient aus der Differenz der natrlichenLogarithmen eines Beobachtungsparameters und der dazugehrigen Zeit-spanneEN ISO 20079:2006 (D)7ANMERKUNG Umfasst die Wach