KS M 8447-2012 DNA polymerase I(E coli)《大肠菌DNA聚合酶Ⅰ(试剂)》.pdf

1、 KSKSKSKSKSKSKSK KSKSKS KSKSK KSKS KSK KS KS M 8447 DNA ( )KS M 8447:2012 2012 12 28 http:/www.kats.go.krKS M 8447:2012 : ( ) ( ) ( ) : (http:/www.standard.go.kr) ： ：1997 12 31 ：2012 12 28 2012-0817 ： ： ( 02-509-7270) (http:/www.kats.go.kr). 10 5 , . KS M 8447:2012 DNA I( ) DNA polymerase I(E.coli)

2、1 DNA I( DNA I .) . (International Union of Biochemistry) DNA I EC 2.7.7.7 . 2 . . ( ) . KS L 2300, KS M 0011, pH KS M 8001, KS M 8008, KS M 8078, ( ) KS M 8418, 2 -2- -1,3- ( ) KS M 8456, ( ) KS M ISO 6353 1, 1： KS M ISO 6353 2, 2： 1 KS M ISO 6353 3, 3： 2 KS M 0000, 10 ( )(JIS K 8785 ) 3 DNA I . 4

3、DNA I 5. 1 . KS M 8447:2012 2 1 DNA 5 KS M 8008 . 5.1 DNA I (dA)(dT) DNA . 37 C pH 7.4 30 10 nmol -3 L (U) . a) 1) 1 mol/L (pH 7.4) KS M ISO 6353 3(R79) 130.09 g (1 000 mL) (A ) KS M 8078 174.18 g 1 000 mL (B ) KS M 0011 pH pH 7.4 . A B pH 3： 7 pH 7.4 . 2) 1 mol/L KS M ISO 6353 2(R16) 6 203.30 g 1 0

4、00 mL . 3) 2- 99 % ( ) 1 mol/L . 4) 1 mol/L 5-3 (dATP) dATP 10 mol 10 mL . 5) 1 mol/L 5-3 (TTP) TTP 10 mol 10 mL . 6) (dA)(dT) (dA)(dT) 1) 5A260 /mL2) . 7) ( -3H) 5-3 (3HTTP) ( -3H) 5-3 (3HATP) / (1： 1) 1.5 TBq/nmol 2.2 TBq/nmol . 8) (100 g/L) KS M 8456 10 g 10 mL . 9) KS M 8456 KS M 0000 10 2.23 g

5、100 mL . 10) 1 L PPO(2,5- ) 4 g POPOP1,4- -(5- ) 0.1 g ( 95 %) 1) KS M 8418 2- -2- -1,3 ( ) 121.14 g KS M ISO 6353 2(R13) KS M 0011 pH pH 8.0 , 1 000 mL (A ). KS M ISO 6353 2(R34) KS M 0011 pH pH 8.0 1 000 mL (B ). A 1 mL, B 50 L, 3) 1 moL/L 100 L, 8.85 mL 10 mL . 2) 1A260 20 C 10 mm 1 mL 260 mm 1 .

6、 KS M 8447:2012 3 11) (95 %) b) 1) 2) 3) 2.1 cm, 0.26 mm . 4) 5) KS M 8008 5.1.16 ( ) . 6) 7) c) 1) 10 mL . 1.1) pH (7.50.1) 670 L 1.2) (652) L 1.3) 2- 10 L 1.4) 5-3 (dATP) (331) L 1.5) 5-3 (TTP) (331) L 1.6) 5A260 /mL (dA)(dT) 280 L 1.7) ( -3H) 5-3 (3HTTP)3) ( -3H) 5-3 (3HATP)3)2) 1) 300 L . 3) 37

7、C 5 DNA I . 4) (37.00.1) C 30 . 5) a) 9) 2 mL . 6) (41) C 15 . 7) . 8) (100 g/L) 5 mL 6 . 9) (95 %) 5 mL 3 . 10) . 11) KS M 8008 5.1.16 . d) (U)/mL . 215300001=dbcA4) A ： (U/mL) b ： CPM5)c ： CPM- CPM6)d ： (L) 3) 65 MBq 4) dATP, TTP 10 mmoL 2 . 5) CPM ： c) 1) 200 L KS L 2300 . c) 10) c) 11) . 6) CPM

8、： c) 3) DNA I , c) . KS M 8447:2012 4 5.2 DNA DNA I DNA . a) 1) 1 mol/L (pH 6.5) 5.1 a) 1) A , B pH 6.5 . 2) 1 mol/L 5.1 a) 2) . 3) 1 mol/L 2- 5.1 a) 3) . 4) X L74 DNA RFI 2 CovaLentLy CLosed CircuLar Form(RFI) 70 % DNA L74, 5.1 a) 6) . 5) KS M 8418 ( ) 113 g, KS M ISO 6353 3(R50) 55 g, KS M ISO 635

9、3 2(R12) 2 9.2 g 10 L . 6) . 7) 1 mg/mL 100 mg 100 mL . . 8) (SDS) 0.1 g, KS M ISO 6353 1 4.3.2 0.002 g, KS M ISO 6353 3(R64) 5 mL 10 mL . b) KS M 8008 , . 1) . 2) 254 nm . 3) 4) 5.1 b) 2) . 5) (1.5 mL) c) 1) 1 000 L . 1.1) 1 mol/L (pH 6.5) 67 L 1.2) 1 mol/L 6.7 L 1.3) 1 mol/L 2- 1 L 1.4) X L74 DNA

10、RFI 20 g 2) 1) 50 L . 3) DNA I 10 2) . 4) 3) 37 C 1 . 5) 4) a) 8) 5 L . 6) 1 g/mL (10 g/L)7) 5) . 7) ( ) 5 cm . 8) 8). 7) (10 g/L) 3 g 300 mL . 6) 300 L . 8) , . KS M 8447:2012 5 6 . 7 9). a) “ DNA I” “DNA polymerase I(E.coli)” “ ” b) c) d) ( ) e) 9) . DNA I() 153787 1 145 3(16) (02)26240114 (02)26240148 http:/ Korean Agency for Technology and Standards http:/www.kats.go.kr KS M 8447:2012 KSKSKS SKSKS KSKS SKS KS SKS KSKS SKSKS KSKSKS DNA polymerase I(E.coli) ICS 71.040.30