1、2010 年中国农业大学(生物化学)考研真题及答案与解析一、填空题请完成下列各题,在各题的空处填入恰当的答案。1 PPP 循环的氧化阶段产生_,该物质为生物体的合成提供还原力,非氧化阶段产生_和_。2 脂肪酸从头合成途径调控的关键酶是_,分为三个部分组成,分别为_、_、_,存在两种调节方式_、_。3 天然脂肪酸有_、_,不饱和脂肪酸所含双键多为_结构,但不饱和脂肪酸双键位置一般在_之间。4 膜中脂类以_为主,膜蛋白分为_和_,分别以_和_获得。5 VLDL 的作用主要是将_运输到_;HDL 的作用主要是将_运输到_。6 DNA 连接酶需要 5为_,3端为_。7 mRNA 转录起始时 30s 亚
2、基与_rRNA 碱基互补,称为_序列。8 柠檬酸对果糖-1,6 一二磷酸的调控作用是_。9 蛋白质的合成方向为_,mRNA 的合成方向为 _。10 原核生物的起始密码子为_,其反密码子为_。二、不定项选择题下列各题的备选答案中,有一个或多个是符合题意的,请选出所有符合题意的备选答案。11 关于谷胱甘肽的叙述正确的是( )。(A)还原性(B)有一个 -氨基和一个 -羧基(C)有 -羧基参与合成肽键(D)是活性肽12 关于蛋白质的 折叠片的叙述正确的是 ( )。(A)氢键平行于多肽链走向(B)肽链氨基与羧基参与氢键形成(C)与 R 基位于折叠片同侧(D)氨基酸残基亲水13 下面可以用 X 衍射分析
3、的有( )。(A)蛋白质溶液定性分析(B)原子水平蛋白质构象(C)分子水平蛋白质构型(D)只能解析蛋白质三维构型14 可以在 tuRNA 水平鉴定基因表达规律的实验是 ( )。(A)western blot(B) ELISA(C) RT-PCR(D)Southern blot15 琼脂和琼脂糖( ) 。(A)主要成分相同,属同多糖(B)主要成分不同,属同多糖(C)主要成分相同,应用不能代替(D)主要成分不同,应用不能代替16 关于限制性内切酶叙述正确的是( )。(A)专门的核酸 35 内切酶活性(B) DNA 分子中(C)选择性水解双链 DNA(D)选择性水解 RNA17 关于酶-底物中间产物
4、叙述正确的是( )。(A)结合后,酶稳定性(B)复合物可分离(C)复合物称过渡态(D)有饱和现象18 关于跨膜主动运输叙述正确的是( )。(A)需运送物具有跨膜梯度(B)要有 ATP(C)需要蛋白质大分子参与(D)只能单向运输19 关于线粒体的电子传导叙述正确的是( )。(A)NADH 是 FMN 的电子供体(B) NADH 是 NAD+的电子供体(C) Cyt C 在线粒体外膜上(D)辅酶 Q 是移动性强的电子链组分20 属于高能磷酸化合物的是( )。(A)ADP,磷酸肌醇,磷酸精氨酸,烯醇式(B)烯醇式,焦磷酸,肌醇,精氨酸(C)乙酰辅酶 A,精氨酸,焦磷酸,ADP(D)ATP、G-6-P
5、,精氨酸,烯醇式21 简述脱氧核糖核苷酸合成过程(包括催化反应的酶和电子传递路径)。22 请写出草酰乙酸(OAA)参与生物体内代谢过程的四个不同反应,写明参与的酶、底物和生成物。23 请计算 18:1 的油酸进行 氧化所产生的 ATP 数量,并写出具体步骤。24 解释氨基酸的酸碱性,如何用实验证明氨基酸有酸碱性?讨论氨基和羧基的pK1(羧基 )、pK 2(氨基)和 pI 的含义,三者之间的关系。25 肌红蛋白的功能、分子结构特点和氧结合曲线的特征,讨论可逆结合的分子基础。26 叙述原核细胞中三种 RNA 的结构、特点及功能。27 叙述原核生物 DNA 复制中后随链的合成。28 分析说明生物体糖
6、代谢与氨基酸代谢之间的相互关系。29 从生物样品中提取天然蛋白时,为什么一般要求用缓冲液而且有一定离子强度?为什么强调在低温下操作而不是常温。30 什么是酶活性中心? 有一种酶,含一个半胱氨酸残基,设计一个技术线路,验证该氨基酸是否参与酶的催化作用或专一性。31 为什么糖酵解的关键酶是磷酸果糖激酶而不是己糖激酶?ATP、柠檬酸、AMP、 2,6 一二磷酸果糖对磷酸果糖激酶是如何调控的,其意义是什么?2010 年中国农业大学(生物化学)考研真题答案与解析一、填空题请完成下列各题,在各题的空处填入恰当的答案。1 【正确答案】 NADPH 6 一磷酸果糖 6 一磷酸甘油醛2 【正确答案】 乙酰-Co
7、A 羧化酶 生物素羧基载体蛋白 (BCCP) 生物素羧化酶(BC) 转羧激酶(CT) 别构调节 共价修饰调节3 【正确答案】 棕榈酸 硬脂酸 顺式 C 9 和 C104 【正确答案】 磷脂 外在膜蛋白 内在膜蛋白 改变 pH 或离子强度 加入去垢剂或其他非极性溶剂5 【正确答案】 甘油三酯 全身各处细胞 胆固醇 全身各处细胞6 【正确答案】 磷酸基 羟基7 【正确答案】 16S SD 序列8 【正确答案】 抑制9 【正确答案】 NC 5310 【正确答案】 AUG CAU二、不定项选择题下列各题的备选答案中,有一个或多个是符合题意的,请选出所有符合题意的备选答案。11 【正确答案】 C,D12
8、 【正确答案】 B13 【正确答案】 D14 【正确答案】 C15 【正确答案】 D16 【正确答案】 C17 【正确答案】 B,C,D18 【正确答案】 A,B,C19 【正确答案】 A,D20 【正确答案】 A21 【正确答案】 脱氧核糖核苷酸可以由核糖核苷酸还原形成,以 H 取代其核糖分子中 C2 上的羟基而生成,此还原作用是在核苷二磷酸(NDP) 的水平上进行的。核糖核苷酸还原成脱氧核糖核苷酸需要氢和电子,由 NADPH 提供。生物体有两条电子传递路径: (1)NADPH 提供氢和电子,电子在硫氧还蛋白还原酶的催化下经过FAD 和硫氧还蛋白,再由核糖核苷二磷酸还原酶催化将电子传递给核糖
9、核苷二磷酸,将核糖核苷二磷酸还原成脱氧核糖核苷二磷酸(dNDP)。 (2)NADPH 提供氢和电子,电子在谷氧还蛋白还原酶的催化下经过谷胱甘肽和谷氧还蛋白,再由核糖核苷二磷酸还原酶催化将电子传递给核糖核苷二磷酸,将核糖核苷二磷酸还原成脱氧核糖核苷二磷酸。 脱氧核糖核:苷二磷酸可以在核苷单磷酸激酶的作用下生成脱氧核糖核苷一磷酸(dNMP)。22 【正确答案】 (1)三羧酸循环:草酰乙酸与乙酰 CoA 在柠檬酸合酶的催化下生成柠檬酸(乙醛酸循环也有这步反应);而苹果酸在苹果酸脱氢酶的催化下生成草酰乙酸,草酰乙酸的再生又可以继续进入三羧酸循环进行下一轮。(2)糖异生反应:丙酮酸转变为烯醇式丙酮酸的过
10、程中,丙酮酸要先在丙酮酸羧化酶的催化下羧化成草酰乙酸,草酰乙酸再在磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶作用下转变为磷酸烯醇式丙酮酸。(3)丙酮酸在丙酮酸羧化酶催化下转化为草酰乙酸,这是三羧酸循环的一个重要回补途径。(4)天冬氨酸与 -酮戊二酸可以在天冬氨酸氨基转移酶的作用下生成草酰乙酸和谷氨酸,这个反应是可逆的。23 【正确答案】 18:1 油酸进行了 8 次 氧化,生成 9 个乙酰 CoA,每个乙酰CoA 彻底氧化分解可产生 3 个 NADH、1 个 FADH2 和 1 一个 ATP,每个 NADH和 FADH2 进入呼吸链后可分别产生 25 个和 15 个 ATP。则生成的 9 个乙酰CoA 可以产生
11、的 ATP 数量为:(253+151+1)9=90 因 18:1 的油酸有 1 个双键,产生 7 个 FADH2 和 8 个 NADH,则生成 ATP:157+2 58=305 由于2 个高能磷酸键用于活化脂肪酸,故产生的 ATP 总数量为: 90+3052=118524 【正确答案】 (1)氨基酸带有-COOH 和-OH ,有两性解离的性质。可以用酸碱滴定实验证明氨基酸有酸碱性,用标准的盐酸溶液滴定可以证明氨基酸有碱性;用标准的氢氧化钠溶液滴定证明氨基酸有酸性。 (2)pK 是某个可解离基团的解离常数,等于该解离基团解离一半时溶液的 pH。pK 1(羧基)即羧基的解离常数;pK 2(氨基)即
12、氨基的解离常数;而 pI 即等电点,是氨基酸分子所带正电荷与负电荷相等时溶液的 pH。 三者之间的关系:对于酸性氨基酸,pI=12(pK 1+pKR)(pKR 是氨基酸R 基团的解离常数);对于碱性氨基酸, pI=12(pK R+pK2);对于普通氨基酸,pI=12x(pK 1+pK2)。25 【正确答案】 (1)肌红蛋白的功能。肌红蛋白分子中的血红素铁只与蛋白质链上一个组氨酸相连,尚有一。个空的配位位置,能可逆地结合一个氧分子,对氧有高度的亲和性,具有储存氧的功能,当肌肉剧烈运动大量需氧时,可以释放储存的氧来供肌肉细胞使用。 (2)肌红蛋白的分子结构特点。肌红蛋白是一条含有 153 个氨基酸
13、残基的多肽链折叠形成的球状结构,有一个血红素辅基。由 一螺旋和无规卷曲共同构成的。有 8 段 -螺旋,分别用 A,B,C,D,E ,F,G ,H 表示,螺旋间是无规卷曲(位于螺旋段间拐角处),肽链的羧基末端也是无规卷曲。极性氨基酸残基几乎全部分布于分子的表面,而非极性氨基酸残基则被埋在分子内部。辅基血红素位于肌红蛋白分子表面的一个洞穴内,并通过组氨酸残基与肌红蛋白分子内部相连。组氨酸与血红素辅基一起形成一个可以与氧可逆结合的位点。 (3)肌红蛋白的氧结合曲线的特征。肌红蛋白只有一个亚基,没有四级结构,结合氧之后不会因为一个亚基的转变发生构象改变,即氧与肌红蛋白的结合没有别构效应,所以肌红蛋白在
14、各种氧分压下都对氧有高度的亲和性,其氧结合曲线为一条双曲线。 (4)可逆结合的分子基础。肌红蛋白只由一条肽链组成,含有一个血红素辅基。血红素是铁卟琳化合物,由 4 个毗咯通过 4 个甲炔基相连成一个大环,Fe 2+居于环中。含Fe2+的血红素能结合氧,而含 Fe3+的不能结合氧。血红素的 Fe2+与 4 个吡咯环的氮原子形成配位键,另 2 个配位键中的 1 个与 F8 组氨酸结合剩下的 1 个则可以与O2 进行可逆结合。26 【正确答案】 原核生物主要有 mRNA、tRNA 和 rRNA 三种 RNA。(1)原核生物 mRNA 的结构、特点及功能。原核生物 mRNA 的结构:mRNA 为单链线
15、性分子,mRNA 具有两种序列,一种是用于指导合成蛋白质的序列,核苷酸序列与 DNA 序列相应,即编码区,从起始密码子开始,到终止密码子结束;另一种是位于编码区两侧的非编码区。原核生物 mRNA 的特点:半衰期短。原核生物中,mRNA 的转录和翻译是在同一个细胞空间里同步进行的,蛋白质合成往往在 mRNA 刚开始转录时就被引发了。大多数细菌 mRNA 在转录开始 1 分钟后就开始降解。 mRNA 降解的速度大概只有转录或翻译速度的一半;许多以多顺反子的形式存在。原核细胞的mRNA(包括病毒)有时可以同时编码几个多肽;原核生物 mRNA 的 5端无帽子结构,3 端没有或只有较短的多聚(A)结构;
16、 原核生物常以 AUG(有时 GUG甚至 UUG)作为起始密码子;真核生物几乎永远以 AUG 作为起始密码子。原核生物 mRNA 的功能:mRNA 携带 DNA 遗传信息,mRNA 上的密码子编码氨基酸,指导蛋白质的合成,是蛋白质的合成模板。(2)原核生物 tRNA 的结构、特点及功能。原核生物 tRNA 的结构:tRNA 是分子量较小的单链 RNA。其二级结构含有较多的发夹结构,形成 4 个双链的臂和 4 个单链的环即氨基酸臂、二氢尿嘧啶臂和二氢尿嘧啶环、反密码臂和反密码环、可变环、TT 臂和 TT 环,使其具有三叶草结构,其三级结构通过折叠形成倒 L 形,一端为氨基酸臂,另一端为反密码环。
17、原核生物 tRNA 的特点:分子量 25KD 左右,沉降系数 4S;多数为 7090 个核苷酸;二级结构三叶草形;三级结构倒 L 形;3 味端(接受末端)为 CCAOH结构,接受活化的氨基酸:5端多为 polyG,也有 polyC 结构的;具有不等的稀有碱基及位置不变的恒定核苷酸。原核生物 tRNA 的功能:在蛋白质生物合成过程中把 mRNA 的信息准确地翻译成蛋白质中氨基酸顺序的适配器分子,携带符合要求的氨基酸,以连接成肽链,再经过加工形成蛋白质,具有转运氨基酸的作用。此外,它在蛋白质生物合成的起始作用中,在 DNA 反转录合成中及其他代谢调节中也起重要作用。(3)原核生物 rRNA 的结构
18、、特点及功能。原核生物 rRNA 的结构:rRNA 多与蛋白质结合在一起,分子量较大。原核生物有三种 rRNA:23S、16S、5S 。,原核生物 rRNA 由 70S 和 30S 大小两个亚基组成。原核生物 rRNA 的特点:有 5s、16s 及 23S 三种;rRNA 存在许多修饰核苷;有广泛的双链区域。在双链区,碱基因氢键相连,表现为发夹式螺旋二级结构,并能进一步折叠形成特定的三级结构。原核生物 rRNA 功能:rRNA 与蛋白质结合形成核糖体,作为 mRNA 的支架,使 mRNA 分子在其上展开,实现蛋白质的合成,是蛋白质合成的场所。27 【正确答案】 原核生物 DNA 复制时,以复制
19、叉向前移动的方向为标准,由于DNA 聚合酶的合成方向是 53,一条模板链是 35走向的即前导链,能够以53的方向连续合成;另一条模板链是 53 走向的即后随链,其合成不能在35方向上进行,而是与复制叉移动的方向相同,随着复制叉的移动,往 53形成许多不连续的片段即冈崎片段,最后连接成一条完整的 DNA 链。后随链的合成是分段进行的,需要不断合成 RNA 引物,由 DNA 聚合酶催化冈崎片段的合成,每当一个新的冈崎片段合成时,DNA 聚合酶 I 就会用外切酶活性切除引物,并填补引物切除后留下的空隙。后随链每次都要等待模板链解开一定长度才能生成引物延长,形成不连续片段,合成速度比前导链稍慢。28
20、【正确答案】 (1)糖可用于合成各种氨基酸的碳链结构,经氨基化或转氨后,即生成相应的氨基酸。例如,糖在分解代谢过程中可产生丙酮酸,丙酮酸经三羧酸循环,转变成 -酮戊二酸和草酰乙酸。这三种酮酸均可加氨基或经氨基移换作用,分别形成丙氨酸、谷氨酸和天冬氨酸。此外,在糖分解过程中产生的能量,尚可供氨基酸和蛋白质合成之用。 (2)氨基酸可以在体内转变为糖。许多种氨基酸在脱氨后转变为丙酮酸、-酮戊二酸、琥珀酸、草酰乙酸而生成葡萄糖和糖原。这类氨基酸称为生糖氨基酸。例如,甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、绷氨酸、组氨酸、谷氨酸、谷氨酞胺、天冬氨酸、天冬酞胺、精氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸及脯氨酸等,都是生糖氨基酸
21、。此外,苯丙氨酸、酪氨酸、异亮氨酸和色氨酸也能产生糖。 糖代谢与氨基酸代谢的相互关系如图附录 4-1 所示。29 【正确答案】 缓冲液对蛋白质稳定性好,溶解度大,适合提取蛋白质。要求缓冲液有离子强度是因为蛋白质酶是具有等电点的两性电解质。提取时,缓冲液的pH 值应选择在偏离等电点两侧的 pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。强调在低温下操作而不是常温,主要因为低温条件下酶活性比较低,可以有效防止蛋白酶降解蛋白质。30 【正确答案】 (1)酶分子中能
22、够直接与底物分子结合,并催化底物化学反应的部位即为酶活性中心。一般认为活性中心主要由两个功能部位组成:第一个是结合部位,酶的底物靠此部位结合到酶分子上;第二个是催化部位,底物的键在此被打断或形成新的键从而发生一定的化学变化。(2)由于一些重金属离子能与半胱氨酸残基的一 SH 结合,要验证一种含一个半胱氨酸残基的酶中的半胱氨酸是否参与酶的催化作用或专一性,可以在酶中加入重金属盐(如铁离子或铜离子) 作用后,再与原来酶的专一性底物反应,测定其催化作用或专一性,并设一个没有用重金属离子作用的酶作对照。若酶的催化作用明显下降,则说明半胱氨酸参与了酶的催化作用或专一性;若酶的催化作用变化不明显,则说明半
23、胱氨酸没有参与酶的催化作用或专一性。31 【正确答案】 (1)磷酸果糖激酶之所以是关键酶,是因为磷酸果糖激酶催化的反应是糖酵解途径中最为关键的限速反应。 糖酵解速度主要取决于磷酸果糖激酶,它是个限速酶。其受多个途径调控:ADP 别构激活、 ATP 别构抑制;柠檬酸、脂肪酸别构抑制;受果糖-2,6-二磷酸的调控;受 H+抑制。而己糖激酶专一性不强,受其产物 6-磷酸葡萄糖别构抑制,6 一磷酸葡萄糖是许多糖代谢途径的连接点,通过糖原分解可以补充得到 6-磷酸葡萄糖,从磷酸戊糖途径、糖原合成等途径可以降解 6-磷酸葡萄糖,所以 6 一磷酸葡萄糖对己糖激酶的别构抑制作用都可以得到调控。因此糖酵解的关键
24、酶是磷酸果糖激酶而不是己糖激酶。 (2)ATP 、柠檬酸是磷酸果糖激酶的别构抑制剂,AMP、2,6 一二磷酸果糖是磷酸果糖激酶的别构激活剂。ATP 是酶的底物,在 ATP 浓度高时,ATP 与酶的别构位点结合,使酶构象变化,酶与底物的结合能力下降,柠檬酸就是通过加强 ATP 的抑制效应来抑制磷酸果糖激酶的活性,而 ATP 对磷酸果糖激酶的别构抑制效应口了以被 AMP 解除;2,6 一二磷酸果糖是磷酸果糖激酶的强别构激活剂,增加 2,6 一二磷酸果糖可促进磷酸果糖激酶活性变强,促进糖酵解。 由于磷酸果糖激酶是糖酵解途径的关键酶,这些物质对磷酸果糖激酶的调控,可以对整个糖酵解途径进行调控,增强或抑制糖酵解途径,来调控葡萄糖的分解。
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