ZB B66005.13-1990 橄榄油、油橄榄果渣油检验 脂肪酸成分含量测定法.pdf

1、中华人民共和国专业标准橄榄油、油橄榄果渣油检验ZBB66 005. 13一90脂肪酸成分含量测定法本标准适用于商品橄榄油、油橄榄果渣油脂肪酸成分含量检验。1检验原理将橄榄油中的脂肪酸转化为脂肪酸甲醋，应用气相色谱仪将各甲醋分离，对照各脂肪酸甲醋标准样品保留时间定性，用归一法定量，以各甲醋的百分含量来表示各脂肪酸成分含量。2脂肪酸甲醋化(在通风橱内进行操作)2. 1三氟化硼一甲醇脂肪酸甲醋化法，本方法适用于任何酸度的橄榄油、油橄榄果渣油。应优先选用此法。2.1.1仪器和用具2.1.1.1容量瓶:25 mL;2.1.1.2滴管:20 mm;2.1.1.3量筒:5 mL;2.1.1.4漏斗:直径30

2、 mm;2.1.1.5试剂瓶:5-10 mL;2.1.1.6水浴锅。2.1.2试剂内21几曰么么2.么2.1:一么么2.1.2.1.2.1.;0. 5 mol/L氢氧化钠甲醇溶液(先用少许水将氢氧化钠溶解后再放入甲醉);市售三氟化硼乙醚溶液;甲醇;三氟化硼乙醚一甲醇溶液:将三氟化硼乙醚溶液与甲醉按1:3( VaS/3V,ox)配制;饱和食盐水溶液;:.1.3石油醚(30-6000沸程).操作步骤1.3.1用滴管取混匀油试样8-9滴(120150 mg)置于25 mL容量瓶中，加入4 mL 0. 5 mot/L氢氧化钠甲醇溶液，摇匀，置沸水浴上沸腾5 min，使油试样呈透明状态。2.1.3.22

3、.1.3.3待其冷却后加入5 mL三氟化硼一甲醉溶液，再置水浴上沸腾2 min，使甲醋化完全。加人足够量的饱和食盐水溶液(到细颈底部)，上层有黄色液体取到醚层(振摇、静止)。再用滴管吸取上层甲酷石油醚溶液置于试剂瓶内，谱仪进行脂肪酸成分含量测定。，用1一1. 5 mL石油醚将其萃密封低温保存，待进入气相色2.2氢氧化钾一甲醇脂肪酸甲醋化法，本方法适用于酸度小于3%的橄榄油、油橄榄果渣油。2.2.1仪器和用具2.2.1.1刻度离心试管:10 mL，具塞;中华人民共和国林业部1990一03-21批准1990一10一01实施ZBB66 005. 13一902.2.1.2滴管:200 mm;2.2-1

4、. 3移液管;5 mL,l mL;2.2.1.4离心机:3 000 r/min.2.2.2试剂2.2-2.1 2 mol/L氢氧化钾甲醇溶液,11. 2 g氢氧化钾溶于100 mL甲醉中;22.2.2正己烷。22.3操作步骤取混匀油试样。. 6 mL于离心试管中，加入5 ML正己烷，摇匀，再加入0. 25 mL 2 mol/L氢氧化钾一甲醇溶液，充分振摇30 s，放入离心机内离心1 min后，立即取上层甲酷溶液进行气相色谱脂肪酸成分含量测定，故此法适宜使用前临时制备。2. 3甲醇一盐酸一甲酷化法，本方法适用于酸度大于3%的橄榄油、油橄榄果渣油。23.1仪器和用具2.3.1.1安瓶瓶;5 mL;

5、2.3.1.2滴管:200 mm;2.3.13喷灯;2.3.1.4电热烘箱。2.3.2试剂2.3.2.1 20o盐酸甲醇溶液。2.3.3操作步骤取混匀油试样10-15滴于5 ML安瓶瓶中，加入2 mL含有20o盐酸的甲醉溶液，混匀振摇20 s，用喷灯将安瓶瓶口密闭，立即放入100士2C烘箱内烘40 min，取出待用。3气相色诺法测定脂肪酸成分含f3.飞仪器和用具3.1.1气相色谱仪附氢火焰离子检测器;3.1.2微量注射器:1 pL,10 wL，最小刻度为0. 1 ;LL,3.2试剂3.2.1石油醚(30-60C沸程)。3.2.2 14-24C脂肪酸标准样品或14-24C脂肪酸甲醋标准样品。3.

6、3测定步骤3.3.1测试条件，根据气相色谱仪不同型号，将其调到最佳使用状态。担体:chromsorb WA/W,80-100目;固定液:5%-20%DEGS;柱长:2-2. lm玻璃柱或不锈钢柱，内径2-4 mm;进样器温度:210-2500C;柱温;160-1800C;检测器温度:200-240C;载气:Nv30 mL/min;燃气,H2,30 mL/min;助燃气:300 mL/min,3.3.2测定程序 待气相色谱仪被调到最佳使用条件后，用微量注射器吸取各脂肪酸甲酷标准样品0. 1 PL注入进样器(每次用石油醚充分冲洗注射器)，得标准样图谱及各成分保留时间;用微量注射器吸取0. 5-1

7、wL被ZB B66 0 0 5. 1 3一90测试样的甲醋化溶液注入进样器，得试样图谱及各组分保留时间，与各标准样品相同保留时间对照，定性出各脂肪酸成分。3.4结果计算各脂肪酸成分含量按下列方法计算:如气相色谱仪带有积分仪，可用积分仪获得定量数据;可用峰面积归一化法计算各脂肪酸成分含量，以甲醋的百分含量表示:乐卜x(%)=A. X 100全人h; X合、 v A.X 100(i=1,2,3,“-)式中:X脂肪酸甲酷的百分含量，即为脂肪酸成分含量，%(，/，);A;各脂肪酸甲醋的峰面积，clnZ;名A.一各脂肪酸甲酷的峰面积之和，cm P;h;各脂肪酸甲醋峰高，cm;告L;各脂肪酸甲酷半峰宽，cm.附加说明:本标准由中华人民共和国林业部提出。本标准由中国林业科学研究院林业研究所负责起草。本标准主要起草人薛益民。