1、1专题 4.1 DNA 的粗提取及鉴定一、选择题(13 小题)1下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述,错误的是ADNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随着溶液浓度的变化而变化B向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水胀破,释放出其中的 DNAC把 DNA 加入二苯胺溶液,在沸水浴中颜色不变,只有冷却后才能观察到蓝色D向滤液中加入冷却酒精的目的是除去 DNA 中的杂质,纯化 DNA【答案】C2在利用菜花进行“DNA 粗提取与鉴定”实验中,相关操作正确的是A将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝B向菜花研磨液中加入适量的蒸馏水,以降低 DNA 酶活性C向质量浓度为 2
2、mol/LNaCl 溶液中加入蒸馏水析出 DNA 时,应快速加入,直到出现黏稠物为止D向溶有粗提物的 NaCl 溶液中加入冷却的体积分数 95%的酒精,可获得较纯净的 DNA【答案】D【解析】【分析】DNA 的粗提取和鉴定的原理是:(1)DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同;(2)DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶液酒精;(3)DNA 和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同;(4)DNA 的鉴定:在沸水浴条件下,DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。【详解】将 DNA 丝状物溶解在一定浓度的氯化钠溶液中,再滴加二苯胺试剂和水浴加热变蓝,A 错误;向菜花
3、研磨液中加入适量的蒸馏水,以降低 DNA 的溶解度,不是降低 DNA 酶的活性,B2错误;向质量浓度为 2 mol/L 氯化钠溶液中加入蒸馏水析出 DNA 时,应缓慢加入,直到出现的黏稠物不再增加为止,C 错误;DNA 不溶于酒精,因此向溶有粗提物的 NaCl 溶液中加入冷却的体积分数 95%的酒精,可获得较纯净的 DNA,D 正确。3甲、乙两图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置。相关叙述正确的是A图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为 NaCl 溶液,但两者浓度不同B图乙中两支试管中的溶液均变蓝C图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使 DNA 成为絮状沉淀并缠绕在玻璃棒上D图乙操作中
4、所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果【答案】D4下列关于 DNA 和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的是A用不同浓度 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 不能去除蛋白质B提取细胞中的 DNA 和蛋白质都需用蒸馏水胀破细胞C蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的 DNAD蛋白质和 DNA 都可以用电泳的方法进行分离纯化【答案】D【解析】用 2 mol/L 的 NaCl 溶液溶解 DNA,然后过滤出蛋白质,再降低 NaCl 溶液的浓度,析出 DNA,A 错误;提取 DNA 时,如果是用动物的细胞需要用蒸馏水胀破,如果用植物细胞则不需要,而是用洗涤剂溶解细胞膜,B 错误;蛋白质提
5、取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的小分子杂质,而 DNA 属于大分子物质,C 错误;电泳法是常规分3离纯化的方法,蛋白质和 DNA 都可以用电泳的方法进行分离纯化,D 正确。5下列操作中,对 DNA 的提取量影响较小的是A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出 DNA 等核物质B搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在析出 DNA 黏稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增多D在用酒精析出 DNA 时,要使用冷酒精,甚至可将混合液放入冰箱中冷却【答案】B【点睛】DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同:溶解规律2mol/LNaCl 溶液0.14mol/LNaCl 溶液DN
6、A 溶解 析出蛋白质NaCl 溶液物质的量浓度从 2mol/L 逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解6右图是利用鸡血粗提取 DNA 的基本操作,下表中操作目的不能实现的是【答案】B4【解析】在 DNA 粗提取实验中,鸡血中加入蒸馏水的目的是使血细胞吸水胀破,A 项正确;将烧杯甲中的蒸馏水加入到含 DNA 的浓(2 mol/L)NaCl 溶液的烧杯乙中,其目的是使 NaCl 溶液的浓度降低至 0.14 mol/L,此时 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度最小,从而使 DNA 析出,B 项错误;DNA 不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,据此,将冷却的酒精加入到含 DN
7、A 的浓 NaCl 溶液中,可除去溶于酒精中的杂质,C 项正确;将烧杯甲中的 2 mol/L 的 NaCl 溶液加入到烧杯乙中,纱布上的黏稠物中的 DNA 会溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中,可去除不溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液中的杂质,D 项正确。7下列“DNA 的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是A利用 DNA 能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液的特点,可将 DNA 与蛋白质分离B利用 85的高温能使蛋白质变性却对 DNA 没有影响的特性,将 DNA 与蛋白质分离C利用 DNA 在 2molL-1NaCl 溶液中溶解度最大的特点,可将 DNA 与杂质分离D在
8、 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将 DNA 与蛋白质分离【答案】D8在 DNA 的粗提取和鉴定实验中,有两次 DNA 的沉淀析出,其依据的原理是DNA 在 NaCl 溶液质量浓度为 0.14 mol/L 时溶解度最低DNA 在冷却的体积分数为 95%的酒精溶液中能沉淀析出A两次都是B两次都是C第一次是,第二次是D第一次是,第二次是【答案】C5【解析】第一次析出 DNA 利用的是原理,因为在这种浓度的 NaCl 溶液中,DNA 的溶解度最低,而蛋白质的溶解度增加,所以通过过滤能将 DNA 分离开,以除去蛋白质。第二次析出 DNA 利用的是原理,即冷酒精能使 DNA 和蛋白质沉
9、淀。因为这时已基本上无蛋白质。DNA 的两次析出所依据的原理不同,且不能前后颠倒。C 正确。【考点定位】DNA 的粗提取和鉴定9下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述,错误的是A操作时向物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中缓缓滴加蒸馏水,降低 DNA 的溶解度B加蒸馏水后,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,以保证 DNA 分子完整C加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度,两者均可析出D当丝状黏稠物不再增加时,此时 NaCl 的物质的量浓度相当于 0.14 mol/L【答案】C【解析】DNA 在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最小,向物质的量浓度为
10、2 mol/L 的 NaCl 溶液中加蒸馏水能降低 DNA 的溶解度从而析出 DNA 黏稠物,A 正确;加蒸馏水后,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,以避免 DNA 分子断裂,保证 DNA 分子完整,B 正确;DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液的溶解度不同,利用这一特点,通过加蒸馏水可使 DNA 析出,使蛋白质溶解,C 错误;当丝状黏稠物不再增加时,此时 DNA 的溶解度最低,NaCl 的物质的量浓度相当于 0.14 mol/L,D 正确。10DNA 的粗提取与鉴定实验,本实验中有以下三次过滤,分别为了获得(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的 0.14 mol
11、/LNaCl 溶液(3)过滤溶解有 DNA 的 2 mol/LNaCl 溶液A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液B含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、含 DNA 的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液【答案】A611将处理后的溶液过滤后,加入与滤液体积相等的冷却的酒精溶液进行处理,可以得到较纯的 DNA这是因为ADNA 易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精BDNA 不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精CDNA 和滤液中其他成分更易溶于酒精DDNA 和滤液中其他成分都不溶于酒精【答案
12、】B【解析】在滤液中加入酒精,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起的丝状物就是析出的DNA,此处利用的原理是 DNA 不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精,B 正确,A、C、D 均错误。12如图为“DNA 粗提取和鉴定实验的相关操作,这些操作目的正确的是A是洗涤红细胞,去除血细胞表面的杂质B是溶解 DNA,去除不溶于酒精的杂质C溶解 DNA,去除不溶于 2 mol/LNaCl 溶液的杂质D稀释 NaCl 溶液,去除不溶于低浓度 NaCl 溶液的杂质【答案】C7考点:DNA 的粗提取与鉴定实验【名师点睛】DNA 的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水 2 次加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水胀破;
13、加到含 DNA 的 2 mol/L 的NaCl 溶液中,使 NaCl 溶液的物质的量浓度下降到 0.14 mol/L,使 DNA析出用纱布过滤 3 次过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;滤取 0.14 mol/L 的NaCl 溶液中析出的 DNA(黏稠物) ;过滤溶有 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl溶液用 NaCl 溶液 4次加 2mol/L 的 NaCl 溶液,溶解提取的细胞核物质;用 0.14 mol/L 的NaCl 溶液使 DNA 析出;用 2 mol/L 的 NaCl 溶液,溶解滤取的 DNA 黏稠物;用 2 mol/L 的 NaCl 溶液,溶解丝状物用于鉴定 DNA1
14、3DNA 粗提取实验中,应尽可能避免 DNA 断裂和降解。相关操作正确的是A以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进 DNA 溶解B向 DNA 溶液中迅速加入蒸馏水,使 DNA 快速析出C将丝状物溶解到 2molL-1NaCl 溶液中后,加水析出D向 DNA 溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌【答案】D二、非选择题(3 小题)14某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行 DNA 粗提取与鉴定的实验,实验主要过程如下图,回答下列问题:8(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和_对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是_。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有 DNA
15、 的滤液。(2)步骤二是 DNA 纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:滤液中 NaCl 浓度在 0.14 mol/L 时可分离出 DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在_mol/L 的 NaCl 溶液中;通常会向 DNA 粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是_;将得到的 DNA 粗提取物放在 6075 水浴中保温 1015 min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的 DNA,说明了 DNA _。(3)步骤三中向滤液中加入 DNA 体积分数为 95%的酒精的目的是_,依据的原理是_。得到纯净的 DNA 后,可利用 DNA 与_在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。【答案】 (1)食盐
16、(氯化钠) 溶解 DNA(2)2 分解其中的蛋白质 具有较高的稳定性(或耐较高温度)(3)析出 DNA DNA 不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与 DNA 分离 二苯胺【解析】 (1)进行 DNA 粗提取与鉴定时,步骤一中需加入一定量的洗涤剂和食盐(氯化钠)对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是溶解DNA,将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有 DNA 的滤液。 (2)步骤二是 DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:利用 DNA 在浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低可分离出 DNA;若要再次提纯,需要将其溶解在 2
17、 mol/L 的 NaCl 溶液中。通常会向 DNA 粗提取物中加入嫩肉粉,由于嫩肉粉中含有蛋白酶,可分解其中的蛋白质。由于 DNA 具有较高的稳定性(或耐较高温度) ,将得到的 DNA 粗提取物放在 6075 水浴中保温 1015 min,则蛋白质被破坏,可得到纯度较高的 DNA。(3)由于 DNA 不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与 DNA 分离,故步骤三中向滤9液中加入体积分数为 95%的酒精的目的是析出 DNA。得到纯净的 DNA 后,可利用 DNA 与二苯胺在沸水浴条件下发生显色(蓝色)反应,来对其进行鉴定。15回答下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验的问题。(1)下列有关“D
18、NA 的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是(_)ADNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随 NaCl 溶液浓度的降低而减小B利用 DNA 不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的 DNACDNA 是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D在沸水中,DNA 遇二苯胺会出现紫色反应(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。正确的操作顺序是_。上图 C、E 步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是_和_。图 A 步骤中所用酒精必须是经过_才能使用,该步骤的目的是_。(3)为鉴定 A 中所得到的丝状物的主要成分为 DNA,可滴加_试剂,沸水浴,如果出现_,则该丝状物的主要成分
19、为 DNA。【答案】 (1)B(2)CBEDA加速血细胞的破裂 降低 NaCl 溶液的浓度,使 DNA 析出充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的 DNA(3)二苯胺 蓝色10(2)根据 DNA 的粗提取和鉴定步骤:加入蒸馏水,破碎细胞过滤,获取含 DNA 的滤液去除滤液中杂质DNA 的析出鉴定。所以正确的操作顺序是 CBEDA。C 加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E 加蒸馏水是使 NaCl 溶液的浓度降低,析出DNA。DNA 不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以 A 步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNA。(3)DNA 鉴定
20、用二苯胺水浴加热,呈蓝色。16关于 DNA 粗提取的实验材料的选择,研究者经过多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料。请据图回答问题:(1)在实验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是A稀释血液,冲洗样品B使血细胞破裂、降低 NaCl 浓度使 DNA 析出C使血细胞破裂、增大 DNA 溶解量D使血细胞破裂、提取含杂质较少的 DNA(2)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若它们按实验要求完成实验步骤后,结果是很难提取到 DNA,原因是_。(3)不同的 NaCl 溶液中,DNA 的溶解度不同,在 NaCl 溶液浓度是_时,DNA 的溶解度最小。(4)DNA 的析出和鉴定时,析出 DNA
21、时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的_(写出体积分数) ,静置后溶液中将析出 DNA鉴定时所用的试剂为_。【答案】 (1)B11(2)牛羊马为哺乳动物,其成熟的红细胞中没有细胞核(3)0.14 mol/L(4)95%的酒精 二苯胺( 3) 不 同 的 NaCl 溶 液 中 , DNA 的 溶 解 度 不 同 , 在 NaCl 溶 液 浓 度 是 0.14 mol/L 时 , DNA的 溶 解 度 最 小 。(4)DNA 的析出和鉴定时,析出 DNA 时应将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的 95%的酒精,静置后溶液中将析出 DNA。鉴定时所用的试剂为二苯胺。【名师点睛】在 DNA 粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水,第一次鸡血中加入蒸馏水,目的是使血细胞吸水涨破,释放 DNA;第二次在 2 mol/L 的氯化钠溶液中加入蒸馏水,目的是降低 NaCl 浓度,使 DNA 析出。
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