SW T 2-2013 植物提取物 越橘提取物.pdf

1、 SW 国际商务标准 SW/T 22013 植物提取物 越橘提取物 Bilberry Extract 2013-10-1 实施 2013-9-10 发布 中国医药保健品进出口商会发布 SW/T 22013 2 前言 本标准 由中 国医 药保 健品 进出口 商会 提出 。 本标准 由中 华人 民共 和国 商务部 归口 。 本标准 由中 国医 药保 健品 进出口 商会 国际 商务 标准 化技术 委员 会负 责解 释。 本标准 由北 京绿 色金 可生 物技术 股份 有限 公司 负责 起草。 本标准 主要 起草 人： 侯翔 燕、李 艳梅 、吴 启林 、姚 军芳、 李春 华 SW/T 22013 3 国

2、际商 务标准 植物提 取物 越 橘提取 物 1 范围 本标准 规定 了越 橘提 取物 的技术 要求 、检 验方 法、 检验规 则和 标签 、包 装、 运输、 贮存 要求 。 本标准 适用 于以 杜鹃 花科 植物欧 洲越 橘 （Vaccinium myrtillus L. ）的新鲜冷 冻果 实为原 料经 提取 树 脂 精制后 ，干 燥而 成的 越橘 提取物 。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本 标准的引用而成为本标准 的条款。凡是注日期的引 用文件，其随后所 有的修改单（不包括勘误 的内容）或修订版均不适 用于本标准，然而，鼓励 根据本标准达成协议的 各方研 究是 否可 使用 这些 文

3、件的 最新 版本 。凡 是不 注日期 的引 用文 件， 其最 新版本 适用 于本 标准 。 GB 4789.2 食品 安全 国家 标准 食品 微生 物学 检验 菌 落总数 测定 GB 4789.3 食品 安全 国家 标准 食品 微生 物学 检验 大 肠菌群 计数 GB 4789.4 食品 安全 国家 标准 食品微生 物学 检验 沙门氏菌 检验 GB 4789.10 食品 安全 国家 标准 食品 微生 物学 检验 金黄色葡 萄球 菌检 验 GB 4789.15 食品 安全 国家 标准 食品 微生 物学 检验 霉菌和酵 母计 数 GB 4789.38 食品 安全 国家 标准 食品 微生 物学 检验

4、 大 肠埃希 氏菌 计数 GB 5009.3 食品 安全 国家 标准 食品 中水 分的 测定 GB 5009.4 食品 安全 国家 标准 食品 中灰 分的 测定 GB 5009.12 食品 安全 国家 标准 食品 中铅 的测 定 GB/T 5009.15 食品 中镉 的测定 GB/T 5009.74 食品添 加剂 中重金 属限 量试 验 GB 9685 食品容 器、 包装 材料用 添加 剂使 用卫 生标 准 中华人 民共 和国 药典 （2010 年版 ）一部 附录IXB 铅 、镉、 砷、 汞、 铜测 定法 3 有效成分名称、结构式、分子式和相对分子质量 越橘提取物 （Bilberry Extr

5、act）由一 组有 效成 分组 成，其结 构通 式为 ： o HO OGlyc R 2 R 3 + Cl - R 1 OH各组分 名称 、结 构式 特征 基团、 分子 式、 相对 分子 质量见 表 1 。 SW/T 22013 4 表1 花青素和花色苷各组分名称、结构式特征基团、分子式、相对分子质量 组分 R R 1R 2Glyc 3分子式 分子量 花青素 飞燕草 素 Delphinidin OH OH OH H C 15 H 11 O 7 338.70 Cl 矢车菊 素 Cyanidin OH OH H H C 15 H 11 O 6 322.70 Cl 矮牵牛 素 Petunidin OH

6、 OH OCH H 3C 16 H 13 O 7 352.72 Cl 芍药素 Peonidin OCH OH 3H H C 16 H 13 O 6 336.72 Cl 锦葵素 Malvidin OCH OH 3OCH H 3C 17 H 15 O 7 366.75 Cl 花色苷 飞燕草 素-3-O- 葡萄糖苷 Delphinidin-3-O-glucoside OH OH OH O CH 2 OH OH OH OHC 21 H 21 O 12 500.84 Cl 矢车菊 素-3-O- 葡萄糖苷 Cyanidin-3-O-glucoside OH OH H C 21 H 21 O 11 484.

7、84 Cl 矮牵牛 素-3-O- 葡萄糖苷 Petunidin-3-O-glucoside OH OH OCH C 322 H 23 O 12 514.86 Cl 芍药素-3-O- 葡萄糖苷 Peonidin-3-O-glucoside OCH OH 3H C 22 H 23 O 11 498.86 Cl 锦葵素-3-O- 葡萄糖苷 Malvidin-3-O- glucoside OCH OH 3OCH C 323 H 25 O 12 528.89 Cl 飞燕草 素-3-O- 半乳糖苷 Delphinidin-3-O-galactoside OH OH OH O CH 2 OH OH OH O

8、HC 21 H 21 O 12 500.84 Cl 矢车菊 素-3-O- 半乳糖苷 Cyanidin-3-O-galactoside OH OH H C 21 H 21 O 11 484.84 Cl 矮牵牛 素-3-O- 半乳糖苷 Petunidin-3-O-galactoside OH OH OCH C 322 H 23 O 12 514.86 Cl 芍药素-3-O- 半乳糖苷 Peonidin-3-O-galactoside OCH OH 3H C 22 H 23 O 11 498.86 Cl 锦葵素-3-O- 半乳糖苷 Malvidin-3-O- galactoside OCH OH 3

9、OCH C 323 H 25 O 12 528.89 Cl 飞燕草 素-3-O- 阿拉伯糖苷 Delphinidin-3-O-arabinoside OH OH OH O OH OH OHC 20 H 19 O 11 470.81 Cl 矢车菊 素-3-O- 阿拉伯糖苷 Cyanidin-3-O-arabinoside OH OH H C 20 H 19 O 10 454.81 Cl 矮牵牛 素-3-O- 阿拉伯糖苷 Petunidin-3-O-arabinoside OH OH OCH C 321 H 21 O 11 484.85 Cl 芍药素-3-O- 阿拉伯糖 苷 Peonidin-3-

10、O-arabinoside OCH OH 3H C 21 H 21 O 10 468.84 Cl 锦葵素-3-O- 阿拉伯糖 苷 Malvidin-3-O-arabinoside OCH OH 3OCH C 322 H 23 O 11 498.86 Cl SW/T 22013 5 4 技术要求 4.1 工艺要求 4.1.1 植物原料 以杜鹃 花科 植物 欧洲 越橘 （Vaccinium myrtillus L. ） 的新鲜成 熟果 实为 原料 ， 每年 7 月9 月收 集， 除杂后 快速 冷冻 （IQF ）即得。 4.1.2 工艺过程 越橘果 实 水或 者乙 醇提取 树脂精 制 干燥 产品 4

11、.2 产品要求 4.2.1 感官要求： 应符合 表 2 的要求 。 表 2 感官要求 项目 要求 检验方法 色泽 紫黑色 取适量样品置于清洁、 干燥的白瓷盘中， 在自然光线 下，观察其色泽和状态，并嗅其气味。 气味 越橘特殊气味 状态 均匀，无可见异物的粉末 4.2.2 理化要求:应符合 表 3 规定。 表 3 理化要求 项目 指标 检验方法 鉴别 符合规定 附录 A 中 A.2 指标成分含量 花色苷含量，% 36. 0 附录 A 中 A.2 花青素含量（以飞燕草素计） ，% 25. 0 附录 A 中 A.3 游离花青素含量，% 1 . 0 附录 A 中 A.2 粒度（80 目筛通过率） ，%

12、 9 8 附录 A 中 A.4 堆密度，g/mL 松密度 0.350.55 附录 A 中 A.5 紧密度 0.601.00 附录 A 中 A.5 pH 3.04.5 附录 A 中 A.6 干燥失重，% 5 . 0 GB 5009.3 灰分，% 3 . 0 GB5009.4 乙醇残留 ，mg/kg 100 0 附录 A 中 A.7 重金属（以 Pb计） ， mg/kg 2 0 GB/T5009.74 铅（Pb）， mg/kg 3 . 0 GB5009.12 镉（Cd）， mg/kg 1 . 0 GB/T5009.15 砷（As）， mg/kg 1 . 0 中华人民共和国药典 2010 版 一部附

13、录 IXB 汞（Hg）， mg/kg 0 . 1 中华人民共和国药典 2010 版 一部附录 IXB SW/T 22013 6 4.2.3 微生物指标要求:应符合表 4规定。 表 4 微生物指标 项目 指标 检验方法 细菌总数， cfu/g 1000 GB 4789.2 霉菌及酵母菌数，cfu/g 100 GB 4789.15 大肠菌群，MPN/g 3 GB 4789.3 大肠埃希氏菌 不得检出 GB 4789.38 沙门氏菌 不得检出 GB4789.4 金黄色葡萄球菌 不得检出 GB4789.10 4.2.4其他污染物 其他污染物限量要求，依 据不同用途，应符合我国 相关法规的规定。对于出

14、口产品，应符合 出 口目的 国相 关法 规的 规定 。 5. 检验方法 5.1 感官检验 按表 1 中 规定 进行 检验 。 启开试 样后 ，立 即嗅 其气 味；另 取试 样适 量置 于白 色瓷盘 中， 在自 然 光线下 ，观 察其 色泽 、外 观，并 检查 有无 异物 。 5.2 理化检验 5.2.1 鉴别 按附 录 A.2 中规定 的试 验方法进 行测 定， 所得 的供 试品谱 图中 的峰 18,1015 和 17 应与标 准品 谱图中 的相 对应 峰的 保留 时间一 致。 5.2.2 指标成 分含 量 按附 录 A.2、A.3 中规定 的检验方 法进 行测 定。 5.2.3 粒度 按附

15、录 A.4 中规定 的试 验方法进 行测 定。 5.2.4 堆密度 堆密度 分为 松密 度和 紧密 度，按 附 录 A.5 中规定 的试验方 法进 行测 定。 5.2.5 pH 值 按附 录 A.6 中规定 的检 验方法进 行测 定。 5.2.6 干燥失 重 按GB 5009.3 进行 测定 。 称样量1g （精 确至0.0001g ） ） ，干 燥温 度105 。 5.2.7 灰分 按 GB 5009.4 进行测 定。 称样 量 2g （精 确至 0.0001g ） ， 灰化 温度 550 。 5.2.8 乙醇残 留 按附 录 A.7 中规定 的检 验方法进 行测 定。 5.2.9 重金属

16、（以 Pb 计） 按 GB/T 5009.74 进行测 定。 5.2.10 铅 按 GB 5009.12 进行测 定。 5.2.11 镉 SW/T 22013 7 按 GB/T 5009.15 进行测 定。 5.2.12 砷 按中华 人民 共和 国药 典 2010 版一部 附录 IXB 铅、镉、砷 、汞 、铜 的测 定。 5.2.13 汞 按中华 人民 共和 国药 典 2010 版一部 附录 IXB 铅、镉、砷 、汞 、铜 的测 定。 5.3 微生物检验 5.3.1 细菌 总数 按 GB 4789.2 进行测 定。 5.3.2 霉菌 及酵 母菌 数 按 GB 4789.15 进行 测定 5.3

17、.3 大肠 菌群 按 GB 4789.3 进行测 定。 5.3.4 大肠 埃希 氏菌 按 GB 4789.38 进行测 定。 5.3.5 沙门 氏菌 按 GB 4789.4 进行测 定。 5.3.6 金黄 色葡 萄球 菌 按 GB 4789.10 进行测 定。 6 包装、标签、运输、贮存 6.1 包装 包装材 料应 符合 GB 9685 食品容 器、 包装 材料 用添 加剂使 用卫 生标 准的 要求 。 6.2 标签 包装标 签上 应标 注： 产品 名称、 产品 批号 、 产 品规 格、 净 含量 、 生 产日 期、 保质期 、 生 产厂 名、 厂址、 产地 。 标签内 容清 晰可 见， 标签

18、 应粘贴 牢固 。 6.3 运输 运输时 必须 轻装 轻卸 ，不 得与有 毒、 有害 和易 污染 物品混 装载 运， 严防 雨淋 、暴晒 。 6.4 贮存 产品应 存放 在干 燥、 通风 、 清洁 的地 方， 堆码 距墙 壁和地 面 20cm 以上 、 并有垫隔 物 。 避免与有 毒、有 害、 易腐 、易 污染 等物品 一起 堆放 。 6.5 保质期 在符合 规定 的贮 运条 件和 包装完 整、 未经 开启 封口 的情况 下， 保质 期为 三年 。 SW/T 22013 8 附录 A （规范性附录） 检验方法 A.1 一般规定 本标准 所用 试剂 和水 ， 在 没有注 明其 他要 求时 ， 均

19、 指分析 纯试 剂和GB/T 6682 规定的 三级 水。 实 验中所 用溶 液在 未注 明用 何种溶 剂配 制时 ，均 指水 溶液。 A.2 花色苷和游离花青素的测定方法 A.2.1 方法提要 样品经 超声 溶解 后， 采用 高效液 相色 谱法 测定 ，用 外标法 定量 。 A.2.2 仪器和用具 A.2.2.1 分析天 平， 感量 为 0.01mg。 A.2.2.2 超声波 清洗 仪。 A.2.2.3 高效液 相色 谱仪 （附紫 外检 测器 ） 。 A.2.2.4 0. 45 m 微孔滤 膜 ，有机 相。 A.2.3 试剂和溶液 A.2.3.1 甲醇， 色谱 纯。 A.2.3.2 乙腈，

20、色谱 纯。 A.2.3.3 无水甲 酸， 色谱 纯。 A.2.3.4 盐酸。 A.2.3.5 磷酸。 A.2.3.6 甲醇。 A.2.3.7 纯水 ，GB/T 6682 规定的 二级水 。 A.2.3.8 2% 盐酸-甲醇溶 液 （V/V ） ： 准确 量取盐 酸 20mL 加入800mL 甲醇中 ， 再用甲醇定 容到 1000mL， 摇匀， 即得 。 A.2.3.9 10% 磷酸水 溶液（V/V） ：准确量取 磷酸 10mL ，加入 80mL 水中，再用 水稀释 至 100mL，摇匀 ， 即得。 A.2.3.10 标准 品： a) 花色 苷标 准品 Bilberry dry extract

21、CRS （用于 测定 15 种花 色苷 组分 含量 ，购 自 欧洲 药品 质量 管理 局 EDQM ） 或其 他等 同标准 品（ 如 USP Cyanidin-3-O-glucoside chloride RS 等） ； b) 花青 素标 准品 Cyanidin chloride CRS （用于 测定 5 种花青 素组 分含 量， 购自 欧洲药 品质 量管 理局 EDQM ）或 其他 等同 标准品 （如 USP Cyanidin Chloride RS 等 ）。 A.2.4 色谱条件及系统适用性 A.2.4.1 色谱 条件 a) 色谱柱 ：Zorbax Extend-C 18 , 4.6 25

22、0mm, 5m 或同类型色 谱柱 。 b) 流动相：A 相 ： 甲酸- 水溶液（ 8.5:91.5 ， V/V ） ； B 相: 乙腈- 甲醇- 甲酸- 水溶液 （22.5:22.5:8.5:41.5 ，V/V/V/V） 。梯度条 件见 表 A1 。 SW/T 22013 9 表 A1 梯度条件 时间/min A 相/% B 相/% 0 93 7 35 75 25 45 35 65 46 0 100 50 0 100 51 93 7 60 93 7 c) 检测波 长：535nm 。 d) 流速：1.0mL/min。 A.2.4.2 系统适 用性 理论塔 板数 按花 色苷 峰计 算应不 低 于

23、2000。 A.2.5 操作方法 A.2.5.1 标准品 溶液(a) 的制备 精密称 取标 准品 Bilberry dry extract CRS 约 125mg（精确 至 0.01mg）， 置于 25mL 容量瓶中， 加入 2%盐酸- 甲醇溶液 （V/V ）并稀释 至刻 度， 摇匀 。准确 移取 2mL 的上述溶 液于 10mL 的容量瓶 中， 用 10% 磷酸 水溶 液 （V/V ） 定 容。 配 成的标 准品 溶液 中 Cyanidin-3-O-glucoside chloride 的 浓度 约 为0.035mg/mL 。 A.2.5.2 标准品 溶液 （b ） 的制备 精密称 取标 准

24、品 Cyanidin chloride CRS 约 10mg （精确 至 0.01mg ） ，置于 25mL 容量瓶 中， 加入 2% 盐酸- 甲醇 溶液 （V/V ） 并稀释 至刻 度， 摇 匀。 移 取 2mL 的上述溶 液 于 100mL 的容量瓶中， 用 10% 磷酸水 溶液 （V/V ）定容。 A.2.5.3 供试品 溶液 的制 备 称取供 试品 约 125mg（精 确至 0.01mg），于 25mL 的容量 瓶中 ，用 2%盐酸- 甲醇溶 液（V/V ） 定容， 移 取 2mL 的上述溶 液于 10mL 的容量瓶 中， 用 10% 磷酸 水溶 液 （V/V ） 定容。 用 0. 4

25、5 m 微孔 滤膜过 滤即 得供 试液 。 A.2.5.4 测定方 法 分别精 密吸 取标 准品 溶液 （a ） 、标 准品 溶液 （ b）、 供 试品溶 液 10 L，依次 注入 高效液 相色 谱仪 ， 测定， 按外 标法 计算 含量 。 A.2.6 结果计算 越橘提 取物 中花 色苷 含量 以质量 分数 1 w 计， 数值 以% 表示， 按公 式 （A.1）和（A.2）计算 ： 100% stda 1 stda i 1 1 stda i i = MW m A MW P V C A w (A.1) = i 1 w w(A.2) 式中： w i 供试 品中 各花 色苷 组分的 质量 分数 ，%

26、 ；A i 供试 品溶 液中 各花 色苷组 分的 峰面 积（ 谱图 中峰 18,1015,17）； A stda 标准品 溶液 （a）中Cyanidin-3-O-glucoside chloride的峰 面积 ； SW/T 22013 10 C stda 标准品 溶液 （a ） 中Cyanidin-3-O-glucoside chloride 的浓 度， 单位 为毫 克每毫 升（mg/mL ） ； m 1 供试品 的称 样量 ，单位为 毫克 （mg）； V 1 供试 品的 定容 体积 ，单位 为毫 升（mL）； P 1 标准 品（a）中Cyanidin-3-O-glucoside chlori

27、de 的纯度 ，% ； MW i 供试 品溶 液中 相应的花 色苷 组分 的分 子量 ； MW stda 2 w Cyanidin-3-O-glucoside chloride 的分 子量 。 越橘提 取物 中游 离花 青素 含量以 质量 分数 计， 数值以%表 示， 按 公式 （A.3）和（A.4 ） 计算： 100% MW stdb 1 stdb j 2 1 stdb j = m A MW P V C A w j (A.3) = j 2 w w(A.4) 式中： w j 供试 品中 各游 离 花青素组 分的 质量 分数 ，% A j 供试 品溶 液中 各游 离花青 素组 分的 峰面 积（

28、谱图中 峰 9,16,18,19,20）； A stdb 标准 品溶 液（b）中Cyanidin chloride的峰 面积； C stdb 标准 品溶 液（b） 中Cyanidin chloride的浓 度，单位 为毫 克每 毫升 （mg/mL ） ； m 1 供试品 的称 样量 ，单位为 毫克 （mg）； V 1 供试 品的 定容 体积 ，单位 为毫 升（mL）； P 2 标准 品（b）中Cyanidin chloride 的纯 度，% ； MW j 供试 品溶 液中 相 应的游 离花 青素 组分 的分 子量； MW stdb A.3.4操作方法 Cyanidin chloride的分 子

29、量 。 注 1 ：越橘提取物谱图及各组 份出峰顺序参见附录 B 中的 B.2 。 注 2 ： 欧洲药典和美国药典中 都规定越橘提取物中花色苷的含量以 Cyanidin-3-O-glucoside chloride 计， 游离花青素的 含量以 Cyanidin chloride 计。 A.3 花青素的测定方法 A.3.1 方法提要 样品经 超声 溶解 后， 采用 紫外可 见分 光光 度法 测定 。 A.3.2 仪器和用具 A.3.2.1 分析 天平 ，感 量 0.01mg。 A.3.2.2 超声波 清洗 仪。 A.3.2.3 紫 外可 见分 光光 度计。 A.3.3 试剂 A.3.3.1 甲醇。

30、 A.3.3.2 盐酸。 A.3.3.3 纯水 ，GB/T 6682 规定 的 二 级水 。 A.3.3.4 2%的盐酸- 甲醇 溶液（m/V） ：准确量 取盐 酸 47mL ，加入 800mL 甲 醇中， 再用 甲醇 稀释 至 1000mL ，摇匀， 即得 。 SW/T 22013 11 A.3.4.1 供试品 溶液 的制 备 精密称 取供 试品 15 20mg （精确 至 0.01mg） 放入烧 瓶中， 加入 60mL 2 盐酸- 甲醇溶 液 （m/V ） ， 在 80水浴中 回流水 解 0.5 小 时后冷却 至室温，用 2 盐酸- 甲 醇溶液（m/V ）转 移完全并 定容至 100mL

31、，摇匀， 得试 液 A 。然后 精密 吸取 5mL 到 50mL 容量瓶中 ，用 2盐酸- 甲醇溶液 （m/V ）定 容至刻度，摇匀 ，得待测 试液 B ；溶 液应澄清透 明 。若混浊，则用 滤纸过滤 ，开始的滤液 约 10mL 弃去， 之后 的滤 液用 作检 测。 A.3.4.2 测定方 法 以 2 盐酸- 甲醇 溶液 （m/V ）作空 白， 在 540nm 吸收波长 、1cm 比色 杯条 件下 测吸 光度 A 。 A.3.5 结果计算 越橘提 取物 中花 青素 的含 量以飞 燕草 素的 质量 分数w 3 100% 1020 1 3 = 2 m f A w 计，数 值以%表示 ，按 式（A.

32、5 ）计算 ： (A.5)式中： A 供试品 溶液 B 在吸 收波 长 540nm 下的吸 光度 ； f 供试品 溶液 A 至试 液 B 的稀 释倍 数； m 2 供试品 质量 ，单 位 为克（g）； 1020 飞燕草素的百 分 吸光系数（ ） ，既在 540nm 吸收波长下， 飞燕草素的溶液浓度为 1g/100mL 、比色杯 厚度 为 1cm 时，溶液 的吸 光度 ； 1 百分 吸光 系数 （ ） 定义规 定的 ， 在 100mL 溶 液中溶 解溶 质 （ 飞燕 草素 ） 的质量， 单位 为克（g）。 A.4 粒度的测定方法 A.4.1 设备 A.4.1.1 分样 筛（ 带筛 盖 与接收 盒

33、） ，80 目。 A.4.1.2 天平 ，感 量为 0.1mg。 A.4.2 操作程序 取接收 盒， 将分 样筛 放在 接收盒 上， 称取 约 50g 供 试品粉 末， 精确 至 0.01g， 置于分 样筛 内， 将 筛盖盖 好。 将分 样筛 保持 水平状 态， 左右 往返 轻轻 筛动 5min ，称 量接 收盒 内 的样品 质量 。 A.4.3 计算 通过率 以w 4(A.6) 式中： m 计，数 值以% 表示， 按式 （A.6 ）计 算： 3 供试品 质量 ，单 位 为克（g）； m 4 % 100 4 4 3 m m w = 过筛后 接收 盒内 样品 质量 ，单 位为 克（g）。 A.5

34、 堆密度的测定方法 A.5.1 设备 A.5.1.1 天平， 感量 为 0.1mg 。 SW/T 22013 12 A.5.1.2 玻璃 量筒 ，100mL 。 A.5.2. 操作程序 A.5.2.1 量筒 的准 备： 取 洁净、 干燥 的量 筒， 并称 量其质 量（m 5 ）。 A.5.2.2 松密 度的 测定 ： 将通 过 80 目筛 的样 品松 缓地转入 量筒 中至 905mL 处， 弄平 粉末表 面， 读 取固体 粉末 的体 积（V 2 ） ， 称量量 筒与 样品 的质 量（m 6 ） ，精确 到 0.01g 。 A.5.2.3 紧密 度的 测定： 将上述 盛有 样品 的量 筒放 在台

35、面 上 （铺 有 约 5mm厚的橡胶 ）， 由 2cm 左右 的高度 自坠 到台 面上 ， 反复此操 作约 100 次， 量得 压紧后 的粉 末体 积 （V 3 ） ， 继续上 述操 作约 30 次， 量得粉 末体 积（V 4 ）。当 V 3 与V 4 相差小 于 2mL 时，读 取最终 体积 （V 4 ）, 否则 重 复上述 操作 ，直 到符 合为止 。 A.5.3 计算 松密度w 5 和紧 密度w 6(A.7) 分别按式（A.7 ）和式 （A.8 ） 计算。 (A.8) 式中: w 5 松 密度 ，单 位为克 每毫升 （g/mL）； w 6 紧 密度 ，单 位为克 每毫升 （g/mL）；

36、m 5 量筒质 量， 单位 为克（g）； m 6 量筒与 粉末 样品 的质量， 单位 为克 （g）； V 2 加入 粉末 后， 量筒 量得的 最初 的体 积， 单位 为毫升 （mL）； V 4 % 100 - 2 5 5 V m m w 6 = 量筒 量得 的压 紧后 的粉末 最终 体积 ，单 位为 毫升（mL）。 A.6 pH 的测定方法 A.6.1 设备 A.6.1.1 分析天 平， 感量 为 0.1mg。 A.6.1.2 pH 计。 A.6.2 试剂和溶液 A.6.2.1 去离子 水。 A.6.2.2 pH4.01 标准 缓冲溶液 ：精 密称 取在 115 5 干 燥 23 小时的 邻苯

37、二甲 酸氢 钾 10.21g， 加水使 溶解 并稀 释至 1000mL ，该溶液在 25 时 pH 值为 4.01。 A.6.2.3 pH6.86 标准 缓冲溶液 ：精 密称 取在 115 5 干 燥 23 小时的 磷酸氢二 钠 3.55g 与磷酸 二氢 钾 3.40g，加水 使溶 解并稀释 至 1000mL ，该溶液 在 25 时 pH 值为 6.86 。 A.6.3 操作程序 A.6.3.1 pH 计校 准： 按 pH 计的 使用 说明 ， 调节室 温在 25或缓 冲溶 液在 水浴中保 温至 25 ， 先 用 pH6.86 的标准 缓冲 溶液 定位， 然后 用 pH4.01 的标 准缓冲

38、溶液 校正 斜率 。 A.6.3.2 测量： 精密 称取 供试 品 0.5g，加新 沸冷 却后的去 离子 水 50mL 溶解后，将供试 品溶 液在 水 浴中保 温至 25 ， 用经 校准的 pH 计测 量溶 液 pH 。 % 100 - 4 5 6 V m m w 6 = SW/T 22013 13 A.7 乙醇残留测定方法 A.7.1 仪器和用具 A.7.1.1 气相色 谱仪 （带 氢火焰 检测 器） 。 A.7.1.2 进样系 统： 顶空 进样器 。 A.7.1.3 色谱柱 ：DB-624 或同类 型色 谱柱 。 A.7.1.4 分析天 平， 感量 为 0.1mg。 A.7.2 试剂和溶液

39、 A.7.2.1 标准品 ：乙 醇， 色谱级 。 A.7.2.2 纯水，GB/T 6682 规定的 二级水 。 A.7.3 色谱条件 A.7.3.1 检测 条件 A.7.3.1.1 载气 ：氦 气。 A.7.3.1.2 进样 方式 ：顶 空分流 （分 流比=1 ：10）。 A.7.3.1.3 载气 流量 ：1.2mL/min 。 A.7.3.1.4 进样 体积 ：1mL 。 A.7.3.1.5 进样 口温 度：250 。 A.7.3.1.6 检测 器温 度：280 。 A.7.3.1.7 升温 程序 ：见 表 A2 。 表 A2 升温程序 序号 升温程序 （/m in ） 柱温 （ ） 保持时

40、间 （min ） 运行时间 （min ） 1 / 35 0 0 2 2 50 3 10.5 3 10 220 4 31.5 A.7.3.2 顶空条 件： 见表 A3 。 表 A3 顶空进样条件 样品制备程序 操作参数 平衡温度（） 85 平衡时间（min ） 45 传输线温度（） 125 A.7.4 溶液制备及测定 A.7.4.1 标准品 溶液 的制 备 精密称 取乙 醇约 2.0000g， 于 100mL 容量瓶中 ，用 水 定容, 混匀 。取 该液 1.0mL 于 100mL 容量 瓶中, 用水 稀释 至 100mL, 配制成 乙醇 浓度 为 200 g/mL 的标准品使 用溶 液。 取

41、该标准 品溶 液 1.0 mL 加入 到 20mL 顶空瓶中， 加入 水 2.0mL ，立即塞紧 瓶盖， 同时 压紧 铝盖 ，备 用。 A.7.4.2 供试品 溶液 的制 备 精密称 取供 试品 1.0g （称准至 0.1mg）于 20mL 的顶空瓶中 ， 加入 水 3.0mL ， 立即塞 紧瓶 盖， 同 SW/T 22013 14 时压紧 铝盖 ，备 用。 A.7.4.3 测定 标准品 溶液 和供 试品 溶液 顶空进 样， 注入 气相 色谱 仪，记 录色 谱图 。 A.7.5 结果计算 乙醇残 留量 以w 7(A.9) 式中： w 计，按式 （A.9 ）计算 ： 7 供 试品 中乙 醇的残

42、留量， 单位 为毫 克每 千克 （mg/kg）； A 1 供试 品溶 液中 乙醇 的峰面 积； A 2 标准 品溶 液中 乙醇 的峰面 积； C 1 标准品 溶 液 中乙醇 的浓度 ，单 位为 微克 每毫 升（g/mL ） ； V 5 加入 顶空 瓶中 的标 准品溶 液的 体积 （1mL）； m 7 7 m A V A w = 2 5 1 1 7 C 供试品 质量 ，单 位为克（g）； 注 3 ：本方法同时适用于甲醇和丙酮残留量测定，甲醇和丙酮标准品使用溶液浓度可配制成：甲醇 20g/mL 、丙 酮 5 g/mL 。 SW/T 22013 15 附录 B （资料 性附 录） B.1 标准 品（

43、Bilberry dry extract CRS ） 液相色 谱图 。 min 0 10 20 30 40 50 mAU 0 10 20 30 40 50 60 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13. 14 15 16 17. 18 19 20图B.1 标准品（Bilberry dry extract CRS ）液相色 谱图 B.2 越橘 提取 物样 品 液相色谱图 。 min 0 10 20 30 40 50 mAU 0 20 40 60 80 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 1920图B.2 越橘提 取物 样品

44、 液相色谱 图 图中组 份及 出峰 顺序 见表 B1 。 SW/T 22013 16 表B1 越橘提取物中各组份参考保留时间 序号 组份名称 保留时间（min ） 相对保留值 1 飞燕草素-3-O-半乳糖苷 10.67 0.60 2 飞燕草素-3-O-葡萄糖苷 12.88 0.72 3 矢车菊素-3-O-半乳糖苷 14.83 0.83 4 飞燕草素-3-O-阿拉伯糖苷 15.27 0.85 5 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 17.87 1.00 6 矮牵牛素-3-O-半乳糖苷 19.38 1.08 7 矢车菊素-3-O-阿拉伯糖苷 19.98 1.12 8 矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷 22.44

45、 1.26 9 飞燕草素 23.37 1.31 10 芍药素-3-O-半乳糖苷 24.55 1.37 11 矮牵牛素-3-O-阿拉伯糖苷 25.15 1.41 12 芍药素-3-O-葡萄糖苷 28.31 1.58 13 锦葵素-3-O-半乳糖苷 28.93 1.62 14 芍药素-3-O-阿拉伯糖苷 30.61 1.71 15 锦葵素-3-O-葡萄糖苷 32.28 1.81 16 矢车菊素 33.65 1.88 17 锦葵素-3-O-阿拉伯糖苷 35.21 1.97 18 矮牵牛素 39.32 2.20 19 芍药素 43.99 2.46 20 锦葵素 44.30 2.48 非商业性声明：上述所采用的设备、色谱柱、标准对照品等，涉及具体商业品牌、型号的，仅供参考，无商业 目的，鼓励标准使用者尝试使用不同品牌、型号的设备、色谱柱及标准品。