1、ICSZ 1813.080中华人民共和国国家标准GB/T 14550-2003代替GB/T 14550-1993土壤中六六六和滴滴涕测定的气相色谱法Method of gas chromatographic for determination ofBHC and DDT in soil2003-11一10发布2004-04-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布GB/T 14550-2003前言本标准是对GB/T 14550-1993土壤质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法进行下述内容的修订:原标准中2.3制备色谱柱时使用的试剂和材料和3.6色谱柱及5.2.3校准数据表示的内容全部删
2、去;在第5章色谱测定操作步骤中增加了测定条件B、毛细管色谱柱及图谱;把6.2. 2精密度、6.2.3准确度和6.2.4检测限的数据表格全部放到附录A中，原精密度用标准偏差表示改为采用相对标准偏差表示。本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准的起草单位:农业部环境保护科研监测所。本标准的主要起草人:黄士忠、刘潇威、黄永春、王继军、买光熙、徐应明、李治祥、张克强。GB/T 14550-2003土壤中六六六和滴滴涕测定的气相色谱法范围本标准规定了土壤中六六六和滴滴涕残留量的测定方法。本标准适用于土壤样品中有机氯农药残留量的分析。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本
3、标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 17332-1998食品中有机氯和拟除虫菊醋类农药多种残留的测定NY/T 395农田土壤环境质量监测技术规范3原理土壤样品中的六六六和滴滴涕农药残留量分析采用有机溶剂提取，经液、液分配及浓硫酸净化或柱层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器(ECD)检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。4试剂与材料4.1载气:氮气(N)纯度)99.99%,4.2标准样品及
4、土壤样品分析时使用的试剂和材料。所使用的试剂除另有规定外均系分析纯，水为蒸馏水。4.2.1农药标准品:a-BHC, (3-BHC,7-BHC,8-BHC, P. P-DDE,O. P-DDT, P. P-DDD,P. P-DDT，纯度为98.0%一99.。%。4.2.1.1农药标准溶液制备:准确称取(4.2.1)的每种100 mg(准确到士0.000 1 g),溶于异辛烷或正己烷(p-BHC先用少量苯溶解)，在100 mL容量瓶中定容至刻度，在冰箱中贮存4.2.1.2农药标准中间溶液配制:用移液管量分别取八种农药标准溶液，移至100 mL容量瓶中，用异辛烷或正己烷稀释至刻度，八种储备液的体积比
5、为:VPBHC Vp BHC，PBHC V&BHC VP. P-DDEVo. P -DDTVP. P-DDD，VP. P-DDT一1:1，3. 5，1:3.5，5，3，8(适用于填充柱)。4.2. 1.3农药标准工作溶液配制:根据检测器的灵敏度及线性要求，用石油醚或正己烷稀释中间标液，配制成几种浓度的标准工作溶液，在4下贮存。4.2.2异辛烷(CgH,a)e4.2. 3正己烷(C, H,):沸程670C-690C，重蒸。4.2.4石油醚:沸程60一90,C，重蒸。4.2.5丙酮(C H, COCH, ):重蒸。4.2.6苯(C, He):优级纯。4.2.7浓硫酸(Hz SO, ):优级纯。4.
6、2.8无人硫酸钠(Na,SO):在3000C烘箱中烘烤4h，放人干燥器备用。GB/T 14550-20034.2.9硫酸钠溶液:20 g/Lo4.2.10硅藻土:试剂级。5仪器5.1月旨肪提取器(索式提取器)。52旋转蒸发器。5.3振荡器。5.4水浴锅。5.5离心机。5.6玻璃器皿:样品瓶(玻璃磨口瓶)，300 mL分液漏斗，300 mL具塞锥形瓶，100mL量筒,250 mL平底烧瓶，25 mL,50 mL,100 mL容量瓶。5.7微量注射器。5.8气相色谱仪:带电子捕获检测器沪Ni放射源)。6样品6. 1样品性状6.1.1样品种类:土壤。6.1.2样品状态:固体。6.1.3样品的稳定性:
7、在土壤样品中的六六六、滴滴涕化学性质稳定。6.2样品的采集与贮存方法6.2. 1样品的采集:按照NY/T 395中有关规定采集土壤，采集后风干去杂物，研碎过60目筛，充分混匀，取500 g装人样品瓶中备用。6.2.2样品的保存:土壤样品采集后应尽快分析，如暂不分析可保存在一18冷冻箱中。7分析步获7. 1提取准确称取20. 0 g土壤置于小烧杯中，加蒸馏水2 ml，硅藻土4g，充分混匀，无损地移人滤纸筒内，上部盖一片滤纸，将滤纸筒装人索式提取器中，加100 mL石油醚一丙酮(1，1)，用30 mL浸泡土样12 h后在75C -95恒温水浴锅上加热提取4h，每次回流4次一6次，待冷却后，将提取液
8、移人300 mL的分液漏斗中，用10 ml石油醚分三次冲洗提取器及烧瓶，将洗液并人分液漏斗中，加人100 mL硫酸钠溶液，振荡1 min，静置分层后，弃去下层丙酮水溶液，留下石油醚提取液待净化。7.2净化7.2. 1浓硫酸净化法(A法):适用于土壤、生物样品。在分液漏斗中加人石油醚提取液体积的十分之一的浓硫酸，振摇1 min，静置分层后，弃去硫酸层(注意:用浓硫酸净化过程中，要防止发热爆炸，加浓硫酸后，开始要慢慢振摇，不断放气，然后在较快振摇)，按上述步骤重复数次，直至加人的石油醚提取液二相界面清晰均呈透明时止。然后向弃去硫酸层的石油醚提取液中加人其体积量一半左右的硫酸钠溶液。振摇十余次。待其
9、静置分层后弃去水层。如此重复至提取液成中性时止(一般2次4次)，石油醚提取液再经装有少量无水硫酸钠的筒型漏斗脱水，滤人250 mL平底烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至5 mL，定容10 mL。定容，供气相色谱测定。7.2.2柱层析净化法(B法):遵照GB/T 17332-1998中6.2的净化步骤进行。7.3气相色谱测定7.3.1测定条件AGB/T 14550-20037.3.1.1柱a)玻璃柱:2.0 mX2 mm 0. d),填装涂有1. 5%OV-17+1, 95%QF-1的Chromosorb WAW-DMCS, 80目100目的担体。b)玻璃柱:2. 0 mX2 mm(i. d)，填装涂有
10、1. 5% OV-17+ 1. 95% OV-210的Chromosorb W AW-DMCS-HP 80目一100目的担体。7.3.1.2温度:柱箱1950C 2000C，汽化室22o0C，检测器2800C一3000C。7.3. 1.3气体流速:氮气(N,)50 mL/min-70 mL/mine7.3.1.4检测器:电子捕获检测器(ECD)。7.3.2测定条件B7.3.2.1柱:石英弹性毛细管柱DB-工7,30 mX0.25(i. d),7.3.2.2温度:(柱温采用程序升温方式)1500C携噢竺竺兰飞兰坐卜280.塑三竺些些几2800C，进样口2200C，检定器(ECD) 320C ,7
11、.3.2.3气体流速:氮气1. 0 mL/min;尾吹37.25 mL/min.7.3.3气相色谱中使用农药标准样品的条件标准样品的进样体积与试样的进样体积相同，标准样品的响应值接近试样的响应值。当一个标样连续注射进样两次，其峰高(或峰面积)相对偏差不大于700，即认为仪器处于稳定状态。在实际测定时标准样品和试样应交叉进样分析。7.3.4进样7.3.4.1进样方式:注射器进样7.3.4.2进样量:1 1cL-4 IL.7.3.5色谱图7.3.5.1色谱图图1采用填充柱;图2采用毛细管柱。7.3.5.2定性分析7.3. 5.2. 1组分的色谱峰顺序:a-BHC, Y-BHC, ,3-BHC, 8
12、-BHC, P. P-DDE, O. P-DDT, P. P-DDD,7.3.5.2.2、P. P-DDT检验可能存在的干扰，采取双柱定性。用另一根色谱柱1. 5%OV-17+1.95%OV-21。的Chromosorb W AW-DMCS-HP 80目一10。目进行确证检验色谱分析，可确定六六六、滴滴涕及杂质干扰状况。7.3.5.3定量分析7.3.5.3.1气相色谱分析吸取1 pL混合标准溶液注人气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积)。再吸取1川试样，注人气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积)，根据色谱峰的保留时间和峰高(或峰面积)采用外标法定性和定量7.3.5.3.
13、2计算cXV.XH,(S)XVV,XH(S)Xm式中:X样本中农药残留量，单位为毫克每千克(mg/kg) ;c.标准溶液中I组分农药浓度，单位为微克每毫升(pg/mL) ;V,标准溶液进样体积，单位为微升(PL);V样本溶液最终定容体积，单位为毫升(mL) ;V样本溶液进样体积，单位为微升(PI);GB/T 14550-2003H (S;,)标准溶液中i组分农药的峰高(mm或峰面积mm) ;H, (S,)样本溶液中组分农药的峰高(mm或峰面积mm) ;m称样质量，单位为克(9)。1 a-BHC;2一Y-BHC3件BHC4-8-BHC;5-P. P-DUE;6-0. P-DDT;7-P. P-D
14、DD;8一一P. P-DDT图1六六六、滴滴涕气相色谱图一一a-BHC2-Y-BHC;3一一(3-BHC;4一6-BHC;5一一P. P-DUE;6-0. P-DDT;7-P. P-DDD;8一P. P-DDT,图2六六六、滴滴涕气相色谱图GB/T 14550-2003结果表示8.1定性结果根据标准样品的色谱图中各组分的保留时间来确定被测试样中出现的六六六和滴滴涕各组分数目和组分名称。8.2定量结果8. 2. 1含量表示的方法根据7.3.3.3.2计算出的各组分的含量，以mg/kg表示。8.2.2精密度变异系数(00):2.080x-8.190,。参见表A. I o8.2.3准确度加标回收率(
15、%):90.0%-99. 2%。参见表A.2.8.2.4检测限最小检测浓度:0. 49 X 10-0 mg/kg-4. 87 X 10- mg/kg。参见表A.3.14550-2003附录A(资料性附录)方法的精密度、准确度和检测限A. 1方法的精密度见表A.1.表A. 1精密度(土壤)农药名称添加浓度/(mg/kg)变异系数CV/(%)允许差/(%)室内室间室内室间a-BHC0.200 04.225.3316.2914. 270.040 02.324.648.9515. 870.004 05.267. 8920.3118.17卜BHC1.000 04. 247.3815. 3623. 480
16、. 200 03.545. 148.9515. 570.020 04. 786.9118. 4522. 53Y-BHC0. 200 03.682. 4514. 2011. 490.040 03.505.2213. 6616.890.004 02.705.4010. 4320.86S-BHC0.500 05.554.7932. 5720. 570. 100 03.637. 0512. 7223.910.010 03.303.3012. 728.16P. P-DDE0. 500 04.895.8018. 8714. 720.100 03. 525. 9714.0219. 760.010 05.26
17、6. 3120. 3116. 350. P-DDT1.000 05. 278.1220. 3525. 530. 200 04. 753.9018.3515. 690.020 03. 194. 7912. 5914. 16P. P-DDD0.500 06.036.9823. 2817.000. 100 04. 155.3216. 0314. 790.010 04. 355.4316. 7812.45P. P-DDT1.000 03. 356.0912. 9620.490.200 02. 924.4111.2813.650.020 02.086. 258. 0424. 12注:协作实验室为5个;每
18、个实验室对每个添加浓度做重复5次试验。GB/T 14550-2003A.2方法准确度见表A.2,表A.2方法准确度农药名称添加浓度/(mg/kg)准确度(加标回收率)/(%)土壤a -BHC0. 200 094. 8o. 040 095.00.004 095.0p-BHC1.000 093.80. 200 090.00. 020 094.0Y-BHC0.200 093. 80.040 091. 00.004 092. 5S-BHC0. 500 094. 30. 100 093. 60. 010 091.0P. P-DDE0. 500 097.00.100 093.80.010 095.0O.
19、P-DDT1.000 099. 20. 200 095. 70.020 094.0P. P-DDD0. 500 097. 10.100 093.90.010 092. 0P. P-DDT1.000 091. 80.200 097.50.020 096.0注:协作实验室为5个;每个实验室对每个添加浓度做重复5次试验A. 3方法检测限见表A.3，最小检出浓度见式(A.1),表A. 3检测限(土坡)农药名称最小检测量/9最小检测浓度/(mg/kg)a-BHC民BHC7-BHCS-BHCP. P-DDEO. P-DDTP. P-DDDP. P-DDT3.57X10-13.73火10-1z1.18义10-9. 79X10一1臼1. 76沉10-37. 56又10-15. 57X10-1.47只10-0. 49只10-40.80X10-40. 74只10-0.18义10-30. 17只10-1. 90义10-0. 48 X 10-4. 87火10-方法最小检出浓度(mg/kg) =最小检出量(妇X样本溶液定容体积(mL)样本溶液进样体积(gL) X样品质量(g)一A.1)
