1、 ICS 67.080.01 B 04 DB51 四川省地方标准 DB51/T 13522011 豆芽中氯吡脲的测定高效液相色谱法 2011 - 12 - 28 发布 2012 - 03 - 01 实施四川省质量技术监督局 发布DB51/T 13522011 I 目 次 前 言 . II 1 范围 . . 1 2 规范性引用文件 1 3 原理 . . 1 4 试剂 . . 1 5 仪器 . . 2 6 分析步骤 . . 2 7 精密度 3 附录 A（资料性附录） 氯吡脲标样色谱图及空白豆芽样品加标色谱图 4 DB51/T 13522011 II 前 言 本标准附录A为资料性附录。 本标准由四川
2、省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准起草单位：四川省农业科学院分析测试中心。 本标准主要起草人：毛建霏、郭灵安、付成平、代晓航。DB51/T 13522011 1 豆芽中氯吡脲的测定高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了豆芽中氯吡脲1-(2-氯-4-吡啶基)-3-苯基脲的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于豆芽中氯吡脲的残留量分析。 本标准的定量限为0.010mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 668
3、2 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样用乙腈提取，硫酸镁和氯化钠盐析，PSA分 散固相萃取净化，使用具有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，以保留时间定性，外标法峰面积定量。 4 试剂 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.1 水，GB/T 6682，一级。 4.2 甲醇（色谱纯）。 4.3 乙腈（色谱纯）。 4.4 乙腈+水混合溶液（V+V=50+50）。 4.5 无水硫酸镁。 4.6 氯化钠。 4.7 PSA 吸附剂：N 丙基乙二胺键合硅胶吸附剂，粒径 40-100m。 4.8 氯吡脲标准品：纯度99%。 4.9 标准溶液 4.9.1 氯吡脲标准储备溶液（100g/mL）：称取相当于
4、氯吡脲 10.0mg 的氯吡脲标准品(4.8)，用乙腈(4.3)溶解并定容至 100mL，置于-20冰箱储存备用，可稳定储藏 3 个月。 DB51/T 13522011 2 4.9.2 氯吡脲标准工作液 （0.050g/mL） ： 用乙腈+水混合溶液(4.4)稀释氯吡脲标准储备溶液(4.9.1)至 0.050g/mL,保存于 4冰箱备用,可稳定保存 1 个月。 5 仪器 5.1 高效液相色谱仪（带紫外检测器）。 5.2 组织捣碎机。 5.3 离心机。 6 分析步骤 6.1 样品制备 使用组织捣碎机（ 5.2）将样品均质匀浆。 6.2 试样处理 称取匀浆混匀的豆芽试样 10.0g 于 50mL
5、离心管中，加入 10.0mL 乙腈后充分摇匀。然后加入 1.0g氯化钠和 4.0g 无水硫酸镁， 充分摇匀后 3700r/min 离心 3min。 取离心后的 5mL 上清液， 加入 0.250g PSA 和 0.750g 无水硫酸镁 , 充分摇匀后 3700r/min 离心 3min， 取 1mL 上层清液 ,加入 1mL水摇匀后过 0.22um滤膜上机测定。 6.3 色谱参考条件 色谱柱：化学键合C 18柱(柱长250mm，内径4.6mm，填料直径5m)或性能相当者。 紫外检测波长：265nm。 流动相：甲醇+水=68+32（V+V）。 流速：0.80mL/min。 柱温：30。 进样量：
6、20.0L。 6.4 测定 按照色谱条件，待高效液相色谱仪运行稳定后，分别吸取标准工作液和待测液注入液相色谱仪进行测定。标样及试样图谱参见附录A。 6.5 结果计算及表示 样品中氯吡脲含量（ X）以毫克每千克 (mg/kg)表示，按式(1)计算； 12AmfAVCX= .(1) 式中： X 样品中氯吡脲的含量，单位为毫克每千克 (mg/kg)； C 氯吡脲标准溶液浓度的数值，单位为微克每毫升 (g/mL)； DB51/T 13522011 3 V 试样定容体积，单位为毫升 (mL)； A2 样品中氯吡脲的峰面积； f 稀释倍数； m 试料质量，单位为克 (g)； A1标样中氯吡脲的峰面积。 测定结果的有效位数保留两位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。 DB51/T 13522011 4 A A 附 录 A （资料性附录） 氯吡脲标样色谱图及空白豆芽样品加标色谱图 氯吡脲标样色谱图（标样浓度0.025 g/mL），见图A.1 图A.1 氯吡脲标样色谱图（标样浓度 0.025 g/mL） 空白豆芽样品加标色谱图（添加水平为0.050mg/kg），见图A.2 图A.2 空白豆芽样品加标色谱图（添加水平为0.050mg/kg。 _ DB51/T 13522011
