1、中 华 人 民 共 和 国 国 家 环 境 保 护 标 准 H J 8 3 5 - 2 0 1 7 土 壤 和 沉 积 物 有 机 氯 农 药 的 测 定 气 相 色 谱 - 质 谱 法 S o i l a n d s e d i m e n t D e t e r m i n a t i o n o f o r g a n o c h l o r i n e p e s t i c i d e s G a s c h r o m a t o g r a p h y / M a s s s p e c t r o m e t r y （发布稿） 本 电 子 版 为 发 布 稿 。 请 以 中
2、国 环 境 出 版 社 出 版 的 正 式 标 准 文 本 为 准 。 2 0 1 7 - 0 7 - 1 8 发 布 2 0 1 7 - 0 9 - 0 1 实 施 环 境 保 护 部 发 布i 目 次 前 言 II 1 适 用 范 围 1 2 规 范 性 引 用 文 件 1 3 方 法 原 理 1 4 试 剂 和 材 料 1 5 仪 器 和 设 备 3 6 样 品 3 7 分 析 步 骤 7 8 结 果 计 算 与 表 示 9 9 精 密 度 和 准 确 度 10 10 质 量 保 证 和 质 量 控 制 11 11 废 弃 物 的 处 理 12 12 注 意 事 项 12 附 录 A （
3、 规 范 性 附 录 ） 方 法 检 出 限 和 测 定 下 限.13 附 录 B （ 资 料 性 附 录 ） 目 标 化 合 物 的 测 定 参 考 参 数.14 附 录 C （ 资 料 性 附 录 ） 方 法 的 精 密 度 和 准 确 度.15ii 前 言 为 贯 彻 中 华 人 民 共 和 国 环 境 保 护 法 ， 保 护 环 境 ， 保 障 人 体 健 康 ， 规 范 土 壤 和 沉 积 物 中 有 机 氯 农 药 的 测 定 方 法 ， 制 定 本 标 准 。 本 标 准 规 定 了 测 定 土 壤 和 沉 积 物 中 23 种 有 机 氯 农 药 的 气 相 色 谱- 质 谱
4、法 。 本 标 准 为 首 次 发 布 。 本 标 准 的 附 录 A 为 规 范 性 附 录 ， 附 录 B 和 附 录 C 为 资 料 性 附 录 。 本 标 准 由 环 境 保 护 部 环 境 监 测 司 、 科 技 标 准 司 组 织 制 订 。 本 标 准 主 要 起 草 单 位 ： 河 南 省 环 境 监 测 中 心 。 本 标 准 验 证 单 位 ： 新 乡 市 环 境 监 测 站 、 河 南 省 环 境 科 学 研 究 院 、 郑 州 市 环 境 保 护 监 测 中 心 站 、 开 封 市 环 境 监 测 站 、 中 国 地 质 科 学 院 水 文 地 质 环 境 地 质 研
5、究 所 、 河 南 省 环 境 监 测 中 心 。 本 标 准 环 境 保 护 部 2017 年 7 月 18 日 批 准 。 本 标 准 自 2017 年 9 月 1 日 起 实 施 。 本 标 准 由 环 境 保 护 部 解 释 。1 土 壤 和 沉 积 物 有 机 氯 农 药 的 测 定 气 相 色 谱- 质 谱 法 警 告 ： 试 验 中 所 用 有 机 溶 剂 和 标 准 物 质 为 有 毒 有 害 物 质 ， 标 准 溶 液 配 制 及 样 品 前 处 理 过 程 应 在 通 风 橱 中 进 行 ； 操 作 时 应 按 规 定 佩 戴 防 护 器 具 ， 避 免 直 接 接 触 皮
6、 肤 和 衣 物 。 1 适 用 范 围 本 标 准 规 定 了 测 定 土 壤 和 沉 积 物 中 有 机 氯 农 药 的 气 相 色 谱 - 质 谱 法 。 本 标 准 适 用 于 土 壤 和 沉 积 物 中 23 种 有 机 氯 农 药 的 测 定 ， 目 标 物 包 括 ：- 六 六 六 、 六 氯 苯 、- 六 六 六 、- 六 六 六 、- 六 六 六 、 七 氯 、 艾 氏 剂 、 环 氧 化 七 氯 、- 氯 丹 、- 硫 丹 、- 氯 丹 、 狄 氏 剂 、p,p-DDE 、 异 狄 氏 剂 、- 硫 丹 、p,p-DDD 、 硫 丹 硫 酸 酯 、 异 狄 氏 剂 醛 、o
7、,p-DDT 、 异 狄 氏 剂 酮 、 p,p-DDT 、 甲 氧 滴 滴 涕 、 灭 蚁 灵 。 通 过 验 证 ， 其 他 有 机 氯 农 药 也 可 适 用 本 标 准 。 当 取 样 量 为 20.0 g ， 浓 缩 后 定 容 体 积 为 1.0 ml 时 ， 采 用 全 扫 描 方 式 测 定 ， 方 法 检 出 限 为 0.02 mg/kg 0.09 mg/kg ， 测 定 下 限 为 0.08 mg/kg 0.36 mg/kg 。 详 见 附 录 A 。 2 规 范 性 引 用 文 件 本 标 准 内 容 引 用 了 下 列 文 件 或 其 中 的 条 款 。 凡 是 不 注
8、 明 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 有 效 版 本 适 用 于 本 标 准 。 GB 17378.3 海 洋 监 测 规 范 第 3 部 分 ： 样 品 采 集 、 贮 存 与 运 输 GB 17378.5 海 洋 监 测 规 范 第 5 部 分 ： 沉 积 物 分 析 HJ 613 土 壤 干 物 质 和 水 分 的 测 定 重 量 法 HJ 783 土 壤 和 沉 积 物 有 机 物 的 提 取 加 压 流 体 萃 取 法 HJ/T 166 土 壤 环 境 监 测 技 术 规 范 3 方 法 原 理 土 壤 或 沉 积 物 中 的 有 机 氯 农 药 采 用 适 合 的 萃 取 方
9、法 （ 索 氏 提 取 、 加 压 流 体 萃 取 等 ） 提 取 ， 根 据 样 品 基 体 干 扰 情 况 选 择 合 适 的 净 化 方 法 （ 铜 粉 脱 硫 、 硅 酸 镁 柱 或 凝 胶 渗 透 色 谱 ） ， 对 提 取 液 净 化 ， 再 浓 缩 、 定 容 ， 经 气 相 色 谱 分 离 、 质 谱 检 测 。 根 据 标 准 物 质 质 谱 图 、 保 留 时 间 、 碎 片 离 子 质 荷 比 及 其 丰 度 定 性 。 内 标 法 定 量 。 4 试 剂 和 材 料 除 非 另 有 说 明 ， 分 析 时 均 使 用 符 合 国 家 标 准 的 分 析 纯 试 剂 。
10、实 验 用 水 为 新 制 备 的 超 纯 水 或 蒸 馏 水 。 4 . 1 丙 酮 （C3H6O) ： 农 残 级 。 4 . 2 正 己 烷 （C6H14) ： 农 残 级 。 4 . 3 二 氯 甲 烷 （CH2Cl2) ： 农 残 级 。 4 . 4 乙 酸 乙 酯 （C4H8O2) ： 农 残 级 。 4 . 5 环 己 烷 （C6H12) ： 农 残 级 。 4 . 6 乙 醚 （C4H10O ） ： 农 残 级2 4 . 7 正 己 烷 - 丙 酮 混 合 溶 剂 I ：1+1 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 丙 酮 （4.1 ） 按 1:1 体 积 比 混 合 。 4 .
11、8 正 己 烷 - 丙 酮 混 合 溶 剂 II ：9+1 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 丙 酮 （4.1 ） 按 9:1 体 积 比 混 合 4 . 9 二 氯 甲 烷 - 丙 酮 混 合 溶 剂 ：1+1 用 二 氯 甲 烷 （4.3 ） 和 丙 酮 （4.1 ） 按 1:1 体 积 比 混 合 。 4 . 1 0 正 己 烷 - 乙 醚 混 合 溶 剂 I ：94+6 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 乙 醚 （4.6 ） 按 94:6 体 积 混 合 。 4 . 1 1 正 己 烷 - 乙 醚 混 合 溶 剂 II ：85+15 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 乙 醚 （4.6
12、） 按 85:15 体 积 混 合 。 4 . 1 2 正 己 烷 - 乙 醚 混 合 溶 剂 III ：1+1 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 乙 醚 （4.6 ） 按 1:1 体 积 混 合 。 4 . 1 3 正 己 烷 - 二 氯 甲 烷 混 合 溶 剂 I ：1+1 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 二 氯 甲 烷 （4.3 ） 按 1:1 体 积 混 合 。 4 . 1 4 正 己 烷 - 二 氯 甲 烷 混 合 溶 剂 II ：74+26 用 正 己 烷 （4.2 ） 和 二 氯 甲 烷 （4.3 ） 按 74:26 体 积 混 合 。 4 . 1 5 凝 胶 渗 透 色 谱
13、流 动 相 ： 用 乙 酸 乙 酯 （4.4 ） 和 环 己 烷 （4.5 ） 按 1+1 体 积 比 混 合 ， 或 按 仪 器 说 明 书 配 制 其 他 溶 剂 体 系 。 4 . 1 6 硝 酸 ： （HNO3 ）=1.42 g/ml ， 优 级 纯 。 4 . 1 7 硝 酸 溶 液 ：1+1 。 用 优 级 纯 硝 酸 （4.16 ） 与 实 验 用 水 按 1:1 体 积 比 混 合 配 置 。 4 . 1 8 有 机 氯 农 药 标 准 贮 备 液 ： =1000 mg/L 5000 mg/L ， 市 售 有 证 标 准 溶 液 。 4 . 1 9 有 机 氯 农 药 标 准
14、中 间 液 ： =200 mg/L 500 mg/L 。 用 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 对 有 机 氯 农 药 标 准 贮 备 液 （4.18 ） 稀 释 配 置 ， 并 混 匀 。 4 . 2 0 内 标 贮 备 液 ： =5000 mg/L 选 用 五 氯 硝 基 苯 或 菲-d10 或 -d 12 作 内 标 。 市 售 有 证 标 准 溶 液 。 亦 可 选 用 其 他 化 合 物 做 内 标 。 4 . 2 1 内 标 中 间 液 ： =500 mg/L 量 取 1.0ml 内 标 贮 备 液 （4.20 ） 于 10 ml 容 量 瓶 中 ， 用 正
15、己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 稀 释 至 标 线 ， 混 匀 。 4 . 2 2 替 代 物 贮 备 液 ： =2000 mg/L 4000 mg/L ， 市 售 有 证 标 准 溶 液 。 宜 选 用 十 氯 联 苯 或 2,4,5,6- 四 氯 间 二 甲 苯 和 氯 茵 酸 二 丁 酯 。 4 . 2 3 替 代 物 中 间 液 ： =200 mg/L 400 mg/L 用 正 己 烷 - 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 对 替 代 物 标 准 贮 备 液 （4.22 ） 稀 释 配 置 ， 并 混 匀 。 4 . 2 4 十 氟 三 苯 基 膦 （DFT
16、PP ） 溶 液 ： =50 mg/L ， 市 售 标 准 溶 液 。 其 他 浓 度 用 二 氯 甲 烷 （4.3 ） 稀 释 成 50 mg/L 浓 度 。 4 . 2 5 凝 胶 渗 透 色 谱 校 准 溶 液 ： 含 玉 米 油 （25 mg/ml ） 、 邻 苯 二 甲 酸 二 （2- 二 乙 基 己 基 ） 酯 （1 mg/ml ） 、 甲 氧 滴 滴 涕 （200 mg/L ） 、 苝 （20 mg/L ） 和 硫 （80 mg/L ） 的 混 合 溶 液 。 市 售 。3 注 ：4.18 4.25 中 的 所 有 标 准 贮 备 液 均 应 参 照 制 造 商 的 产 品 说
17、明 保 存 方 法 ， 所 有 配 置 的 中 间 液 应 于 -10 以下避光保存 。 使用前应检查其变化情况， 一旦蒸发或降解应重新配制， 使用前应恢复至室温、 混匀。 4 . 2 6 干 燥 剂 ： 优 级 纯 无 水 硫 酸 钠 （Na2SO4 ） 或 粒 状 硅 藻 土 250 m 150 m （60 目 100 目 ） 。 置 于 马 弗 炉 中 400 烘 烤 4 h ， 冷 却 后 装 入 磨 口 玻 璃 瓶 中 密 封 ， 于 干 燥 器 中 保 存 。 4 . 2 7 铜 粉 （Cu ） ： 纯 度 为 99.5% 使 用 前 用 硝 酸 溶 液 （4.17 ） 去 除 铜
18、 粉 表 面 的 氧 化 物 ， 用 实 验 室 用 水 冲 洗 除 酸 ， 再 用 丙 酮 （4.1 ） 清 洗 ， 然 后 用 高 纯 氮 气 （4.34 ） 吹 干 待 用 ， 每 次 临 用 前 处 理 ， 保 持 铜 粉 表 面 光 亮 。 4 . 2 8 硅 酸 镁 吸 附 剂 ：75 m150 m 左 右 （200 目-100 目 ） 。 置 于 表 面 皿 中 ， 以 铝 箔 或 锡 纸 轻 覆 ，130 下 活 化 12 h 左 右 ， 取 出 放 入 干 燥 器 中 冷 却 、 待 用 。 临 用 前 活 化 。 4 . 2 9 玻 璃 层 析 柱 ： 内 径 20 mm
19、左 右 ， 长 10 cm 20 cm ， 具 聚 四 氟 乙 烯 活 塞 。 4 . 3 0 硅 酸 镁 净 化 小 柱 ： 填 料 为 硅 酸 镁 ，1000 mg ， 柱 体 积 为 6 -10 ml 。 4 . 3 1 石 英 砂 ：150 m 830 m （100 目20 目 ） 置 于 马 弗 炉 中 400 烘 4 h ， 冷 却 后 装 入 具 塞 磨 口 玻 璃 瓶 中 密 封 保 存 。 4 . 3 2 玻 璃 棉 或 玻 璃 纤 维 滤 膜 ： 使 用 前 用 二 氯 甲 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 （4.9 ） 浸 洗 ， 待 溶 剂 挥 发 干 后 ， 贮 于 具
20、塞 磨 口 玻 璃 瓶 中 密 封 保 存 。 4 . 3 3 索 氏 提 取 套 筒 ： 玻 璃 纤 维 或 天 然 纤 维 材 质 套 筒 ， 玻 璃 纤 维 套 筒 置 于 马 弗 炉 中 400 烘 烤 4 h ， 天 然 纤 维 材 质 套 筒 使 用 前 应 用 和 样 品 提 取 相 同 的 溶 剂 清 洗 净 化 。 4 . 3 4 高 纯 氮 气 ： 纯 度 为 99.999% 。 4 . 3 5 载 气 ： 高 纯 氦 气 ， 纯 度 为 99.999% 。 5 仪 器 和 设 备 5 . 1 气 相 色 谱 / 质 谱 仪 ： 电 子 轰 击 （EI ） 电 离 源 。
21、5 . 2 色 谱 柱 ： 石 英 毛 细 管 柱 ， 长 30 m ， 内 径 0.25 mm ， 膜 厚 0.25 m ， 固 定 相 为 5%- 苯 基- 甲 基 聚 硅 氧 烷 ， 或 其 他 等 效 的 毛 细 管 色 谱 柱 。 5 . 3 提 取 装 置 ： 索 氏 提 取 等 性 能 相 当 的 设 备 。 5 . 4 凝 胶 渗 透 色 谱 仪 （GPC ） ： 具 254 nm 固 定 波 长 紫 外 检 测 器 ， 填 充 凝 胶 填 料 的 净 化 柱 。 5 . 5 浓 缩 装 置 ： 旋 转 蒸 发 仪 、 氮 吹 仪 或 其 他 同 等 性 能 的 设 备 。 5
22、 . 6 真 空 冷 冻 干 燥 仪 ： 空 载 真 空 度 达 13 Pa 以 下 。 5 . 7 固 相 萃 取 装 置 。 5 . 8 一 般 实 验 室 常 用 仪 器 和 设 备 。 6 样 品 6 . 1 样 品 的 采 集 与 保 存 土 壤 样 品 按 照 HJ/T 166 的 相 关 要 求 采 集 和 保 存 ， 沉 积 物 样 品 按 照 GB 17378.3 的 相 关 要 求 采 集 和 保 存 。 样 品 应 于 洁 净 的 具 塞 磨 口 棕 色 玻 璃 瓶 中 保 存 。 运 输 过 程 中 应 密 封 、 避 光 、 4 以 下 冷 藏 。 运 至 实 验 室
23、 后 ， 若 不 能 及 时 分 析 ， 应 于 4 以 下 冷 藏 、 避 光 、 密 封 保 存 ， 保 存 时 间 不 超 过 10 天 。 6 . 2 水 分 的 测 定4 土 壤 样 品 干 物 质 和 水 分 的 测 定 按 照 HJ 613 执 行 ， 沉 积 物 样 品 含 水 率 测 定 按 照 GB 17378.5 执 行 。 6 . 3 试 样 的 制 备 6 . 3 . 1 样 品 准 备 将 样 品 放 在 搪 瓷 盘 或 不 锈 钢 盘 上 ， 混 匀 ， 除 去 枝 棒 、 叶 片 、 石 子 等 异 物 ， 按 照 HJ/T 166 进 行 四 分 法 粗 分
24、。 一 般 情 况 下 应 对 新 鲜 样 品 进 行 处 理 。 自 然 干 燥 不 影 响 分 析 目 的 时 ， 也 可 将 样 品 自 然 干 燥 。 新 鲜 土 壤 或 沉 积 物 样 品 可 采 用 冷 冻 干 燥 和 干 燥 剂 脱 水 干 燥 。 如 果 土 壤 或 沉 积 物 样 品 中 水 分 含 量 较 高 （ 大 于 30% ） ， 应 先 进 行 离 心 分 离 出 水 相 ， 再 进 行 干 燥 处 理 。 方 法 一 ： 冻 干 法 。 取 适 量 混 匀 后 样 品 ， 放 入 真 空 冷 冻 干 燥 仪 （5.6 ） 中 干 燥 脱 水 。 干 燥 后 的 样
25、 品 需 研 磨 、 过 250 m （60 目 ） 孔 径 的 筛 子 ， 均 化 处 理 成 250 m （60 目 ） 左 右 的 颗 粒 。 然 后 称 取 20 g （ 精 确 到 0.01 g ） 样 品 进 行 提 取 。 方 法 二 ： 干 燥 剂 法 。 称 取 20 g （ 精 确 到 0.01 g ） 的 新 鲜 样 品 ， 加 入 一 定 量 的 干 燥 剂 （4.26 ） 混 匀 、 脱 水 并 研 磨 成 细 小 颗 粒 ， 充 分 拌 匀 直 到 散 粒 状 ， 全 部 转 移 至 提 取 容 器 中 待 用 。 6 . 3 . 2 提 取 提 取 方 法 可 选
26、 择 索 氏 提 取 、 加 压 流 体 萃 取 及 其 他 等 效 萃 取 方 法 。 a ） 索 氏 提 取 ： 将 制 备 好 的 土 壤 或 沉 积 物 样 品 全 部 转 入 索 氏 提 取 套 筒 （4.33 ） 中 ， 加 入 曲 线 中 间 点 以 上 浓 度 的 替 代 物 中 间 液 （4.23 ） ， 小 心 置 于 索 氏 提 取 器 回 流 管 中 ， 在 圆 底 溶 剂 瓶 中 加 入 100 ml 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） ， 提 取 16 h18 h ， 回 流 速 度 控 制 在 4-6 次/h 。 然 后 停 止 加 热 回 流
27、 ， 取 出 圆 底 溶 剂 瓶 ， 待 浓 缩 。 b ） 加 压 流 体 萃 取 按 照 HJ 783 执 行 。 注：如果 上述提 取液存在 明显水 分，需 要进一 步过滤 和脱水。 在玻璃 漏斗上 垫一层 玻璃棉或 玻璃纤 维 滤膜 （4.32 ） ， 加入约 5 g 无水硫酸钠 （4.26 ） ， 将提取液过滤至浓缩器皿中 。 再用少量正己烷- 丙酮混合溶剂 I （4.7 ） 洗涤 提 取 容器 3 次 ，洗 涤 液 并入 漏 斗 中过 滤 ，最 后 再 用少 量 正己 烷- 丙 酮混 合 溶 剂 I （4.7 ） 冲洗 漏 斗，全部收集至浓缩器皿中，待浓缩。 6 . 3 . 3 浓
28、 缩 浓 缩 方 法 推 荐 使 用 以 下 两 种 方 式 。 其 他 方 法 经 验 证 效 果 优 于 或 等 效 时 也 可 使 用 。 a ） 氮 吹 浓 缩 在 室 温 条 件 下 ， 开 启 氮 气 至 溶 剂 表 面 有 气 流 波 动 （ 避 免 形 成 气 涡 ） ， 用 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 多 次 洗 涤 氮 吹 过 程 中 已 露 出 的 浓 缩 器 管 壁 ， 浓 缩 至 约 1 ml ， 待 净 化 。 选 用 凝 胶 渗 透 色 谱 法 净 化 时 ， 当 浓 缩 至 2 ml 左 右 时 ， 继 续 加 入 约 5 ml 凝
29、胶 渗 透 色 谱 流 动 相 （4.15 ） 进 行 溶 剂 转 换 ， 再 浓 缩 至 约 1 ml ， 待 净 化 。 b ） 旋 转 蒸 发 浓 缩 加 热 温 度 设 置 在 40 左 右 ， 将 提 取 液 （6.3.2 ） 浓 缩 至 约 2 ml ， 停 止 浓 缩 。 用 一 次 性 滴 管 将 浓 缩 液 转 移 至 具 刻 度 浓 缩 器 皿 ， 并 用 少 量 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 将 旋 转 蒸 发 瓶 底 部 冲 洗 2 次 ， 合 并 全 部 的 浓 缩 液 ， 再 用 氮 吹 浓 缩 至 约 1 ml ， 待 净 化 。 选 用
30、 凝 胶 渗 透 色 谱 法 净 化 时 ， 当 上 述 浓 缩 液 浓 缩 至 2 ml 左 右 时 ， 继 续 加 入 约 5 ml 凝 胶 渗 透 色 谱 流 动 相 （4.15 ） 进 行 溶 剂 转 换 ， 再 用 氮 吹 浓 缩 至 约 1 ml ， 待 净 化 。 6 . 3 . 4 净 化5 净 化 推 荐 使 用 以 下 方 式 。 其 他 方 法 经 验 证 效 果 优 于 或 等 效 时 也 可 使 用 。 6 . 3 . 4 . 1 硅 酸 镁 层 析 柱 净 化 法 a ） 硅 酸 镁 层 析 柱 制 备 在 玻 璃 层 析 柱 （4.29 ） 底 部 填 入 玻 璃
31、 棉 （4.32 ） ， 依 次 加 入 约 1.5 cm 厚 的 无 水 硫 酸 钠 （4.26 ） 和 20 g 硅 酸 镁 吸 附 剂 （4.28 ） ， 轻 敲 层 析 柱 壁 ， 使 硅 酸 镁 吸 附 剂 （4.28 ） 填 充 均 匀 。 再 添 加 约 1.5 cm 厚 的 无 水 硫 酸 钠 （4.26 ） 。 加 入 60 ml 正 己 烷 （4.2 ） 淋 洗 ， 同 时 轻 敲 层 析 柱 壁 ， 赶 出 气 泡 ， 使 硅 酸 镁 吸 附 剂 （4.28 ） 填 实 ， 保 持 填 料 充 满 正 己 烷 （4.2 ） ， 关 闭 活 塞 ， 浸 泡 填 料 至 少
32、10min ， 此 时 在 层 析 柱 上 端 加 入 约 2 g 铜 粉 （4.27 ） 用 于 脱 除 提 取 液 中 的 硫 。 打 开 活 塞 的 同 时 ， 继 续 加 入 正 己 烷 60 ml 淋 洗 ， 当 上 端 无 水 硫 酸 钠 层 恰 好 暴 露 于 空 气 之 前 ， 关 闭 活 塞 待 用 。 如 果 填 料 干 枯 ， 需 要 重 新 处 理 。 b ） 净 化 将 浓 缩 后 的 提 取 液 转 至 硅 酸 镁 层 析 柱 内 ， 并 用 2 ml 正 己 烷 （4.2 ） 分 两 次 清 洗 浓 缩 管 ， 全 部 移 入 层 析 柱 ， 应 将 此 溶 液
33、浸 没 在 铜 粉 （4.27 ） 中 约 5 min 。 1 ） 不 需 要 分 离 样 品 中 多 氯 联 苯 和 有 机 氯 农 药 时 ， 可 直 接 使 用 200 ml 正 己 烷- 二 氯 甲 烷 混 合 溶 剂 I （4.13 ） 淋 洗 层 析 柱 ， 收 集 全 部 洗 脱 液 。 待 再 次 浓 缩 （6.3.5 ） 后 测 定 。 2 ） 需 要 分 离 样 品 中 多 氯 联 苯 和 有 机 氯 农 药 时 ， 于 硅 酸 镁 层 析 柱 下 置 一 圆 底 烧 瓶 ， 打 开 活 塞 使 浓 缩 液 （6.3.3 ） 至 液 面 刚 没 过 硫 酸 钠 层 ， 关
34、闭 活 塞 。 用 200 ml 正 己 烷- 乙 醚 混 合 溶 剂 I （4.10 ） 淋 洗 层 析 柱 ， 洗 脱 液 速 度 保 持 在 5 ml/min ， 收 集 全 部 淋 洗 液 。 此 洗 脱 液 包 含 多 氯 联 苯 及 六 六 六 、 氯 丹 等 大 部 分 有 机 氯 农 药 （ 见 表 1 ） 。 然 后 用 200 ml 正 己 烷- 乙 醚 混 合 溶 剂 II （4.11 ） 再 次 淋 洗 层 析 柱 ， 此 洗 脱 液 包 含- 硫 丹 、 硫 丹 硫 酸 酯 、 异 狄 氏 剂 醛 和 异 狄 氏 剂 酮 等 有 机 氯 农 药 。 再 用 200 m
35、l 正 己 烷- 乙 醚 混 合 溶 剂 III （4.12 ） 再 次 淋 洗 层 析 柱 ， 此 洗 脱 液 将 剩 余- 硫 丹 、 硫 丹 硫 酸 酯 、 异 狄 氏 剂 醛 和 异 狄 氏 剂 酮 等 有 机 氯 农 药 淋 洗 完 全 ， 不 需 要 独 立 测 试 多 氯 联 苯 时 合 并 全 部 淋 洗 液 ， 需 要 独 立 测 试 多 氯 联 苯 时 ， 不 要 将 第 一 部 分 淋 洗 合 并 在 一 起 。 待 再 次 浓 缩 （6.3.5 ） 后 测 定 。 注 1 ：其他淋洗体系在被验证对目标物有较好的净化效果时也可采用。 表 1 硅 酸 镁 层 析 柱 不 同
36、 阶 段 洗 脱 组 分 序号 化合物名称 洗脱液 1 洗脱液 2 洗脱液 3 1 - 六六六 95.2% 2 六氯苯 107.3% 3 - 六六六 111.3% 4 - 六六六 105.5% 5 - 六六六 122.6% 6 七氯 107.9% 7 艾氏剂 109.5% 8 环氧化七氯 105.6% 9 - 氯丹 113.8% 10 - 硫丹 114.5% 11 - 氯丹 108.4% 12 狄氏剂 118.3% 13 p,p-DDE 104.4% 14 异狄氏剂 123.8% 15 - 硫丹 7.4% 60.9% 7.2%6 16 p,p-DDD 120.5% 17 硫丹硫酸酯 5.8%
37、33.6% 40.0% 18 异狄氏剂醛 2.0% 31.2% 78.4% 19 o,p-DDT 111.8% 20 异狄氏剂酮 11.0% 79.1% 7.1% 21 p,p-DDT 117.4% 22 甲氧滴滴涕 121.8% 23 灭蚁灵 99.8% 注 2 ：洗脱液组分 洗脱液 1 ：200 ml 乙醚：正己烷混合液（体积比 6 ：94 ） 洗脱液 2 ：200 ml 乙醚：正己烷混合液（体积比 15 ：85 ） 洗脱液 3 ：200 ml 乙醚：正己烷混合液（体积比 1 ：1 ） 6 . 3 . 4 . 2 硅 酸 镁 净 化 小 柱 浓 缩 后 的 提 取 液 （6.3.3 ） 颜
38、 色 较 浅 时 ， 可 采 用 硅 酸 镁 净 化 小 柱 （4.30 ） 净 化 。 操 作 步 骤 如 下 ： 将 硅 酸 镁 净 化 小 柱 （4.30 ） 固 定 在 固 相 萃 取 装 置 （5.7 ） 上 ， 用 4 ml 正 己 烷 （4.2 ） 淋 洗 净 化 小 柱 ， 再 加 入 5 ml 正 己 烷 （4.2 ） ， 待 柱 充 满 后 关 闭 流 速 控 制 阀 浸 润 5 min ， 缓 慢 打 开 控 制 阀 ， 此 时 在 层 析 柱 上 端 加 入 约 2 g 铜 粉 （4.27 ） 用 于 脱 除 提 取 液 中 的 硫 。 继 续 加 入 5 ml 正 己
39、 烷 （4.2 ） ， 在 铜 粉 （4.27 ） 暴 露 于 空 气 之 前 ， 关 闭 控 制 阀 ， 弃 去 流 出 液 。 将 浓 缩 液 （6.3.3 ） 转 移 至 小 柱 中 ， 用 2 ml 正 己 烷 （4.2 ） 分 次 洗 涤 浓 缩 器 皿 ， 洗 液 全 部 转 入 小 柱 中 （ 若 须 脱 硫 ， 应 将 此 溶 液 浸 没 在 铜 粉 中 约 5 min ） 。 缓 慢 打 开 控 制 阀 ， 在 铜 粉 （4.27 ） 暴 露 于 空 气 之 前 关 闭 控 制 阀 。 不 需 要 分 离 样 品 中 多 氯 联 苯 和 有 机 氯 农 药 时 ， 打 开 控
40、 制 阀 ， 用 9 ml 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 II （4.8 ） 洗 脱 ， 缓 慢 打 开 控 制 阀 ， 使 洗 脱 液 浸 没 填 料 层 ， 关 闭 控 制 阀 约 1min ， 再 打 开 收 集 全 部 洗 脱 液 ， 待 再 次 浓 缩 加 入 内 标 （6.3.5 ） 后 测 定 。 6 . 3 . 4 . 3 凝 胶 色 谱 净 化 a ） 凝 胶 渗 透 色 谱 柱 的 校 准 按 照 仪 器 说 明 书 对 凝 胶 渗 透 色 谱 柱 进 行 校 准 ， 凝 胶 渗 透 色 谱 校 准 溶 液 （4.25 ） 得 到 的 色 谱 峰 应 满 足 以 下
41、 条 件 ： 所 有 峰 形 均 匀 对 称 ； 玉 米 油 和 邻 苯 二 甲 酸 二 （2- 二 乙 基 己 基 ） 酯 的 色 谱 峰 之 间 分 辨 率 大 于 85% ； 邻 苯 二 甲 酸 二 （2- 二 乙 基 己 基 ） 酯 和 甲 氧 滴 滴 涕 的 色 谱 峰 之 间 分 辨 率 大 于 85% ； 甲 氧 滴 滴 涕 和 苝 的 色 谱 峰 之 间 分 辨 率 大 于 85% ； 苝 和 硫 的 色 谱 峰 不 能 重 叠 ， 基 线 分 离 大 于 90% 。 b ） 确 定 收 集 时 间 有 机 氯 农 药 的 初 步 收 集 时 间 限 定 在 玉 米 油 出 峰
42、 后 至 硫 出 峰 前 ， 苝 洗 脱 出 以 后 ， 立 即 停 止 收 集 。 然 后 用 有 机 氯 农 药 标 准 中 间 液 （4.19 ） 进 样 形 成 标 准 物 谱 图 ， 根 据 标 准 物 质 谱 图 确 定 起 始 和 停 止 收 集 时 间 ， 并 测 定 其 回 收 率 ， 当 目 标 物 回 收 率 均 大 于 90% 时 ， 即 可 按 此 收 集 时 间 和 仪 器 条 件 净 化 样 品 ， 否 则 需 继 续 调 整 收 集 时 间 和 其 他 条 件 。 c ） 提 取 液 净 化 用 凝 胶 渗 透 色 谱 流 动 相 （4.15 ） 将 浓 缩 液
43、 （6.3.3 ） 定 容 至 凝 胶 渗 透 色 谱 仪 定 量 环 需 要 的 体 积 ， 按 照 确 定 后 的 收 集 时 间 自 动 净 化 、 收 集 流 出 液 ， 再 次 浓 缩 。 6 . 3 . 5 浓 缩 、 加 内 标7 净 化 后 的 试 液 （6.3.4 ） 再 次 按 照 氮 吹 浓 缩 或 旋 转 蒸 发 浓 缩 （6.3.3 ） 的 步 骤 进 行 浓 缩 、 加 入 适 量 内 标 中 间 液 （4.21 ） ， 并 定 容 至 1.0 ml ， 混 匀 后 转 移 至 2 ml 样 品 瓶 中 ， 待 测 。 6 . 4 空 白 试 样 的 制 备 用 石
44、 英 砂 （4.31 ） 代 替 实 际 样 品 ， 按 照 与 试 样 的 制 备 （6.3 ） 相 同 步 骤 制 备 空 白 试 样 。 7 分 析 步 骤 7 . 1 仪 器 参 考 条 件 7 . 1 . 1 气 相 色 谱 参 考 条 件 进 样 口 温 度 ：250 ， 不 分 流 。 进 样 量 ：1.0 l ， 柱 流 量 ：1.0 ml/min （ 恒 流 ） 。 柱 温 ： 120 保 持 2 min ； 以 12 /min 速 率 升 至 180 ， 保 持 5 min ； 再 以 7 /min 速 率 升 至 240 ， 保 持 1 min ； 再 以 1 /min
45、速 率 升 至 250 ， 保 持 2 min ； 后 程 序 升 温 至 280 保 持 2 min 。 7 . 1 . 2 质 谱 参 考 条 件 电 子 轰 击 源 ：EI 。 离 子 源 温 度 ：230 。 离 子 化 能 量 ：70 eV 。 接 口 温 度 ：280 。 四 级 杆 温 度 ：150 。 质 量 扫 描 范 围 ：45 amu450 amu 。 溶 剂 延 迟 时 间 ：5min 。 扫 描 模 式 ： 全 扫 描(Scan) 或 选 择 离 子 模 式 （SIM ） 模 式 。 7 . 2 校 准 7 . 2 . 1 质 谱 性 能 检 查 每 次 分 析 前
46、， 应 进 行 质 谱 自 动 调 谐 ， 再 将 气 相 色 谱 和 质 谱 仪 设 定 至 分 析 方 法 要 求 的 仪 器 条 件 ， 并 处 于 待 机 状 态 ， 通 过 气 相 色 谱 进 样 口 直 接 注 入 1.0 l 十 氟 三 苯 基 膦 （DFTPP ） （4.24 ） ， 得 到 十 氟 三 苯 基 膦 质 谱 图 ， 其 质 量 碎 片 的 离 子 丰 度 应 全 部 符 合 表 2 中 的 要 求 。 否 则 须 清 洗 质 谱 仪 离 子 源 。 表 2 十 氟 三 苯 基 膦 （ D F T P P ） 关 键 离 子 及 离 子 丰 度 评 价 质荷比（m
47、/z ） 相对丰度规范 质荷比（m/z ） 相对丰度规范 51 198 峰（基峰）的 30-60% 199 198 峰的 5-9% 68 小于 69 峰的 2% 275 基峰的 10-30% 70 小于 69 峰的 2% 365 大于基峰的 1% 127 基峰的 40-60% 441 存在且小于 443 峰 197 小于 198 峰的 1% 442 基峰或大于 198 峰的 40% 198 基峰，丰度 100% 443 442 峰的 17-23%8 7 . 2 . 2 校 准 曲 线 的 绘 制 取 5 个 5 ml 容 量 瓶 ， 预 先 加 入 2 ml 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶
48、剂 I （4.7 ） ， 分 别 量 取 适 量 的 有 机 氯 农 药 标 准 中 间 液 （4.19 ） 、 替 代 物 中 间 液 （4.23 ） 和 内 标 中 间 液 （4.21 ） ， 用 正 己 烷- 丙 酮 混 合 溶 剂 I （4.7 ） 定 容 后 混 匀 ， 配 制 成 至 少 5 个 浓 度 点 的 标 准 系 列 ， 有 机 氯 农 药 和 替 代 物 的 质 量 浓 度 均 分 别 为 1.00 g/ml 、5.00 g/ml 、10.0 g/ml 、20.0 g/ml 、50.0 g/ml ， 添 加 的 内 标 质 量 浓 度 均 为 40.0 g/ml 。 也
49、 可 根 据 仪 器 灵 敏 度 或 样 品 中 目 标 物 浓 度 配 制 成 其 他 气 相 色 谱 - 质 谱 仪 适 合 浓 度 水 平 的 标 准 系 列 。 按 照 仪 器 参 考 条 件 （7.1 ） ， 从 低 浓 度 到 高 浓 度 依 次 进 样 分 析 。 以 目 标 化 合 物 浓 度 为 横 坐 标 ； 以 目 标 化 合 物 与 内 标 化 合 物 定 量 离 子 响 应 值 的 比 值 和 内 标 化 合 物 质 量 浓 度 的 乘 积 为 纵 坐 标 ， 绘 制 校 准 曲 线 。 7 . 2 . 3 标 准 样 品 的 气 相 色 谱 / 质 谱 图 在 本 标 准 推 荐 的 仪 器 参 考 条 件 下 ， 目 标 物 的 总 离 子 流 谱 图 见 图 1 。 1. 2,4,5,6- 四氯间二甲苯 （替代物） ；2. - 六六六；3. 六氯苯；4. - 六六六；5. - 六六六；6. 五氯硝基苯 （内 标） ；7. - 六六六；8. 七氯；9. 艾氏剂；10. 环氧化七氯；11.- 氯丹；12.- 硫丹；13.
