1、 中华人民共和国行业标准 食品添加剂 -环状糊精 QB 1613-92 本标准适用于淀粉经酶转化再用水提纯制取的环状糊精。用于食品作稳定剂、 矫味剂、改形剂等。 分子式：(C6H10O5)7 分子量:1134.997(按1983年国际原子量) 1 技术要求 1.1 感官要求 本品为白色结晶性粉末,无嗅,微甜。 1.2 环状糊精理化指标应符合表中要求。 项 目 指标, 试验方法 总糖 86.5 含量(总糖中) 95 水分 13 GB 5009.3 灰分 0.5 GB 5009.4 重金属(以Pb计) 0.002 GB 8451 砷(As) 0.0001 GB 8450 2 试验方法 2.1 鉴别
2、 2.1.1 称取1g试样,加入100mL水。混匀后取1mL于试管中,加入一滴三氯乙烯,强烈振 摇,产生白色沉淀。 2.1.2 称取1g试样,加入100mL水。混匀后取1mL滴在白瓷板上,加入一滴 0.02mol/L的 碘液,显淡黄色。 2.2 含量及总糖测定 2.2.1 原理 用苯酚硫酸法测定试样的总糖量,利用糖化酶只分解直链糊精和低聚糖,而不分解 环状糊精的特性,以DNS法(3.5二硝基水杨酸法)测出糖化酶作用于试样产生的葡萄糖 量,总糖与葡萄糖量之差与总糖之比,即为环状糊精的含量。 2.2.2 试剂和溶液 a.硫酸(GB 625); b.苯酚(HGB 3131,重蒸馏):80水溶液; c
3、.0.2mol/L 乙酸乙酸钠缓冲溶液:(PH4.5)取11.43mL 冰乙酸(GB 676)定容为 1000mL,成为0.2mol/L浓度的乙酸溶液。称取27.2g乙酸钠(GB 693)或16.4g无水乙酸 钠(GB 694)溶解定容为1000mL,成为0.2mol/L浓度的乙酸钠溶液,以乙酸溶液乙酸钠 溶液=5.74.3(体积比)的比例混合即成,上述缓冲溶液应以酸度计校正PH值; d.葡萄糖淀粉酶溶液:配制根霉葡萄糖淀粉酶(实验室用)溶液酶活力为4U/mL,用时 配制,可放冰箱4保存,保存期不超过3天; e.3,5二硝基水杨酸溶液称取3,5二硝基水杨酸12.6g、酒石酸钾钠(GB 1288
4、) 364g、重蒸苯酚10g、氢氧化钠(GB 629)41.92g、亚硫酸氢钠(HG 3-1291)10g,混合加 热溶解后定容为2000mL;暗处保存一星期,滤纸过滤备用。此溶液简称DNS溶液; f.葡萄糖标准溶液:称取0.5000g 葡萄糖(HG 3-1094),用水溶解,定容至500mL, 成为1000g/mL的葡萄糖标准溶液;吸取10mL上述标准溶液,定容至100mL,即成100g /mL的葡萄糖标准液。 2.2.3 测定程序 2.2.3.1 葡萄糖的测定 a.DNS 法葡萄糖标准曲线的制作,按表在试管中配制反应液。 编 号 空白 1 2 3 4 5 6 7 8 试 剂 1000g/m
5、L的葡萄糖标准溶液mL0.000.100.150.200.300.400.600.801.00 水 mL1.501.401.351.301.201.100.900.700.50 比色液中葡萄糖含量 g 0 100150 200 300 400 600 800 1000 乙酸乙酸钠缓冲缓 mL1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 DNS溶液 mL2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 将上述反应液置于沸水浴中反应5min后取出,冷却至室温,在分光光度计上用0.5cm 比色杯,在540nm波长处比色,记录消光值,以葡萄糖含量为横坐标
6、,消光值为纵坐标,绘制 标准曲线。 b.试样中酶解产生的葡萄糖量的测定 称取1.000g试样,溶解定容至100mL,吸取1mL 该试样液,加入0.2mol/L 乙酸乙酸钠 缓冲液(PH4.5)1mL,再加入葡萄糖淀粉酶溶液0.5mL,置于50超级恒温水浴中反应30min, 反应终止时,加入DNS溶液2.5mL,再置于沸水浴中5min后取出,冷至室温,按2.2.3.1a测定消 光值,空白用1mL水代替试样液,根据试样的消光值查对标准曲线,得出比色液含葡萄糖量, 根据式(1)求出1g试样中酶解产生的葡萄糖量A(g)。 C100 A= (1) 10*6 式中:A1g试样中酶解产生的葡萄糖量,g; C
7、在标准曲线上查得的数值,g。 2.2.3.2 总糖的测定 a.苯酚硫酸法葡萄糖标准曲线的制作,按表在试管中配制反应液。 - 试 剂 编 号 空白 1 2 3 4 5 100g/mL 葡萄糖标准溶液 mL 0.0 0.5 0.7 0.9 1.1 1.3 水 mL 2.0 1.5 1.3 1.1 0.9 0.7 比色液中葡萄糖含量 g 0 50 70 90 110 130 苯酶(80水溶液) L 50 50 50 50 50 50 硫酸 mL 5 5 5 5 5 5 注:将表中三种溶液混匀后再加入硫酸。加硫酸时,应将移液管正对液面,直冲而下, 以移液管壁上附留的酸液滴下5滴为准。 待上述反应液冷却
8、至室温后,在分光光度计上用0.5cm的比色杯,在490nm波长处比色, 记录消光值,以葡萄糖含量为横坐标。消光值为纵坐标,绘制标准曲线 b.试样的总糖测定 将2.2.3.1b的试样液再稀释100倍,制成100g/mL的试样液,吸取1mL该试样液,加1mL 水、50mL苯酚水溶液,充分摇匀后,再加入5mL硫酸,反应后冷却至室温,按2.2.3.2a测定消 光值 。 空白用2mL水代替试样液。 根据比色液的消光值查对标准曲线,得出比色液含总糖量。 根据式(2)求出1g试样中的总糖量(以葡萄糖计,g)。 C100100 B= (2) 10*6 式中:B1g试样中的总糖量(以葡萄糖计),g; C在标准曲线上查得的数值,g。 2.2.3.3计算 B-A X()= -100 (3) B 式中:X环状糊精含量(总糖中),; A1g试样中酶解产生的葡萄糖量,g; 1g试样中的总糖量(以葡萄糖计),g。
