1、分类号X41备案号9490-2001q日中华人民共和国轻口二行业标准QB 2526一2001食品添加剂真菌a一淀粉酶2001-11-15发布2002-05-01实施中国轻工业联合会发布QB 2526-2001前言本标准的全部技术内容为强制性。食品添加剂真菌a-淀粉酶是以米曲霉(Aspergillus oryzae)发酵法生产，经提纯制取而得的真菌a-淀粉酶.可供食品工业生产作加工助剂用。本标准由中国轻工业联合会综合业务部提出。本标准由全国食品发酵标准化中心归口。本标准由中国食品发醉工业研究所、北京凯赛生物技术有限公司负责起草。本标准主要起草人:张启先、吴玉宏、刘莲芳。中华人民共和国轻工行业标准
2、食品添加剂QB 2526-2001真菌a一淀粉酶1范围本标准规定了食品添加剂真菌a-淀粉酶(Food additive-Fungus a-Amylase)的技术要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。本标准适用于以米曲霉(AspergUlus oryzae)发酵法生产.经提纯制取而得的真菌a-淀粉酶，可供食品工业生产作加工助剂用。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 8449一1987食品添加剂中铅的测定方法GB/T 8450-1987食
3、品添加剂中砷的测定方法GB/T 8451一1987食品添加剂中重金属限量试验方法GB 4789.2一1994食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3一1994食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4-1994食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.6-1994食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验QB/T 1803一1993工业酶制剂通用试验方法3技术要求3.1性状本品为褐色液体。3.2理化指标理化指标应符合表1的规定。3.3微生物指标微生物指标应符合表2的规定。中国轻工业联合会2001-11-15批准2002-05-01实施1QB2526一2001表l项目指标淀
4、粉糖化酶活力.UZn1L)20000PH6.07.0砷(As)，mglkg簇2铅(Pb)，m妙9续5重金属(以Pb计)，功妙9(30表2项目 指标酒落总数，创.工一卜簇null.jx10大肠菌群.MPN/loon止( 3000层沙门氏菌不得检出埃希氏大肠杆菌不得检出4试验方法本试验所用的试剂和水，在没有其他特殊要求时，均使用分析纯试剂和蒸馏水或相当纯度的水。4.1淀粉糖化酶活力的测定4.1，1原理酶作用于淀粉溶液生成还原搪。然后加入费林试剂，在加热的情况下，定量地生成氧化亚铜沉淀。在加入碘化钾和硫酸后，生成游离碘，此时，立即用硫代硫酸钠溶液滴定。4.1.2试剂和溶液a)30%碘化钾溶液:碘化钾
5、15o9溶解于水350mL中，保存在褐色试剂瓶中，避免阳光直射:b)25%硫酸溶液:硫酸1259溶于水375InL中:c)0.05mo比硫代硫酸钠溶液:将定量分析用的0.lmoVL硫代硫酸钠母液500mL用煮沸过的冷却水稀释，所得溶液的总体积为IO00lnL。配制好后，应进行标定，求出浓度校正系数f值:d)lm。呱乙酸一乙酸钠缓冲溶液(PHS.0):将lm。比乙酸钠溶液加入到lmo比的乙酸溶液中，调哪到5.仇的可溶性淀粉溶液(pHS.0):将可溶性淀粉(试剂级)在105干燥4h后称量计算含水量。然后，根据可溶性淀粉的含水量称取。.509(折干)的可榕性淀粉，缓慢加入到沸水50mL中.煮沸5而n
6、，用自来水冷却后.加入lm。讥乙酸一乙酸钠缓冲溶液(PHS.0)smL，用水定容至10OmL:钓费林试剂铜溶液:硫酸铜34，669溶解在水中，定容至500mL二QB 2526-2001酒石酸钾钠碱溶液:酒石酸钾钠173 g和氢氧化钠50g溶解在水中，定容至500 mL;-使用前，精确地取等体积的铜溶液和碱液充分混合。4.1.3测定方法4.1.3.1样品溶液的制备用水稀释酶样品，使得到酶液的(T, -T,) XfX 1.62值为3 mg-6mg葡萄糖量。示例:真菌a-锭粉酶:n=50000稀释1 mL - 250 mL，再稀释IML一200mL.4.1.3.2测定将可溶性淀粉溶液(4.1.2e)
7、 10mL加到100 mL Erlenmyer三角瓶中，置于(40士0.5)恒温水浴中，预热10 min-15 min，加入样品稀释酶液(4.1.3.1) ImL。准确加热30 min后.加入费林试剂(4.1.2 f) 4 MT.使酶失活。将三角瓶直接在煤气喷灯(或电炉)上加热2 min后，立即放在自来水中冷却。随后，加入30 %碘化钾溶液(4.1.2 a) 2 mL秘25%硫酸溶液(4.工.2b) 2mL，用0. 05 moUL硫代硫酸钠溶液(4.1.2 c)滴定游离出的碘，以蓝色消失作为滴定终点几。(ML). i 1,-空白对照试验:以水取代酶液，在另一个三角瓶中用上述同样的操作步骤测定空
8、白对照值To (mo。临近终点时，加入1%可溶性淀粉溶液应使用可溶性淀粉(试剂级)另行配制I滴.2滴，以蓝色消失作为滴定终点。4.1.4分析结果的表述在本条件下，反应30 min，反应液中产生相当于10 mg葡萄糖的还原糖所需的酶量.定义为1个淀粉糖化酶活力单位。4.1.4.1淀粉糖化酶活力按式(1)计算。淀粉糖化酶活力(U/ML) = (Tn一Tzn)x (xl.62x止、，.(I)10式中:与一酶反应液滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL;To一空白溶液滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，ML;厂一一-0.05 moVL硫代硫酸钠溶液浓度的校正系数;1.62一换算系数;1/10一该分析方法
9、的常数(相当于10 mg葡萄糖的还原糖);n样品的稀释倍数。4.1.5结果的允许差平行试验相对误差不得超过5%。4. 2 pH的测定按QB/T 1803一1993中pH的试验方法进行测定。4.3砷的测定按GB/T 8450进行测定.4.4铅的测定按GB/T 8449进行测定。4.5重金属的测定按GB/T 8451进行测定。4.B菌落总数的测定QB 2526-2001按GB 4789.2进行测定。4.7大肠菌群的测定按GB 4789.3进行测定。4.8沙门氏菌检验按GB 4789.4进行测定。4.9埃希氏菌检验按GB 4789.5进行测定.5检验规则5.1产品应经生产厂质量检验部门检验合格，并附
10、上合格证后方可包装入库或出厂.5.2生产厂以同一罐次生产的且经包装出厂的、具有同样工艺条件、同一产品名称、批号、规格和同样质量证明书的产品为.二批*5. 3龟样方法成品理化指标分析和微生物指标分析分别采用两种不同的取样方法。5.3.1成品理化指标分析取样从发酵罐中取样，取样前启动搅拌装置，搅拌液体酶至少12h，用温水清洗取样阀，从罐中放出酶液100 mL以冲洗取样阀，再放出酶液80 ML于玻璃瓶中，放入冰箱以备理化检验用。5.3.2成品微生物指标分析取样从发酵罐中取样，取样前启动搅拌装置，搅拌液体酶至少4h，用温水清洗取样阀，然后用碘液清洗取样阀，从罐中放出酶液100 mL以冲洗掉取样阀的碘液
11、，再放出酶液80 ml于无菌玻璃瓶中，放入冰箱以备作微生物检验用。5.4产品酶活力、pH.微生物指标为必检项目。砷、铅和重金属为型式检验项目，半年检查一次。如果检验中有一项指标不符合标准要求，应加倍取样，对不合格项目进行复验，如仍不合格，则该批产品判为不合格。5.5当供需双方对产品质量发生异议需要仲裁时.仲裁机构由双方协商选定。仲裁时应按本标准规定的检验方法进行仲裁分析。6标志、包装、运输、贮存6.1标志产品包装上应贴有牢固的标志，标明生产厂名称、厂址、产品名称、商标、产品型号、批号、生产日期、保质期、产品的主要参数、净含量及采用的产品标准号，并标有“食品添加剂”字样。箱内应附有产品合格证.6.2包装6.2.1内包装为20L聚乙烯桶。6.2.2外包装为纸箱或200 L内涂铁桶两种包装形式。6.3运输运输过程中应轻装轻卸，不得与有毒、有害和易污染物品混装混运，严防雨淋、曝晒。6，4贮存产品应存放在阴凉干燥的15C-25室内，避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品QB 2526-2001一起存放。6.5保质期在符合规定的贮运条件和包装完整、未开启封口的情况下，保质期为3个月。超过保质期，酶活力可能降低，但仍可使用，使用量应相应增加。
