1、GBT 12729.1391 本标准等效采用国际标准ISO 12081982香辛料和调味品污物的测定。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了香辛料和调味品中污物的测定方法。 本标准适用于香辛料和调味品中污物的测定。 2 引用标准 GBT 12729.2 香辛料和调味品 取样方法 3 定义 污物：在本标准所规定条件下，从制品中分离出来的无机杂质（砂、土）和动物性污物（昆虫碎片、啮齿动物的毛发和排泄物）。 4 原理 用三氯甲烷（5.1）洗样品（必要时，先用石油醚抽提），检查洗液中是否有重污物和砂、土。用水洗样品（用或不用胰酶处理），而后加入石油醚搅拌，将集聚在两层液体之间界面处的轻污物转移到滤纸上
2、，用显微镜检查是否有动物性污物。 5 试剂 5.1 三氯甲烷（GB 682）：制备三氯甲烷-四氯化碳（GB 688）混合液（见8.3）。 5.2 胰酶溶液 使用符合附录A要求的胰酶，其冷藏温度为10。胰酶溶液如下配制： 将10g胰酶加入100mL温度不超过40的温水中混合，机械搅拌10min或在间歇搅拌下放置30min。在直径100125mm的60漏斗中松散地垫一块100mm厚的脱脂棉，将此溶液倒在上面重复过滤。如果过滤速度很慢，用布氏漏斗，通过快速滤纸抽滤。如果过滤速度仍然很慢，必要时重复过滤直至溶液迅速通过滤纸。（可溶性胰酶可直接通过滤纸抽滤）。每10g稀释滤液100mL。 5.3 磷酸三
3、钠（HG 31292）：50gL溶液。 5.4 甲醛溶液（GB 685）。 5.5 石油醚（HG 31003）：沸程3060。 5.6 石油醚（HG 31003）：沸程6090。 6 仪器 6.1 实验室常用仪器； 6.2 收集烧瓶：是一个1000mL的锥形瓶，内插一根金属棒，棒的下端装有橡皮塞。金属棒直径5mm，比瓶口高约100mm，棒的下端有螺纹，装上螺母和垫圈使橡皮塞固定在棒上。金属棒底端装有橡皮头以防打破烧瓶底部（见下图）； 页码，1/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm 6.3 烧杯
4、：500mL； 6.4 布氏漏斗：直径15cm（用滤纸）； 6.5 布氏漏斗：直径7cm，用划有间距5mm平行线的滤纸； 6.6 定量滤纸； 6.7 瓷坩埚； 6.8 烘箱：控温80； 6.9 烘箱：控温103； 6.10 培养皿：直径80mm； 6.11 放大镜或显微镜； 6.12 分析天平。 页码，2/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm7 取样 按GBT 12729.2方法取样。 8 操作程序 若需要除去挥发油或脂肪，按（8.2）所述进行操作；否则直接按（8.3）所述进行操作。 8.1
5、试样 8.1.1 块状试样 称取250.1g的小块样品于烧杯（6.3）中。 8.1.2 粉状试样 称取250.1g样品于烧杯（6.3）中。 8.2 预先除去挥发油和脂肪 向装有实验样品的烧杯中加入200mL石油醚（5.5）。在水浴中缓慢煮沸15min。小心倾去石油醚，以免损失实验样品。 8.3 重污物的分离 将400mL三氯甲烷（5.1）加入试样（8.1）或（8.2）操作后的残留物中。放置1h，不时搅拌。然后转移到布氏漏斗（6.4）中，重残留物砂和土留在烧杯里，将漂浮于三氯甲烷液面的香辛料及三氯甲烷转移到布氏漏斗中，只剩重残留物于烧杯底部。有较多的香辛料组织留在烧杯底部时，连续加数份与四氯化碳
6、混合的三氯甲烷，逐渐增加溶液的比重，直至所有香辛料组织转移到布氏漏斗中。将重残留物从烧杯中移到定量滤纸（6.6）上水洗除去香辛料中的氯化钠。残留物量较大时，将滤纸放在已称恒重的坩埚（6.7）中，灼烧后称量重污物。 8.4 布氏漏斗上残留物的处理 在80烘箱（6.8）中烘干布氏漏斗中的残留物（见8.3）1h。 8.4.1 不进行酶处理的操作程序 将残留物移入收集烧瓶（6.2），加150mL水，加热至沸，在搅拌下缓慢煮沸15min。用水洗烧瓶内壁 并冷却至20以下，用水稀释至600mL。 8.4.2 进行酶处理的操作程序 将烘干的残留物移入烧杯（6.3），加300mL水，搅匀。加50mL胰酶溶液（
7、5.2）混合。用磷酸三钠 （5.8）调至pH8。15min后，45min后分别再次调整pH。加5滴甲醛溶液（5.4），于3740中消化过夜。冷却后移入收集烧瓶（6.2），加水至600mL。 8.5 轻污物的分离 注： 为了从香辛料组织中更好地分离出轻污物，需要除去大部分挥发油和脂肪，和（或）用胰酶处理试样消化淀粉和蛋白质。页码，3/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm8.5.1 降下收集烧瓶的搅棒，加25mL石油醚（5.6），快速振摇1min，放置约5min，然后将水充入烧瓶至液面升至烧瓶颈内
8、，放置30min，每5min搅拌一次。 8.5.2 旋转橡皮塞除去其上的沉积，将塞子升到烧瓶颈内，一定要使石油醚和水的界面位于塞子以上至少1cm处。安置好塞子，将塞子上收集的液体移入布氏漏斗（6.5），过滤。 8.5.3 向收集烧瓶的内容物中加15mL石油醚（5.6）。15min后重复（8.5.2）中所述操作。如果第二次萃取液中的污物量较多，从烧瓶中倾倒出大部分液体，再加入15mL石油醚（5.6）进行第三次萃取。 8.6 轻污物的显微镜检查 从布氏漏斗上取下载有轻污物的滤纸，放在培养皿（6.10）上，将培养皿放在103烘箱（6.9）中烘30 min。烘干的滤纸应紧紧地贴在培养皿底部。 在反射光
9、下，用放大镜或显微镜（6.11）检查滤纸整个面积，用解剖针划下检查。 第一次从左到右，从上到下检查，第二次从下到上，第三次从上到下等等。 9 结果表述 9.1 重污物（见8.3） 记录存在的无机杂质。以质量百分率表示。 计算公式： 9.2 轻污物（见8.6） 记录来源于动物的污物。 分别记录每25g样品中轻污物的种类和数目。 附 录 A 胰酶的规格 （补充件） A1 概述 胰酶主要含有胰酶、胰蛋白酶和胰脂酶（取自猪或牛的胰腺）。胰酶可将不低于25倍其质量的NF1）马铃薯淀粉标准品转化为可溶性糖类，将不低于25倍其质量的酪蛋白转化为。消化力较强的胰酶与乳糖，或与含淀粉不超过3.25的蔗糖，或与消
10、化力较低的胰酶混合可式中： X 重污物含量，；m 试样的质量，g；m1重污物（8.3）质量，g。页码，4/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm使其达到此标准。 注：1）NF：NATIONAL FORMULARY（of U.S.A）。 A2 特性 胰酶是一种奶油色非晶体状粉末，具有轻微的特殊气味，但不是臭气。胰酶可将蛋白质转化为和其衍生物，将淀粉转化为糊精和糖类。在中性或弱碱性介质中活性最大；超过微量的无机酸类或大量的碱性氢氧化物可使其变成惰性。过量的碱性碳酸盐可抑制其活性。 A3 测定脂肪消化
11、力 将2g胰酶加入容量为50mL的烧瓶中，加20mL乙醚，加塞，放置1h，不时旋转混合。用导棒将上层乙醚倾倒入直径为7cm用乙醚预先浸湿的滤纸上，将滤液收集到已称恒重的烧瓶中。向烧瓶内的残留物中再加10mL乙醚，如前操作，然后加第三份10mL乙醚，将乙醚和其余的胰酶转移到滤纸上，使乙醚自然挥发干，在105中烘干残留物2h。称重脂肪残留物不得超过6mg（3.0)。 也可用索氏连续萃取器测定脂肪。 A4 测定淀粉消化力 准确称取500mgNF马铃薯淀粉标准品，于120中烘干4h，测定其水分百分率，取足量水煮沸10min，冷却至室温，作为稀释用水。 称取相当于375g干标准品的马铃薯淀粉标准品，加入
12、10mL水混匀。将此混合物加入到5575mL水（装在已称恒重的250mL烧杯）中。 用10mL水将残留下的淀粉冲洗入烧杯。将此混合物加热至沸，在不断搅拌下缓慢煮沸5min，加足 量水使此混合物达到100g。 冷却至40后，将烧杯放在40水浴中。向250mL烧杯中加入5mL水和150mg 样品，形成悬浮液，而后将其加到淀粉浆糊中。将混合物从一个烧杯倾倒入另一个烧杯30s混匀。此混 合物在40中准确保温5min。搅拌。立即将此混合物0.1mL加到预先配制的溶液232560mL水中含 0.2mL（12I2）0.1 molL碘溶液中，不出现藏色或紫色。 A5 测定蛋白消化力 将100mg酪蛋白粉末加入
13、50mL容量瓶，加30mL水，振摇使其形成悬浮液。加0.1mL（NaOH）0.1molL氢氧化钠溶液，在40中加热使酪蛋白完全溶解，时间不得超过3min。冷却后加水稀释至50mL。将100mg测定酪蛋白消化力的NF胰酶标准品溶于另一500mL水中。将1mL冰乙酸分别与9mL水、10mL乙醇混和，2个试管中各加5mL酪蛋白溶液。于一个试管中加入2mL胰酶溶液，于另一试管中加入2mL标准品溶液。各管中加入3mL水，轻轻搅拌混匀。立即将两个试管浸入40水浴中保温1h，然后从水浴中取出试管，各滴加3滴乙酸混合液。 装有胰酶样品溶液试管中的浑浊程度不得超过装标准品溶液试管中的浑浊程度。 A6 包装和贮存 胰酶应保存在密封容器中，温度为10左右，在任何情况下不得超过30。 页码，5/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm 页码，6/6D:huaguangHG18263c2006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbcC12729m0.htm
