1、ICS 65. 150 B 52 遇昌中华人民共和国国家标准方正银Fangzheng crucian carp 2006-09-29发布GB 16874-2006 代替GB/T16874一1997制070117000113 2006-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局也世中国国家标准化管理委员会0(.IJ 前言本标准的第4章为强制性条款，其余为推荐性条款。本标准代替GB/T16874-1997(方正银卸。本标准与GB/T16874-1997相比主要变化如下zGB 16874-2006 一-本标准增加了规范性引用文件一章，保留了GB/T16874-1997中实践证明适用的部分;
2、一删除了GB/T16874-1997中的3.2.2肋骨，对表1、表2和表3中的数据进行了调整和修订;一-GB/T16874一1997中的第4章生化指标改为第6章生化遗传学特性;一一删除了GB/T16874-1997中的6.2染色体检测及附录A和附录C，增加了红细胞核体积的计算公式。本标准的附录A和附录B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位1中国水产科学研究院黑龙江水产研究所。本标准主要起草人:马波、刘明华、石连玉、白庆利、李池陶。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T 16874-19970 I GB
3、16874-2006 方正银制1 范围本标准给出了方正银卸(Carassiusauratus gibelio Bloch)的主要形态构造特征、生长与繁殖、生化遗传学特性、细胞遗传学特性及检测方法。本标准适用于方正银卸的种质检测与鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 17716-1999 青鱼GB/T 18654. 1 养殖鱼类种质检验第1部分z检验规则
4、GB/T 18654. 2 养殖鱼类种质检验第2部分z抽样方法GB/T 18654. 3 养殖鱼类种质检验第3部分z性状测定GB/T 18654. 12 养殖鱼类种质检验第12部分z染色体组型分析3 学名与分类3. 1 学名银饵(Carassiusauratus gbelio Bloch)。3.2 分类位置鲤形目(Cypriniformes)，鲤科(Cyprinida的，鲤亚科(Cyprininae)，倒属(Carassius)。4 主要形态构造特征4. 1 外部形态4. 1. 1 外形体型短，体侧扁而高，头小吻钝，口端位，下唇厚，唇后沟仅限于口角。无须。眼小，位于头侧上方。背鳝具有硬刺，外缘
5、平直，后缘锯齿粗，排列稀。胸鳝不达腹鳝。尾鳝分叉浅，上下叶末端尖。鱼体背部、背鳝和臀鳝为黑灰色，体侧深银白色，体侧每个鳞片的边缘颜色稍深。方正银卸的外部形态见图1。固1方正银蝴外形圈GB 16874-2006 4. 1.2 可数性状4. 1. 2. 1 背鳝鳝式:D.皿凹1618.分枝鳝条多数为1704. 1. 2. 2 臀鳝鳝式:A.m-5。4. 1.2.3 左侧第一鲤号外侧蝇把数:4754。6 4.1.2.4 侧线鳞鳞式:29一31.侧线鳞多数为3031。6-V 4. 1. 3 可量性状不同体长组个体可量性状变动值见表10表1不同体长组方正银蝴可量的比例性状项目全长/mm体长/mm体长/体
6、高体长/头长体长/尾柄长体长/尾柄离头长/吻长头长/眼径头长/眼间距4.2 内部构造4.2. 1醺1 42.0-80.。33.0-66.5 2.48土0.123.05土0.256.72土0.525.92土0.403.29士0.383.39土0.272.35土O.19 蝶分两室，后室长为前室长的1.5倍。4.2.2 下咽齿下咽齿一行。齿式为4/404.2.3 脊椎骨脊椎骨总数30-31。4.2.4 腹膜腹膜为灰黑色或黑色。4.2.5 肝脏肝脏肥大、柔软，褐红色，几乎覆盖整个消化道。4.2.6 红细胞组别2 93.1-118.。72.0-89.5 2.63土0.053.49土0.118.39土0.
7、446.14土0.213.28土0.283.93土0.442.31土0.07体长为95mm-142 mm的健康鱼的红细胞核体积为(45.76士3.54)m3。5 生长与繁殖5. 1 生长不同年龄组鱼的实测体长和体重见表2。2 3 190.0-215.。16 1. 0-188.。2.67土0.063. 73土O.10 8.55土O.19 6.17土0.083.26士0.054. 72土0.062. 17 :l: 0.04 表2不同年龄组鱼的体长和体重实测值年龄/龄项目1 2 3 体长/mm921l3 138159 168213. 6 体重/g3059 97159 185275 a 依据鳞片上的年
8、轮数。5.2 繁殖5.2.1 成熟年龄:雌鱼2龄3龄，雄鱼2龄。5.2.2 雌、雄比为9门，行天然雌核发育。5. 2.3 性成熟个体性腺每年成熟一次，分批产卵，具秸性卵。5. 2.4 繁殖水温:14.C 25.C。最适水温:18.C 22.C。5.2.5 怀卵量:不同年龄组鱼的怀卵量见表3.表3不同年龄组个体的怀卵量年龄/龄项目2 3 体重/g97159 185275 绝对怀卵量/粒12.7 X 10 24. 0 X 10 22.4 X 10 45. 3 X 10 相对怀卵量b/C粒/g)101151 a 指卵巢中达到4时相卵母细胞的数量。b 指每克体重所含卵粒数。6 生化遗传学特性肝脏醋酶(
9、EST)有3条谱带，见图2.、，翩翩翩翩阳，陶翩翩翩崎嗣+ 121165 棚翩鹏麟唰翩盼自Est-l Est-2 Est-3 圈2方正银细肝脏醋酶(EST)电泳圈i曾7 细胞遗传学特性7. 1 体细胞染色体数:3n约为150。核型公式:3n=42m+74 sm+40 st。染色体臂数(NF)=272。方正银饵染色体组型见图3。GB 16874-2006 4 176235 180475 4 270475 48. 9X1065.1X10 137185 3 GB 16874-2006 革辈，辈辈革.篝霉事莫董事蠢事咱基t巍事矗事-.，.篝霉篝事藻，.油鑫羹矗暴川棋呆患重重蠢事靠董事事AiSH莓然A
10、It A.垂革矗矗事篝壁AA.，鑫在矗巢AA矗A 1. .,. 矗矗震局矗巍朵鑫起晶.毒蠢A穗篷战鑫.桑量响.显.，.羹费精睛.4董事暴露噩撞，怪矗，14峰命巍巍毒.楠.队.毒.5m 圈3万正银酶的染色体组型7.2 脱氧核糖核酸(DNA)含量:体长为147mm177 mm的健康鱼的红细胞DNA含量为(7. 69:1: 0. 32)pg(与鸡血对照)。8 检测方法8. 1 抽样按GB/T18654. 2的规定执行。8. 2 性状测定按GB/T18654. 3的规定执行。8. 3 红细胞大小测定8. 3. 1 血涂片制备从尾动(静)脉采血0.5mL，生理盐水(0.7%NaCl)稀释制成血涂片。血涂
11、片空气干燥后，用卡诺氏液(甲醇与冰乙酸之比为3: 1)固定1h，然后用吉姆萨(Giemsa)液染色。Giemsa液的配制按GB/ T 18654. 12的规定。8.3.2 红细胞长径和短径的测量在光学显微镜下用测微尺在10X 100油镜下，每尾鱼血涂片测量10个红细胞的长径和短径。8. 3. 3 红细胞核体积的计算4 红细胞核体积按式(1)计算:V=?讪(1 ) 式中:V一一细胞核体积，单位为立方微米(旷); G一一短半径，单位为微米(m);b一一长半径，单位为微米(m)。8.4 脱氧核糖核酸(DNA)含量测定8. 4.1 血涂片制片GB 16874-2006 从尾动(静)脉采血0.5mL，生
12、理盐水(0.7%NaCl)稀释制成血涂片。血涂片空气干燥后，用卡诺氏液固定1h，然后将血涂片移出存放于40C冰箱中或者直接染色;同时采小公鸡血，用相同方法制片作对照。8.4. 2 染色血涂片经浓度为3.5mol/L的盐酸水解30min(280C)，蒸馆水冲洗，放入希夫(Schiff)试剂(其配方见附录A)，于280C暗处染色1h，立即用二氧化硫水洗3次5次，每次2min10 min，在经梯度酒精70%、80%、90%、95%、100%脱水，二甲非、8.4.3 DNA含量测定用显微分光光度计测量，波长洲60nm , 8.5 生化遗传分析8.5.1 样品制备取活体健康鱼(体长40C条件下离心(15
13、000 8.5.2 电泳方法及气使用水平平板恒值为7.0。从冰箱一次。电泳经过:预怪b.) 后正式电泳(恒压91H的按GB/T1865且128. 7 年龄鉴定min)，前电泳5 GB 16874-2006 附录A(规范性附录)希夫(Schiff)试剂的配置将0.5g碱性品红溶于100mL热蒸铺水中，使之充分溶解，待榕液冷却至50.C时过滤，再冷却到25C时加入1mol/L盐酸(HCl)10mL和1g亚硫酸铀(NaHS03)或1.5g偏重亚硫酸铀(Na2Sz05). 放置暗处，静止24h后，加0.25g-O. 5 g活性炭摇荡1min.过滤，溶液呈无色，装入棕色瓶中塞紧瓶塞，保存在冰箱内(0C-
14、4C).用前预先取出，使之恢复至室温后再用。如溶液呈粉红色就不能使用，须重配。6 -乙酸菜醋坚牢蓝B盐附录B(规范性附录)醋酶染色班配方三是甲基氨基甲烧-拧攘酸缓冲液(1mol/L ,pH7. 0) 蒸锢水GB 16874-2006 40 mg 100 mg 15 mL 135 mL CON-寸hF阁。国华人民共和国家标准方正银细由GB 16874-2006 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045导网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤印张O.75 字数14千字2006年12月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2006年12月第一版* 定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066. 1-28574 GB 16874-2006
