1、GB/T 17221-1998 前言本标准从环境医学观点规定了环境铺污染所致健康危害区的判定原则、观察对象、健康危害指标及其联合反应率的判定值。本标准从1998年10月1日起实施。本标准的附录A、附录B、附录C、附录D都是标准的附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准由中国预防医学科学院环境卫生与卫生工程研究所负责起草，中国预防医学科学院环境卫生监测所、辽宁省卫生防疫站、中国医科大学、浙江省医学科学院参加起草。本标准主要起草人:蔡诗文、岳麟、袁一傲、徐兆发、孔庆湖。本标准由卫生部委托中国预防医学科学院环挠卫生监测所负责解释。547 中华人民共和国国家标准环境铺污染健康危害区判定标准GB/
2、T 17221-1998 Discriminant standard f or heal th hazard area caused by environmental cadmium poll ution 1 范围本标准规定了环境锅污染健康危害区的判定原则、观察对象、健康危害指标及其联合反应率的判定值。本标准适用于环境受到含销工业废弃物污染并以食物链为主要接触途径而可能导致铺对当地一定数量的定居入群产生靶器官肾脏慢性损害的污染危害区。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最
3、新版本的可能性。GB 5084-92 农田灌溉水质标准GB 5749-85 生活饮用水卫生标准GB 7803-87 职业性销中毒诊断标准及处理原则GB 15201-94 食品中锅限量卫生标准3定义本标准采用下列定义。3. 1 判定标准discriminant standard 从环境医学观点判定环墟某污染因子是否已构成当地定居人群某种健康危害的准则。3. 2 联合反应率coprevalence rate 指数项健康危害指标均达到判定值而且同时出现在同一受检者的例数与受检总人数之百分比。4 判定原则根据锅污染区现场的环境医学调查资料，以当地接触锅的定居人群铺负荷量增加为先决条件，排除职业性铺接触
4、，结合靶器官肾脏重吸收功能和肾小管细胞损害的健康危害指标及其达到判定值的联合反应率水平，作出该污染区锅是否已构成当地人群慢性锅危害早期的判定。5 观察对象5. 1 地区有明显的工业铺污染源和环境长期受到含锅工业废弃物的污染，当地饮用水、灌溉水和自产粮食、蔬菜等食品含铺量或单项或多项超过GB5749、GB5084、GB15201所规定的含铺限量的地区。5. 2 人群国家技术监督局1998-01-21批准1998-10-01实施548 GB/T 17221-1998 5. 2. 1 接触状态有一个长期接触的过程，时间的长短视环境锅污染的轻重程度和单位时间内的接触量而定。生活在环境锚污染区内的观察人
5、群必须是长期居住在污染区并食用当地自产的粮食、蔬菜等主要食品的非流动居民。5.2.2 接触量:当地居民平均每日锅摄人量达到U300go 铺摄入量的计算，通过空气、饮用水和主、副食含锅量的测定以及主、副食消费量的调查取得。必须按吸入空气15m3/d、饮水2L/d、主食和国I食不同品种的各自实际消费量比例计算其加权摄入量.铜摄入量的膳食调查抽样应不少于50户，必须采用称重法。5.2.3 人群抽样2年龄2554岁的长期定居居民，划分为2534、3544、4554岁三个年龄组，每组随机抽样人数相等，男女性别各半作为观察人群。为减少抽样误差，每年龄-性别组抽样不少于70名。抽样总人数不少于420名。6
6、判定标准判定标准见表10表1健康危害指标及其联合反应率的判定值健康危害指标判定值联合反应率尿俑原民徽球蛋白尿NAG酶判定值昭他肌面昭他肌酣U/g肌哥% 15 1 000 17 10 注1尿铺的测定方法见附最A.2尿，微球蛋白的测定方法见附录B.3尿NAG酶的测定方法见附录c.4尿肌酶的测定方法见附录D.l) NAG酶zN乙酷件D氨基葡萄糖昔酶6. 1 个体健康危害三项健康危害指标同时达到判定值的受检者，应确认为锚污染所致慢性早期健康危害的个体，并列为追踪观察对象。6.2 群体健康危害三项健康危害指标同时达到判定值的一群受检者例数占受检总人数的联合反应率达到判定值的，应确认该污染区俑已构成对当地
7、定居人群的慢性早期健康危害。549 GB/T 17221-1998 附录A(标准的附录)尿铺的原子吸收分光光度测定法A1 原理同GB7803-87中附录A尿锚的火焰原子吸收分光光度测定法和附录B尿铺的无焰原子吸收分光光度测定法。A2仪器同GB7803-87附录A中A2和附录B中B20A3 试剂同GB7803-87附录A中A3和附录B中B30A4 操作步骤同GB780387附录A中A4和附录B中B40A5 标准曲线的绘制同GB780387附录A中A5和附录B中B50A6 尿样采集与保存尿液直接收集于广口瓶中。可采集第一天晚间至第二天早晨的12h尿样，亦可采集晨尿。样品如不能及时进行分析应低温保存
8、。A7 分析质量保证A7.1 分析用材料前处理z分析前所有用具及器皿包括采集尿样器皿)均用1 1硝酸溶液(HNO，)浸泡，用去离子水清洗干净。A7.2 分析中的质量控制:在分析每批样品时，同时分析控制样或质控盲样，根据质控样的分析结果来判断被分析样的分析结果的可靠程度。A8 结果表示测定的结果，尿铺含量为严g/L为避免排尿容积的影响，更确切地反应实际排出水平，应将含量的计量单位改尿容积为尿肌酶，结果表示为何/g肌商。附录B(标准的附录)尿，徽球蛋白的放射免II测定法B1 原理自2微球蛋白抗体能特异地与检样中的，徽球蛋白结合，如同时加入1251标记的，微球蛋臼，则竞争550 G8/T 17221
9、一1998与抗体结合，通过检查结合的放射量与游离的放射量之比，可以求出样品中，微球蛋白的含量。82 仪器山I放免测定仪。83 测定盒的组份83.1 2-MG标准，0，10，20，50，100，200，500ng/mL 0 83.2 ，-MG抗体。B3. 3 I-,-MG 0 83.4 高浓度缓冲液。83.5 PEG溶液。试剂的配制按每个批号的说明书中所规定的加入量稀释成工作液。84 尿样采集和保存晨尿弃去，让受试者喝500mL水.lh后排尿于广口瓶中，尿样用。.lmol/L氢氧化锁溶液调节至6. 07. 50 4C保存不超过一周，-20C保存不超过个月。85 测定步85.1 尿样稀释2取尿液2
10、00L，1Jn稀释的缓冲液。.8mL。85.2 加样s于5mL平底塑料试管中按表B1顺序加样。表Bl各测定管加样顺序测定曹标准品样品1251_岛-MG标记物100 标准100 100 样品100 100 1)供了解标记物现有的放射量.抗体混匀，37 C 200 温育200 3h 加完PEG后，充分摇匀，离心(3500r/min)20min，吸去上清液，计数沉淀物的放射量。单位:LPEG 200 200 的3样品放射量的计数:于l25放免测量仪双管两次均数、30s档处计数沉淀物的放射量(每分钟次数).同时测量仪器本底读数，按式(Bl)求出各管的结合百分数z式中，B/Bo-结合百分数%; F 仪器
11、本底读数值，5-F CB/Bo(%)J= ;:一X100 . . . . . . . (B1) 5,-F S一沉淀物的放射量计数值$50一标准系列中Ong/mL的放射量计数值pB 5-F, Bo S，-F。86计算以标准系列。，10，20，50，100，200，500ng/mL各点的放射量计数值为对数横坐标，以各标准点结合百分数CB/B，(%)J为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线找出样品综合百分数相应的，微球蛋白浓度，乘以样品之稀释倍数即可换算成用/Lo为避免排尿容积的影响，更确切地反映实际排出水平，应将含量55l GB/T 172211998 的计量单位改尿容积为尿肌酶，结果表示为Ig/g肌哥
12、。附录C(标准的附录)尿N-Z酷-3-D-氨基葡萄糖苦酶的分光光度测定法Cl 原理以对硝基盼N乙酷D氨基葡萄糖(PNP-NAG)作为酶的基质，反应产生对硝基盼，进行比色测定。C2 仪器C2.1 紫外分光光度计或721型分光光度计。C2.2 恒温水浴锅。C3试llIJc3.1 拧橡酸缓冲液(0.05mollL. pH4. 6) :称取拧橡酸(C，H， H，O)5.旬，拧橡酸三纳(Na，C，H，O， 2H，)1饵，用蒸馆水溶解后稀释到1OOOmL. c3.2 PNP-NAG基质液(0.0ImollL):称取PNP-NAG342.3mg.用pH4.6拧橡酸缓冲液溶解.稀释至100mL.放人棕色试剂瓶
13、中.4C保存不超过一周。配制过程中不可加热，可用磁力搅拌器促溶。C3. 3 跚酸缓冲液(0.05mollL.pH9. 8):称取四葡酸销(Na，B，O， H,O) 4. 7毡，用适量蒸馆水溶解后，加入0.2mollL氮氧化纳溶液170mL.用蒸馆水稀释至1OOOmL. C3. 4 对硝基酌标准溶液(3.Ommol/L):精确称取对硝基盼(A.R. )41. 7mg.用蒸馆水溶解后，定容至1mL.混匀.4C保存备用。C4 尿样采集与保存采集一次性中段尿于广口瓶中.4C保存不超过24h.-20C保存不超过一个月。C5 测定步骤测定步骤见表Cl.表Cl尿液NAG活性测定步骤单位-mL测定臂对照管0.
14、2 0.2 尿液37C*播平衡3min1. 0 预温基质液37C在路30min棚酸缓冲液(pH9.8)4. 0 4.0 预温基质液1. 0 在波长400nm、光径lcm条件下，以蒸馆水为空白，分别读取测定管和对照管的吸光度值。使用721分光光度计测定时，标准幽线在吸光度。.6以上呈非线性，因此当尿酶活性较高肘，应稀552 释或减少样品量后再测定。C6标准曲钱操作标准曲线操作见表C20试管编号对硝基酷标准掖蒸惰水对应酶活性单位.U/L。5.0 。GB/T 17221-1998 表C2标准系列的配制l 2 O. 5 1. 0 4. 5 4.0 10 20 单位:mL3 4 5 1. 5 2.0 2
15、.5 3. 5 3. 0 2. 5 30 40 50 按上表操作后，将各管混匀，各取0.2mL于另一组试管中，加pH4.6拧橡酸缓冲液1.OmL，混匀，再加入pH9.8棚酸缓冲液4.0mL，混匀后比色。测定条件同样品，以光密度对应酶活性单位绘制标准曲线。C7 计算从标准曲线找出样品相应的酶活性单位，结果表示为U/L.单位定义s每升尿样中NAG在37C水解基质PNP-NAG每分钟生成1mol对硝基盼为1单位。为避免排尿容积的影响，更确切地反映实际排出水平，应将含量的计量单位改尿容积为尿肌哥，结果表示为U/g肌哥。附录D(标准的附录)尿肌哥的碱性苦味踵测定法D1 原理尿波中的肌I!f与碱性苦味酸盐
16、作用，生成黄红色的苦味酸肌黯复合物。D2 仪器721型分光光度计。D3试剂D3. 1 O. 04mol!L苦味酸溶液s称取苦味酸(分析纯)约9.栓，溶于80C蒸馆水500mL中，冷却至室温，加蒸馆水至lL.用O.lmol/L氢氧化销滴定，以酷歌作指示剂。根据滴定结果用蒸馆水稀释至0.04mol/L，储存于棕色瓶内。D3. 2 O. 75mol/L氢氧化销z称取氢氧化销(分析纯)3饨，加蒸馆水使溶解，冷却后用蒸馆水稀释至lL.D3.3 肌酶储存标准液(lmg/mL):精确称取肌I!f(A.R. )0. 100g，以少量。.lmol/L盐酸浴解，并转移入lOOmL容量瓶内，再以O.lmol/L盐酸
17、稀释至刻度，保存于冰箱。D3. 4 肌西干应用标准液(0.02mg/mL):准确吸取肌酶储存标准液2.0mL，加入100mL容量瓶内，以蒸馆水稀释至刻度，加三氯甲统数滴防腐。D4 操作尿液用蒸饱水作1: 400稀释。然后按表Dl进行操作。553 GB/T 17221-1998 表Dl肌厨测定操作步骤单位:mL空白管标准管滴定曹蒸馆*4.0 3. 5 2. 0 肌西干应用标准液O. 5 稀辑尿液2.0 O.04mol苦味酸溶液1. 0 1. 0 1. 0 O.75mol/L氢氧化铺1. 0 1. 0 1. 0 混合后放置15min，用520nm进行比色，以空白管校正吸光度到0点，读取各管吸光度读数。D5计算; . ._. 100 C去X0.01 X一一一J;, . - -. O. 005 式中:C 100mL尿液中肌酶的浓度，mg/IOOmL尿液;E。一一标准管吸光度gE一一测定管吸光度。、FD6 用途(01) 用于尿锅、尿，微球蛋白、尿NAG酶的含量校正成每克肌厨为基准时的含量。必须与各被检指标的尿样分析同步测定。554
