1、ICS 65.150 B 51 道B中华人民共和国国家标准GB 20552-2006 太平洋牡颇Pacific oyster -EE- 1 E E- , . Ea- , 由町剧川剧刷刷刷刷刷nnu们川川川川川川川川HUB-., Enu 配UUUUUUUnuMMMMMM回呻啤nut-t配们。HMMMM明7-E唱，EA-EEEE-yi m咱啤E白EEEtnutuuuUH7 IItttInu-. , . EI-EE- EEE-, EE-Et -EE- 2006-09-29发布2006-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局也舍中国国家标准化管理委员会, p 中华人民共和国国家标准太平洋
2、牡蜻GB 20552-2006 * 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 开本880X 1230 1/16 印张0.5字数8千字2006年12月第一版2006年12月第一次印刷晤书号:155066 1-28575 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533前言本标准的第4章、第6章为强制性条款，其余为推荐性条款。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单
3、位z山东省海水养殖研究所、中国海洋大学、蓬莱市水产研究所。本标准主要起草人z王远隆、喻子牛、邱兆星、李美真、王建伟、张豫、于波。GB 20552-2006 I GB 20552-2006 太平洋牡航1 范围本标准给出了太平洋牡蜘Crassostreagigas CThunberg) 的名称与分类、主要形态构造特征、生长与繁殖、细胞遗传学特性、生化遗传学特征及检测方法。本标准适用于太平洋牡蜘种质监测和鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研
4、究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/ T 18654. 12-2002 养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析3 名称与分类3. 1 学名太平洋牡蜘Crassostreagigas CThunberg) 。3.2 分类位置瓣鲍、纲CLamellibranchia)，珍珠贝目CPterioida)，牡蜘科COstridae) ，巨蜘属(Crassostrea)。4 主要形态构造特征4. 1 外部形态特征4. 1. 1 外形贝壳长形，壳较薄。左壳固着，较大，深陷，鳞片粗大。右壳较平，鳞片环生，呈波纹状，排列稀疏，放射肋不明显。壳面通常呈灰褐色。
5、太平洋壮蜘外形见图1。4.1.2 可量性状4. 1. 2. 1 壳长为壳高的2倍3倍。4. 1. 2. 2 左亮较右亮大。圄1太平洋牡蜻外形4.1.2.3 在壳长5.15 cm12. 42 cm、壳高2.25 cm4. 34 cm、体重13.50 g 110.64 g条件下，壳高GB 20552-2006 壳长关系式见式(1)，相关系数r为0.9488。式中zH一一壳高，单位为厘米(cm); L一一壳长，单位为厘米(cm)。H = O. 662 0 + O. 337 5L 体重壳长关系式见式(2)，相关系数r为O.953 9。式中:W一一体重，单位为克(g); L-一一壳长，单位为厘米(4.2
6、 内部构造特征4.2. 1 外套膜边缘呈4.2.2 熄，左右各一月45 生长与繁殖5. 1 生长养殖太平洋项5.2 繁殖5.2.1 性成熟性成熟年龄5.2.2 性别雌雄异体，在一5.2.3 产卵量，产卵量一般为数千5.2.4 生殖方式卵生型。6 细胞遗传学特性6. 1 染色体数体细胞染色体2倍数:2n=20。6.2 核型2 核型公式:2=20mo 染色体总臂数(NF)=40。染色体核型见图2。W = 2. 769 leo. 337 8L . ( 1 ) . ( 2 ) 3 4 123-170 164-201 GB 20552-2006 飞在、(ll.f AA 巳以-:x 2 3 4 5 队干a
7、pr ;r 甲J叫、, A X, 6 7 8 9 10 L_j 5m 固2染色体核形7 生化遗传学特征7. 1 同工酶电泳固i蕾太平洋牡蜘异拧攘酸脱氢酶(lDH)、磷酸葡萄糖异构酶CGPD、超氧化物歧化酶CSOD)三种同工酶电泳图谱见图3。7.2 群体变异量曾吨83F寺. 些生a) IDH电泳图谱(多态)b) GPI电泳图谱(多态.哼解费费I.f梆-、飞川呵!锵睛也汁棋喽I仁飞剧变i斗的叫弘主，。SOD电泳图谱(单态)固3同工酶电泳固谱多态位点比例CP)为45.6%。平均杂合度观察值CHo)为0.196土0.034;平均杂合度期望值CH.)为0.257土0.041;平均有效等位基因数CN.)为
8、1.416 :i: 0. 1030 8 检测方法8. 1 染色体和核型检测8. 1. 1 染色体标本的制备一一取幼贝鲤组织用O.005%0. 01%秋水仙素处理(15min40 min); 一-鲤、组织用0.075mol氯化饵CKCl)溶液低渗处理(10min30 min); 一一去低渗液，用卡诺氏CCarnoy气)固定液(甲醇比冰乙酸为3: 1)固定(15min20 min); 一-50%乙酸解离(1min5 min); 一一细胞悬液滴片(冰冻或热滴片)制成染色体标本;一一吉姆萨CGiemsa)染色(10min15 min); 一一镜检观察染色体。COON-N白山ON阁。GB 20552-2
9、006 8. 1. 2 核型分析观察80个以上中期分裂相，并计数以确定二倍体染色体数。从中选取10个分散良好、形态清晰的中期分裂相进行显微摄影，并放大测量。按GB/T18654. 12-2002中8.2的规定对染色体进行分类，然后统计处理测量数据，分析染色体特征。8.2 同工酶分析8.2. 1 样晶制备样本活体低温保存带回实验室。活体解剖取消化腺，密封放入超低温冰箱(-760C)或液氮罐中贮存。将部分组织(约0.5g)取出放入玻璃匀浆器中，加入1: l(体积比质量)的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7. 0)，冰水浴中匀浆后，倒入1.5 mL离心管内，40C冰箱中抽提O.5 h1. 0 h，然
10、后在OOC4 oC冷冻离心机中(14000 r/min)离心10min，离心后的上清液作为电泳样品。8.2.2 电泳分析采用水平淀粉凝胶电泳方法，凝胶浓度为12%，电泳缓冲系统为TC7.0，恒流(电流大小为12mA) 电泳12h。电泳过程在40C冰箱中进行。凝胶厚度为6mm，电泳后切成4片5片，分别进行各种酶的染色，染色过程在370C恒温箱中进行。8.2.3 数据处理多态位点比例(P)=(多态位点数/所测位点总数)X100%; 平均杂合度观察值(Ho)=多态位点杂合度观察值之和/观察位点总数;平均杂合度期望值(He)=多态位点杂合度期望值之和/观察位点总数;平均有效等位基因数(Ne)=多态位点有效等位基因数之和/观察位点总数。侵权必究峰书号:155066 1-28575 定价:8.00元版权专有GB 20552-2006
