1、ICS 65.020.30 B 43 DB5107 四 川 省 （ 绵 阳 市 ） 地 方 标 准 DB5107/T 58 2018 养鸡场鸡白痢净化技术规范 2018 - 12 - 18发布 2019 - 03 - 01实施 绵阳市质量技术监督局 发布 DB5107/T 58 2018 I 目 次 前言 . III 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 材料准备 . 2 4.1 器械设备 . 2 4.2 试剂 . 2 4.3 诊断试剂 . 2 5 鸡群净化 . 2 5.1 净化流程 . 2 5.2 初筛 . 3 5.3 操作方法 . 3 5.4 结果判定
2、. 3 5.5 阳性鸡处理 . 3 5.6 确诊 . 3 5.7 污染区处理 . 3 6 卫生防疫 . 3 6.1 选址 . 3 6.2 消毒池 . 3 6.3 生产区入口消毒 . 4 6.4 鸡舍消毒 . 4 6.5 防疫管理 . 4 6.6 注意事项 . 4 7 消毒 . 4 7.1 圈舍消毒 . 4 7.2 种蛋消毒 . 4 7.3 设备器具消毒 . 4 7.4 饮水消毒 . 4 8 净化标准 . 5 8.1 标准 . 5 8.2 抽检 . 5 附录 A（规范性 附录） 鸡白痢沙门氏菌引物序列表 . 5 DB5107/T 58 2018 II 附录 B（资料性附录） 养鸡场鸡白痢净化工作
3、记录 表 . 6 DB5107/T 58 2018 III 前 言 本标准按 GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第 1部份：标准的结构和编写给出的规则起草。 本标准由绵阳市农业局提出并归口。 本标准主要起草单位：绵阳市农业科学研究院 本标准主要起草人员：王育伟、肖龙、李廷见 、张晓晖、周爱民、王强、李波、刘亚东、赖爽、刘 卜玮、王鑫。 DB5107/T 58 2018 1 养鸡场 鸡白痢净化技术规范 1 范围 本标准规定了养鸡场鸡白痢净化的技术术语、技术要求、材料准备、鸡群净化、卫生防疫、消毒和 净化标准的要求。 本标准适用于绵阳市行政辖区内养鸡场鸡群的鸡白痢净化。 2 规范性引用文件
4、 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 2838 禽沙门氏菌病诊断技术 NY 5027 无公害食品畜禽饮用水水质 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鸡白痢 pullorum disease 由鸡白痢沙门氏杆菌引起鸡的一种常见的垂直传播性传染病。 3.2 肉鸡 broiler chicken 是指饲养用来 专门生产鸡肉的鸡。 3.3 蛋鸡 laying hens 是指专门饲养用来生产和供应鸡蛋的鸡。 3.4 种鸡 breeding bird 种鸡
5、是专门用于繁殖生产下一代仔鸡的鸡。 3.5 种蛋 hatching egg DB5107/T 58 2018 2 用以繁殖后代的鸡卵。 3.6 全进全出 all-in and all-out system 将同一生产单元内的所有鸡群同时转 进转出，并对鸡舍进行清洗、消毒的生产模式。 3.7 净道 non-pollution road 运送饲料、雏鸡、种蛋等清洁生产资料和人员进出的道路。 3.8 污道 pollution road 运送粪便、病死及淘汰鸡、养殖废弃物等污染物品的道路。 3.9 净化 eradication 对某病发病地区采取一系列措施，达到消灭和清除传染源的目的。 3.10 焚
6、尸 炉 cremator 是专门用于焚化病死畜禽尸体和污染物品的设备。 4 材料准备 4.1 器械 设备 脚环、微量移液器、采血针、采血管、显微镜、超净台、 PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像系统、水 浴 锅 和 冰箱等。 4.2 试剂 甲醛、高锰酸钾、氢氧化钠、 75%酒精、戊二醛消毒液， MgCl2、季铵盐消毒液。 4.3 诊断试剂 鸡白痢鸡伤寒多价凝集抗原、标准阳性血清、标准阴性血清、 DNA分子量标准品、电泳缓冲液（ TEB）、 taq DNA聚合酶、 PCR引物、 DNA提取试剂盒等。 5 鸡群净化 5.1 净化流程 DB5107/T 58 2018 3 雏鸡最早在 3 15日龄通过腹泻
7、、糊肛等典型白痢症状进行筛查，具备典型症状的雏鸡在焚尸炉内 焚烧处理。 5.2 初筛 5.2.1 在 40 60日龄根据典型症状和血清平板凝集试验进行全群鸡白痢检查。 5.2.2 在 100 120日龄利用血清平板凝集试验进行第二次全群鸡 白痢检查，在 130 150日龄再次进 行普检。 5.2.3 鸡群在检疫有鸡白痢阳性或可疑鸡时，利用 PCR方法进行确诊。 5.2.4 若连续两次检疫均为鸡白痢阴性后，再隔 1个月按全群的 1%抽检一次，抽检时若出现鸡白痢阳 性鸡，则全群普检。 5.2.5 若无阳性，则每半年按鸡群的 1%进行全群抽检。 5.2.6 检出的鸡白痢阳性鸡一律淘汰，病死禽及废弃物
8、品根据 农医发 2017 25号 病死及病害动物 无害化处理技术规范 进行无害化处理，对环境和笼具等进行彻底消毒。 5.3 操作方法 5.3.1 将整群鸡佩戴脚号，用采血管进行翅静脉采血后静置或者离心后获得血清，脚号与采血管条形 码对应 好。 5.3.2 用微量移液器吸取鸡白痢、鸡伤寒多价凝集抗原 0.03 mL，滴在玻璃板上，同时设置阴性、阳 性对照。 5.3.3 以微量移液器吸取 0.03 mL血清滴于抗原上，将其混合涂成直径 2 cm为宜。 5.4 结果判定 在 2 min（室温）内观察凝集情况，抗原与血清的混合物呈花斑状但背景清晰，判定为阳性（ +）； 出现少量的凝集片，背景略清晰，为
9、可疑（ +）；混合物均匀一致，不出现凝集碎片，为阴性（ -）。 5.5 阳性鸡处理 发现血清平板凝集试验阳性鸡 应 立即扑杀，在焚 尸 炉内进行焚烧处理。 5.6 确诊 采集可疑鸡泄殖腔拭子进行鸡白痢沙门氏菌 PCR扩增，方 法符合 NY/T 2838中禽沙门氏菌病诊断技术 要求，引物序列表见附录 A。 5.7 污染区处理 阳性鸡养殖污染区域应及时进行严格消毒，应做重点抽检区域，净化记录表参照附录 B。 6 卫生防疫 6.1 选址 养殖场选址 应当符合 建在 隔离条件好、交通便利、 远离养殖场 和污染源 的 区域 ；布局应当科学合理， 生产区应当 和 生活区、办公区严格分开。 6.2 消毒池
10、DB5107/T 58 2018 4 养 鸡场大门口应设消毒池，定期清洗消毒池并更换消毒液 。 6.3 生产区 入口 消毒 生产区 入口应当设 立 消毒间 、更衣室和淋浴室，更衣室应 配备紫外消毒 ，定期 更换消毒液。 6.4 鸡舍消毒 各鸡舍门口应铺 设消毒 垫，撒布 2%的 碱性戊二醛溶液 ， 孵化厅和 种蛋 室等区域 应设置紫外消毒 灯 。 6.5 防疫管理 严格控制生产区内人员流动，非生产人员不得进入生产区，工作人员进入鸡舍前要经过淋浴、更换 工作服、鞋、帽和紫外线消毒。工作服每周至少洗涤两次以保持清洁，定期对更衣室衣物进行紫外线照 射消毒。各鸡舍所有设备、生产工具及工作服等仅限本舍使
11、用，不得交叉使用。 6.6 注意事项 6.6.1 饮用水质应符合 NY 5027的要求，饮水箱与饮水管应经常清洗，避免鸡白痢沙门氏菌滋生。 6.6.2 禁止使用受鸡白痢 沙门氏菌污染的 饲料及原料。 6.6.3 饲料库房要坚固、干燥和密闭，禁止鼠类、猫和蚊蝇等传播疫病 。 6.6.4 鸡场院内所有空场、道路、门口等区域每周至少用 2%烧碱喷洒消毒一次。 6.6.5 鸡舍必须每天清扫鸡粪，将 其 堆放在远离 养殖场的 固定区域发酵和无害化处理。 6.6.6 场区内净道和污道分开，互不交叉， 污 道 定期进行 消毒。 6.6.7 运输工具和 器具 要定期进行清洗和消毒。 6.6.8 引进的种鸡、种
12、蛋或鸡苗均应来自鸡白痢净化的养鸡场，引入后应全部隔离并建议合格后方可 进入。 6.6.9 养殖场所有出场的养殖废弃物与污水均应当进行严格的无害化处理。 7 消毒 7.1 圈舍消毒 圈舍消毒鸡淘汰后建议先彻底清除圈舍内的粪便，然后用高压清水按“顶棚 墙壁 鸡笼 水食槽 地面”的顺序冲洗干净， 再用 0.2%戊二醛溶液对顶棚、墙壁高密度消毒，水食槽用无腐蚀消毒液擦洗， 地面喷洒 2%的氢氧化钠溶液。圈舍所有物品、笼具安装好后，每立方米按 38%甲醛溶液 42 mL、高锰酸钾 21 g、水 21 mL的比例封闭熏蒸 3 h以上并空圈半月以上，经检测无鸡白痢沙门氏菌后方可进鸡。 7.2 种蛋消毒 种蛋
13、消毒 当天收集的种蛋摆放在熏蒸箱内消毒，每立方米按 38%甲醛溶液 14 mL、高锰酸钾 7 g、水 7 mL 的比例熏蒸 20 min。 7.3 设备器具消毒 孵化箱、笼具、出雏筐、食槽等表面使用 2%戊二醛溶液喷洒消毒，然后每立方米按 38%甲醛溶 液 28 mL、 高锰酸钾 14 g、水 14 mL的比例熏蒸 30 min。 7.4 饮水消毒 DB5107/T 58 2018 5 饮用水应当过滤后使用，可以定期用 0.1%的高锰酸钾溶液消毒，储水池、管道和 水箱 应当经常清洗 消毒。 8 净化标准 8.1 标准 鸡群连续两次（两次间隔不少于 21 d）抽检，鸡白痢阳性率均在 0.1%以下
14、（包括 0.1%），该鸡群为 鸡白痢净化鸡群。 8.2 抽检 鸡群鸡白痢净化是个动态变化过程，达到 净化标准后 应当持续进行净化抽检和卫生 防疫 。 DB5107/T 58 2018 6 附 录 A （规范性附录） 鸡白痢沙门氏菌引物序列 表 表 A.1 鸡白痢沙门氏菌引物序列表 基因 引物名称 引物序列 目的片段大小 Hut hut-F 5 -atgttgtcctgcccctggtaagaga-3 495bp hut-R 5 -actggcgttatcccctttctctgctg-3 glgc SGP-F 5 -cggtgtactgccccgctat-3 252bp SGP-R 5 -ctgggcattgacgcaaa-3 DB5107/T 58 2018 7 附 录 B （ 资料 性附录） 养鸡场 鸡白痢净化 工作 记录 表 表 B.1 养鸡场 鸡白痢净化 工作 记录表 单位名称： 圈号： 品种： 脚号 血清条形码 普检 1 普检 2 普检 2 备注 记录人： _
