1、GB 982288 1 主题内容与适用范围 本标准规定了谷物不溶性膳食纤维测定所用仪器、试剂、分析步骤和结果计算。 本标准适用于谷物不溶性膳食纤维的测定。 2 方法原理 谷物样品经中性洗涤剂溶液浸煮,残渣用热水充分洗涤后,加入 -淀粉酶溶液以分解残留的结合态淀粉,再用水、丙酮洗涤,烘干,即为不溶性膳食纤维。 3 仪器和设备 3.1 提取装置:由瓶口装有冷凝器的300mL锥形瓶和可将100mL水在510min内由室温升至沸腾的可调电热板组成。 3.2 F3-2玻璃过滤坩埚(2号滤片,30mL容积)。3.3 电热烘箱。 3.4 电热培养箱:温度保持在372。 3.5 干燥器:装有有效干燥剂。 3.
2、6 过滤装置:由玻璃过滤坩埚和吸滤瓶组成,用水泵或真空泵抽滤。 3.7 粉碎机。 4 试剂 本标准所用试剂,除特别注明者外,均为分析纯,水为蒸馏水。 4.1 十二烷基硫酸钠:化学纯。 4.2 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)(GB 1401)。 4.3 四硼酸钠(GB 632)。 4.4 磷酸氢二钠(GB 1263)。 4.5 乙二醇一乙醚:化学纯。 4.6 十氢萘:化学纯。 4.7 无水亚硫酸钠。 4.8 石油醚:沸程范围3060。 4.9 磷酸二氢钠(GB 1267)。 页码,1/3GB 9822882006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR982200A.
3、htm4.10 丙酮(GB 686)。 4.11 -淀粉酶1)(酶活性不低于每毫克800A)。注:1)可采用上海生物化学研究所试剂厂生产的 - 淀粉酶结晶冻干粉或类似产品。酶活测定方法见GB 9826小麦粉破损淀粉测定法 -淀粉酶法附录A(补充件) -淀粉酶活性的测定。 4.12 甲苯(GB 684):化学纯。 4.13 中性洗涤溶液的制备:将18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠用 150mL水加热溶解,另将30g十二烷基硫酸钠和10mL乙二醇一乙醚溶于700mL热水中, 然后加入到第一种溶液中。4.56g磷酸氢二钠溶于150mL热水中,加入到第一种溶液中。如果需要,用磷酸调节pH
4、到6.77.1,使用时若有沉淀形成,可加热到60使沉淀溶解。 4.14 -淀粉酶溶液的配制:用0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1mol/L磷酸二氢钠溶液各500mL,混匀,配 成0.1mol/L磷酸缓冲液。称取12.5mg -淀粉酶,用0.1mol/L磷酸缓冲液溶解,定容至250mL。5 分析步骤 5.1 样品制备:谷物样品经合适的粉碎机一次研磨后全部通过1mm筛孔(试样细度约2060目)。 5.2 精确称取制备好的样品0.5001.000g,放入300mL锥形瓶中。 5.3 顺序加入:(a)100mL中性洗涤溶液;(b)2mL十氢萘;(c)0.50g无水亚硫酸钠。 5.4 在510min内,
5、将300mL锥形瓶的内容物加热至沸腾,从沸腾开始计时,微沸1h。 5.5 洁净的玻璃过滤坩埚在110烘箱内干燥4h,放入干燥器中,冷却后称量,直至恒重。将经过中性洗涤溶液处理的纤维残留物加入,抽滤,用不少于300mL的100 水清洗。 5.6 加入5mL -淀粉酶溶液,抽滤,以置换清洗用水,然后用合适的胶塞塞住玻璃过滤坩埚的底部,加入20mL酶液和几滴甲苯。 5.7 放入372的培养箱中,保温18h。 5.8 取下塞子,抽滤,用不少于500mL水清洗纤维残留物,再用约75mL丙酮清洗。在100的烘箱中干燥4h,然后放入干燥器中,冷却后称量,直至恒重。 6 结果计算 6.1 计算公式: 不溶性膳食纤维()( m2-m1)/ m100 式中: m1玻璃滤器烘干质量,g;m2玻璃滤器及残留物烘干质量,g;m 试样质量,g。页码,2/3GB 9822882006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR982200A.htm7 允许差 两个平行试样的测定值最大允许差为1.0。以其算术平均值作为测定结果,保留一位小数。 页码,3/3GB 9822882006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR982200A.htm