1、 ICS 13.080 CCS Z 18 37 山东省地方标准 DB37/T 4481.3 2021 土壤中 农 药残留量 的测定 液相色谱- 串联 质谱法 第 3 部分： 壬基酚 二氧乙烯 醚、 壬 基酚和4- 正壬基酚 残留量的 测定 Determination of pesticide residues in soil Liquid chromatography-mass spectrometry Part 3:Determination of NPEO4, NP and 4-n-NP 2021-12-29 发布 2022-01-29 实施 山东省市 场监督 管 理局 发 布 DB37/
2、T 4481.3 2021 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分： 标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定 起草。 本文件 是DB37/T 4481 土 壤中农 药残 留 量 的测 定 液相色 谱- 串联 质谱 法 的 第3部 分。 DB37/T 4481 已经发 布了 以下 部分 ： 第1 部 分：9 种 三唑 类杀 菌剂残 留量 的测 定； 第2 部 分： 六种 除草 剂残 留量的 测定 ； 第3 部 分： 壬基 酚二 氧乙 烯醚、 壬基 酚 和4- 正壬 基 酚残留 量的 测定 ； 第4 部 分： 霜脲 氰残 留量 的测定 。 请注意
3、本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由山 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。 本文件 由山 东省 农业 标准 化技术 委员 会归 口。 DB37/T 4481.3 2021 II 引 言 作为土 壤中 农药 残留 分析 的一部 分， 本文 件规 定了 土壤中 壬基 酚二 氧乙 烯醚 、 壬基 酚和4-正壬基酚 残留量 液相色 谱-串 联质 谱 测定方 法， 方 法的 检出限 、精密 度等均 能 满 足土壤 样品检 验的要 求， 对产 地 环境的 保护 、农 产品 产业 的健康 、可 持续 发展 有积 极和深 远的
4、意义 。DB37/T 4481.3 2021 1 土 壤中农 药残留量 的测定 液相色 谱- 串联质 谱法 第 3 部 分： 壬基 酚 二氧乙 烯醚、壬 基酚 和 4- 正 壬基 酚残留 量的测定 1 范围 本文件 规定 了土 壤中 壬基 酚二氧 乙烯 醚、 壬基 酚和4- 正壬基 酚残 留量 液相 色谱- 串联质 谱测 定方 法 。 本文件 适用 于土 壤中 壬基 酚二氧 乙烯 醚、 壬基 酚和4-正壬 基酚 残留 量的 测定 。 注： 本 文 件 测 定 土 壤 中 壬 基 酚 二 氧 乙 烯 醚 、 壬 基 酚 和4- 正 壬 基 酚 定 量 限 为0.005 mg/kg ， 线 性 范
5、 围 为0.005 mg/L 0.2 mg/L 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注 日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 3 术语和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和定 义。 4 原理 试样用 乙腈 提取 ，液 相色 谱-串 联质 谱仪 检测 ，外 标 法定量 。 5 试剂与 材料 除非另
6、 有说 明， 在分 析中 仅使用 分析 纯试 剂和GB/T 6682 中 规定 的一 级水 。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇（CH3OH ，65-56-1） ，色谱 纯。 5.1.2 碳酸铵 （(NH4)2CO3 ，506-87-6） ，色 谱纯 。 5.1.3 乙腈（CH3CN ，75-05-8）。 5.1.4 丙酮（CH3COCH3 ，67-64-1 ）。 5.1.5 氯化钠 （NaCl ，7647-14-5 ）：140 烘烤4 h 。 5.2 材料 5.2.1 滤膜： 聚四 氟乙 烯，0.22 m。 5.2.2 滤纸： 中速 。 5.2.3 玻璃器 皿。 DB37/T 4481.3 2
7、021 2 注： 分析中涉及的材料应避免塑料材质，所用的玻璃器皿应洗净后用一级水淋洗3 次，丙酮浸泡1 h 后晾干备用。 5.3 溶液配 制 1 mmol/L 碳 酸铵 水溶 液： 准 确称取0.096 g 碳酸 铵于1 000 mL 容量 瓶中， 用水 定容 至刻度 ， 现 配现 用 。 5.4 标准溶 液 5.4.1 壬基酚 二氧 乙烯 醚（CAS 1119449-38-5）：10 mg/L 。 5.4.2 壬基酚 （CAS 25154-52-3 ）：10 mg/L 。 5.4.3 4-正壬 基酚 （CAS 104-40-5）：10 mg/L 。 5.5 混合标 准溶 液配 制 吸取一 定
8、量 标准 溶液 于10 mL容量 瓶中 ， 用 甲醇 定容 至刻度 。 混合标 准溶 液避 光0 4 保 存， 有 效期1 个月 。 6 仪器和 设备 6.1 液相色 谱- 质谱/ 质谱 仪： 配有电 喷雾 离子 源（ESI ）。 6.2 电子天 平， 感 量0.001 g 和0.01 g。 6.3 水浴振 荡器 （往 复式 ）。 6.4 具塞量 筒：100 mL。 6.5 玻璃三 角瓶 。 6.6 土壤筛 ：金 属，2 mm 孔径 。 7 试样制 备 土壤鲜 样， 除去 石块、 动植 物残体 等杂 物， 风干 后过2 mm 孔径 筛， 装入 洁净 容器， 密封， 标明 标记 ， -18 以下
9、 保存 备用 。 8 分析步 骤 8.1 提取 称取25 g试 样 （精 确至0.01 g），于250 mL 玻 璃三 角 瓶中， 加入25 mL 水和25 mL 乙腈， 室温 下水 浴振 荡提取30 min ， 滤纸 过滤 。 收集滤 液置 于100 mL 具塞 量筒 （内放7 g 10 g 氯化 钠） ， 剧 烈震荡1 min，室 温下静 置30 min ，取 上清 液约2 mL，用0.22 m滤 膜 过滤， 待测 。 8.2 仪器参 考条 件 8.2.1 液相色 谱参 考条 件 色谱柱 ：C18 ，75 mm2.0 mm 1.7 m ，或 相当 者。 柱温箱 温度 ：40 。 进样量 ：
10、1.0 L。 流速：0.2 mL/min 。 流动相 组成 和梯 度洗 脱程 序见表1。 DB37/T 4481.3 2021 3 表1 流动相 组成 和梯 度洗 脱程 序 时间 min 流动相A （1mmol/L 碳酸铵水溶 液） % 流动相B （甲醇） % 0.0 65 35 1.5 25 75 3.0 10 90 5.5 10 90 5.6 65 35 8.2.2 质谱参 考条 件 离子源 ：电 喷雾 离子 源。 扫描方 式： 正负 离子 扫描 。 加热模 块温 度：400 。 DL 管温 度：250 。 碰撞气 （氦 气） 压力 ：230 kPa。 干燥气 （氮 气） 流速 ：15 L
11、/min 。 检测方 式： 多反 应监 测（MRM ）。 多反应 监测 条件 和保 留时 间（见 表2 ）。 表2 壬基酚 二氧 乙烯 醚、 壬基 酚、4- 正壬 基酚 保留 时间 和多反 应监 测条 件 序号 中文名称 保留时间 min 定量离子对 碰撞能 V 定性离子对 碰撞能 V 1 壬基酚 5.39 326.1/183.1 29 326.1/121.1 25 2 壬基酚二氧乙烯醚 5.58 219.1/133.0 -12 219.1/147.1 -23 3 4- 正壬基酚 6.16 219.3/106.0 20 219.3/106.0 8.3 标准工 作曲 线的 制备 准确吸 取一定
12、量的混 合标 准溶液 （4.5 ），用 甲醇逐 级稀释 成质量 浓度为0.005 mg/L、0.01 mg/L 、 0.05 mg/L 、0.1 mg/L 和0.2 mg/L的 混合 标准 工作 溶液 。 空 白基 质溶 液氮 气吹 干 ， 加入1 mL 上述 混合 标准 工作溶 液复 溶， 过滤 膜 （4.2.1 ） 配制 成系 列基 质混 合标准 工作 溶液 ， 供 液相 色谱- 串联 质谱 仪测 定。 以 测得峰 面积 为纵 坐标 、对 应的标 准溶 液质 量浓 度为 横坐标 ，绘 制标 准工 作曲 线。 8.4 定性及 定量 8.4.1 保留时 间 被 测 试 样中 目 标化 合 物色
13、谱 峰 的 保留 时 间与 相 应标准 色 谱 峰的 保 留时 间 相比较 ， 相 对误 差 应在 2.5 % 之内 。 8.4.2 定量离 子、 定性 离子 及子 离子丰 度比 在相同 实验 条件 下进 行样 品测定 时， 如果 检出 的色 谱峰的 保留 时间 与标 准样 品相一 致， 并且 在 扣 除 背景后 的样 品质 谱图 中， 目 标化合 物的 质谱 定量 和定 性离子 均出 现， 而 且同 一检 测批次， 对同 一化 合 物 ， 样品中 目标 化合 物的 定性 离子和 定量 离子 的相 对丰 度比与 质量 浓度 相当 的基 质标准 溶液 相比 ， 其 允 许 偏DB37/T 448
14、1.3 2021 4 差不超 过表3 规定的 范围 ， 则可判 断样品 中存 在目标 化合物 。壬基 酚二 氧乙烯 醚、壬 基酚、4-正 壬基 酚 多反应 监测 的色 谱图 参见 附录A 。 表3 定性测 定时 相对 离子 丰度 的最大 允许 偏差 相对离子丰度 50 % 20 % 50 % 10 % 20 % 1 0 % 允许的相对偏差 2 0 % 2 5 % 3 0 % 5 0 % 8.4.3 定量 外标法 定量 。 8.5 试样溶 液的 测定 将基质 混合 标准 工作 溶液 和试样 溶液 依次 注入 液相 色谱- 串联 质谱 仪中 ， 保 留 时间和 定性 离子 定性 ， 测得定 量离
15、子峰 面积 ， 待 测样液 中农 药的 响应 值应 在仪器 检测 的定 量测 定线 性范围 之内 ， 超 过 线 性 范 围 时应根 据测 定浓 度进 行适 当倍数 稀释 后再 进行 分析 。 8.6 空白试 验 除不称 取试 样外 ，均 按上 述步骤 进行 。 8.7 平行试 验 按以上 步骤 对同 一试 样进 行平行 测定 。 9 数据处 理 试样中 被测 物残 留量 以质 量分数 i 计， 单位 以毫 克 每千克 （mg/kg ）表 示， 按 式（1 ）计 算： = (1) 式中： i 试 样中 被测 物残 留 量，单 位为 毫克 每千 克（mg/kg）； i 基 质混 合标 准工 作
16、溶液中 被测 物的 质量 浓度 ，单位 为毫 克每 升（mg/L ）； v1 提取 有机 溶剂 总体 积，单 位为 毫升 （mL ）； m 试 样的 质量 ，单 位 为克（g）。 注： 计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字，当含量超过1 mg/kg 时 保留三位有效数字。 10 精密度 10.1 在重复 性条 件下 ， 两 次独 立测定 结果 的绝 对差 不大 于重复 性限 （r ） ， 重复 性 限 （r） 的数 据应 按 附录B 执行 。 10.2 在再现 性条 件下 ， 两 次独 立测定 结果 的绝 对差 不大 于再现 性限 （R ） ， 再现 性
17、（R） 的 数据 应按 附 录C 执 行。 11 回收率 DB37/T 4481.3 2021 5 本方法 的添 加水 平和 回收 率范围 见附 录D 。 DB37/T 4481.3 2021 6 A A 附录A （资料 性） 壬基酚 二氧 乙烯 醚、 壬基 酚和 4-正 壬基 酚多 反应 监 测（MRM ） 色谱 图 壬基酚 二氧 乙烯 醚、 壬基 酚和4- 正壬 基酚 多反 应监 测（MRM ） 色谱 图见 图A.1 图A.3 。 图A.1 壬基酚 图A.2 壬基酚 二氧 乙烯 醚 图A.3 4-正壬 基酚 多 DB37/T 4481.3 2021 7 B B 附录B （规范 性） 重复性
18、 限 重复性 限如 表B.1 所 示。 表B.1 方法的 重复 性限 （r ） 序号 名称 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r 1 壬基酚 0.005 7 . 7 1 0 -4 0.05 8 . 9 1 0 -3 0.2 2 . 6 1 0 -2 2 壬基酚二氧乙烯醚 0.005 6 . 2 1 0 -4 0.05 2 . 4 1 0 -3 0.2 1 . 1 1 0 -2 3 4- 正壬基酚 0.005 3 . 2 1 0 -4 0.05 3 . 8 1 0 -3 0.2 1 . 3 1 0 -2 DB37/T 4481.3 202
19、1 8 C C 附录C （规范 性） 再现性 限 再现性 限如 表C.1 所 示。 图C.1 方法的 再现 性限 （R ） 序号 名称 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R 1 壬基酚 0.005 1 . 4 1 0 -3 0.05 1 . 0 1 0 -2 0.2 1 . 2 1 0 -1 2 壬基酚二氧乙烯醚 0.005 6 . 3 1 0 -4 0.05 5 . 6 1 0 -3 0.2 7 . 9 1 0 -2 3 4- 正壬基酚 0.005 1 . 0 1 0 -3 0.05 1 . 5 1 0 -2 0.2 5 . 5 1 0 -2 DB37/T 4481.3 2021 9 D D 附录D （资料 性） 加标回 收率 加标回 收率 见表D.1 。 表D.1 壬基酚 二氧 乙烯 醚、 壬基 酚和 4-正 壬基 酚加 标回 收 率 添加水平 mg/kg 壬基酚 壬基酚二氧乙烯醚 4- 正壬基酚 0.005 86108 100106 95 105 0.05 7891 8494 8096 0.2 8099 8499 9097
