1、UDC 633.1/.8: 543.85.06 中华人民共和国国家标准，GB.2982 f飞飞?乒了二二i斗2谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯民去)Method for determination of crude. protein in cereals and beans seeds ( Semi - micro kjeldahl method ) 1982-02-27发布1983-01-01实施国东桥;位总局批准中华人民共和国国家标准谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯民去)Method for determination of crude protein in cerea
2、ls and beans seeds ( Semi - micro kjeldahl method ) 1 适用范围本标准适用于测定谷类、豆类作物种子粗蛋白质含量。2 仪器、设备2.1 分析天-fL:感量0.0001克。2.2 实验室用粉碎机。2.3 半微量凯氏蒸榴装置(推荐使用龙科一A型半微量蒸锢装置)。2.4 半微量滴定啻z容积10毫升。2.5 硬质凯氏烧瓶z容积25毫升，50毫升。2.6 锥形瓶z容积150毫升。2.7 电炉:600瓦。S试剂UDC 633.1/.8 :543.85.06 GB 2905-82 3. 1 盐酸(GB622一77)或硫酸(GB625-77)。分析纯。0.02
3、N、0.05N标准洛液(邻苯二甲酸氢饵法标定。3.2 氢氧化铀(GB629-77) :工业用或化学纯。40%溶液(W/V)。3.3 棚酸-指示剂混合液。3.3.1 棚酸(GB628-78) :分析纯。2%溶液(W/V)。3.3.2 混合指示剂z澳甲酣绿(HG3-1220一79)0.5克，甲基红(HG3-958-76) 0.1克，分别榕于95%乙醇中，混合后稀释至100毫升。将混合指示剂与2%棚酸溶放按1: 100比例混合，用稀酸或碱调节pH值为4.5，使呈灰紫色。即为棚酸一指示剂混合液。注z此溶液放置时间不宜过长，需在一个月之内使用。3.4 tJ日速剂z五水合硫酸铜(GB665一78)分析纯，
4、10克，硫酸梆(HG3-920一76)分析纯，100克，在研钵中研磨，仔细混匀，过40目筛。3.5 浓硫酸(GB625-77)比重1.84，无氮。3.6 30%过氧化氢(HG 3-1082-77) :分析纯。3.7 30 %过氧化氢-硫酸混合被(简称混液): 30%过氧化氢、航酸、水的比例为3: 2 : 1 ，即在100毫升蒸锢水中慢慢加人200毫升浓硫酸，待冷却后，将其加人300毫升30%过氧化氢，混匀。注s此混液可一次配制500-1000毫升贮藏于试剂瓶中备用。夏天最好放入冰箱戎荫凉处贮藏，室温(20C)上、F时不必、冷藏，贮藏时间不跑过一个月。3.8 煎糖(HG3-1001-76) :分
5、析纯。国家标准总局1982-02-27发布1983-01-01实施GB 2905-82 4 试样的选取和制备4.1 取有代表性的种子(带壳种子需脱壳挑拣干净，按四分法缩减取样，取样量不得少于20克。4.2 将种f放于60- 65 c烘箱中F燥8小时以上，用粉碎机磨碎，95%通过40目筛，装人磨口瓶备用。5 测定步骤5.1 称样称取0.1克试样两份(含氮1-7毫克)，准确至0.0001克，同时测定试样的水分含量。5.2 消煮:5.2.1 将试样置于25毫升凯氏瓶中，加人加速剂粉末。除水稻为1克外，其他均为2克。然后加3毫升浓碗酸，轻轻摇动凯氏瓶，使试样被硫酸湿润，将凯氏瓶倾斜置于电炉上加热，开始
6、小火，待泡沫停止后)(大火力，*保持凯氏瓶l:t1的液体连续沸腾，沸酸在瓶颈中部冷凝固流。待溶液消煮到无微小的嵌粒井里透明的蓝绿色时，谷类继续泊煮30分钟，豆类继续消煮60分钟。5.2.2 将试样置f50毫升凯氏瓶中，加人0.5克加速剂和3毫升混液，在凯氏瓶上放一曲颈小漏斗、倾斜置于电炉上加热，开始小火(用调压器将电压控制在175伏左右)，保持凯氏瓶中被体呈微沸状态。5分钟后)U大火力(将电压控制在200伏左右)，保持凯氏瓶中的液体连续沸腾。j肖煮总时间，水稻、高粱为30分钟，真他均为45分钟。注z采用5.2.1或5.2.2消煮，其准确度与精密度一致，可任取一种。5.3 蒸馆、消煮波稍冷后加少
7、量蒸榴水，轻振摇匀。移入半微量蒸榴装置的反应室中，用适量蒸榴水冲洗凯氏瓶4-5次。蒸锢时将冷凝管末端插到盛布10毫升棚酸一指示剂混合液的锥形瓶中，向反应室中加入40%氢氧化饷榕液15毫升川，然后通蒸气蒸锢，当锢出液体积约达50毫升时，降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸锢1-2分钟，用蒸锢水冲洗冷凝管末端，洗被均需流人锥形瓶中。5.4 摘走谷类以0.02N ，旦，类以D.05N盐酸或硫酸标准溶被滴定至锥形瓶内的溶液由蓝绿色变成灰紫色为终点。5.5 空白用0.1克煎楠代替样品作空白测定。消耗酸标准榕液的体积不得超过0.3毫升。6 测定结果的计算6. 1 计算公式(V2 - Vj) x N x
8、 0.0140 x K x 100 粗蛋白质，% (干基)= 巾, . v、x 100 式中:V2-一一滴定试样时消耗酸标准溶液的体积毫升); Vl一滴定空白时消耗酸标准溶液的体积(毫升); N一一一酸标准榕液的当量浓度，N; k一一氮换算成粗蛋白质的系数pW一一一试样重量(克); X一一一试样水分含量;0.0140-一一每毫克当量氮的克数。6.2 平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数后二位。-6.3 测定两类作物种子粗蛋白质的平行测定结果为15%以下时，其相对相差不得大于3%115%-30%时为2%, _30%以上时为1%。6.4 结果报告中必须注明氮换算成粗蛋白质的系数。换算系数见F表
9、。*应加热有硫酸部位的瓶底，不使瓶壁的温度过高，以免钱盐受热分解造成氮的损失。 *采用消煮条件5.2.2时加10毫升即可。GB 2905-82 不同作物种子含氮量换算成粗蛋白质之系数种子换算系数K 麦类、豆类5.70 JK 稻5.95 品粱5.83 大R 6.25 其他谷类6.25 3 GB 2905-82 附录A参考资料参考件A .1 化学2二生物，Vol 4 , N02，1966年。A.2 J. of AOAC , Vo159, No 6，1976年。A.3 International Assocition for Cereal Chemistry (ICC) S tandard N r
10、.105。A.4 International Standard ISO 1871。A.5 AACC M ethod 46 -10。A.6 Fertilizer Abstracts ,VoJ 10，No3，437t197(年。附加说明z本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中国农科院分析室起草。4 N旬11mOON阁。华人民共和国国家标准谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法半微量凯氏法GB 2905-82 中* 技术标准出版社出版(北京复外三里问)技术标准出版社印刷车闹印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售 印张1/2字数5.0001983年1月第一次印刷开本880x 1230 1/16 1983年1月第一版印数1-5.000 价0.14元科技新节目44-183 书号I15169 1 - 1530
