1、UDC 633. 1 I 543. 185 B 20 GB 中华人民共和国国家标准r飞曹、翩70，00 7 事且IO t O u-r tJy什巳一!句们水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法Determination of amylose in grains of rice , maize and millet 1987-04-08发布1987-11-15实施回来标准局局发布1 适用范围中华人民共和国国家标准水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法Determination of amylose in grains of rice , maize and millet 本标准适用于水稻、五米、谷子籽粒直
2、链淀粉含量的测定。2 参考标准GB 5006-85(谷物籽粒粗淀粉测定法GB 3523-83(谷类、油料作物种子水分测定法3 测定原理UDC 633. 1 : 543 . 185 GB 7648 - 87 淀粉与确形成腆-淀粉复合物，并具有特殊的颜色反应。支链淀粉与腆生成棕红色复合物.在链淀粉与腆生成深蓝色复合物。在淀粉总量不变条件下，将这两种淀粉分散液按不同比例也合，在屯的波长和酸度条件下与碗作用，生成由紫红到深蓝一系列颜色，代表其不同亩，链淀粉与支链淀粉含址比例，根据吸光度与直链淀粉浓度呈线性关系，可用分光光度计濒IJ定。4 仪器、设备4. 1 粉碎机(实验室用旋风磨)。4. 2 分光光度
3、计:721型或具有相同性能的其他型号。4. 3 分析天平:感量0.0001go4.4 玻璃仪器:50m)具塞刻度试管.100m)容量瓶。5 试$J配制除注明者外均为分析纯，水为蒸馆水。5. 1 氧氧化饷(GB629- 81). )mo).L-、0.09mo).L水溶瓶，准确怀走。5.2 冰乙酸(GB676一78).1mo).L-水溶液，准确标定。5. 3 碗贮备溶液及腆试:ilIJ:称2g腆和20g腆化押(GB1272 77)用蒸榴水榕解并平jff全100ml.即为腆贮备液。取10m)腆贮备液稀释至100m).即为确试剂。5. 4 马铃薯直链淀粉标准溶液:)mg/m).取烘干(5556C真空十
4、二燥)的马铃薯ili悦淀粉纯品，称取重量相当于含O.1000g淀粉，放入100m)容量瓶1，110入Iml，t乙醇湿润样品.冉Jm9ml 1 mol L氢氧化铀溶液，于沸水陷分散10min.迅速冷却后，用水屯容。5.5 支链淀粉标准溶液:Img/时，选择与待溃IJ谷吻样品相应的蜡质谷物标准MlfJF取盘时相当j二含O. 1000g舰淀粉，放入100m)容量瓶中，加lml_无水乙醇，再加9mllmol.L氧氧化纳榕液，于沸水附加中可民共和国农牧渔业部1987-03-26批准1987-11-15实施GB 7648 - 87 热IOrnin，迅速冷却后，用水定容。5.6 石油酷(HG31003一76
5、)，沸程60-90C0 6 样品的选取和制备6. 1 将样品挑选干净(谷子脱壳、稻谷制成精米)，按四分法取样20g。6. 2 用粉碎机将样品价碎，全部通过o.177mrn孔径筛(80号)，棍匀装入磨口瓶备用。7 测定步骤7. 1 混合校准曲线绘制取6个100ml容量瓶，分别加入1mg/ml马铃薯直链淀粉标准榕鞭。、0.25、0.50、1.00、1.50、2. OOrnl.再依次加入Img/ml支链淀粉标准溶攘5、4.75、4.50、4.00、3.50、3.00ml，总量为5mlo另取i个100ml容量瓶.加入O.09mol. L-1氢氧化铀榕被5ml作空白。然后于各瓶中依次加入约50ml水、I
6、ml Imol.L .乙酸及Iml础试剂。用水定容后显色10min，在620nm处读取吸光度。以直链淀粉毫克数为横坐标.吸光度为纵坐标，绘制校准曲线或建立回归方程。7.2样品测定7.2. 1 按GB5006- 85 (谷物籽粒粗淀粉测定法和GB3523- 83 (谷类、油料作物种子水分测定法测定样品的粗白粉含量和水分。7.2.2 样品分散:称取相、与于O.1000g粗淀粉的样品(如按样品干重计算直链淀粉百分含量时.称取样品IOOmg)于100ml容量瓶中.加Im1无水乙醇，充分混润样品，再加入9mllmol.L-1氢氧化饷溶液F沸水浴中分散10mih.迅速降却，用水定容。7.2.3 脱脂:取2
7、0ml分散液于50ml具塞刻度试管中，加入7-1ml石油酶，间歇摇动10min.静止15min.分层后用连接在水菜上的吸管抽吸，吸去上部石油酣层。t重复以上操作2-3次(精米脱脂二次.玉米、谷子须脱脂气次人7.2.4 测定:吸取脱脂后的碱分散液5.pOml于100ml容量眼中，加水50ml.再加入1mol. L -1乙酸j膏、液Iml及腆试开IJIm1.用水也容。显色10min后，在620nm处读取吸光度。l:测定样11lI4绘制校准FI!l线时的温度相止:不能超过士1(, 8 结奥计算8. 1 计算公式8. 自链淀粉(%.占淀粉总量)按式(1)计算:; X 100 直链淀粉叭，占淀粉总量)=
8、?X100. b. 直链淀粉淀物(粗直链淀粉)，4000r/min 离心15min，将沉淀物转入200ml饱和l正了醇水溶被中，在沸在恪中j):热溶解(l015min)，冷却至室温，放入冰箱内(21C )21h，弃去上层污物层，以4000r/min离心15min，沉淀物再加200ml饱和正丁醉水榕液加热情解，反复纯化一气次。最后沉淀物用无水乙醇反复洗海离心34次，在真空干燥箱中(5556C)卡燥。即得宦链淀粉纯晶。A.4 纯品质量鉴定A. 4.1 淀粉含量测定的O. 1000g纯品加入1OmIO. 5mol.L-1氢氧化纳在沸水泊巾tJll热分散.再加入21.5ml mol.L-:盐酸，在沸水
9、浴回流水解缸，用费林氏被法(GB551385(粮食.irtl料检验还原糖和非还原糖测定法) 测定还原糖，乘以0.9即得淀粉量，计算纯品含娃。. 4. 2 慎-淀粉复合物吸收光谱测定3 GB 7648 - 87 取5.1溶液2mlOmg/ml直链淀粉)及0.09mol.L-1氧氧化销溶掖3ml加50ml水稀释后，再加入1 mol L-1乙酸溶液Iml和1腆试剂Iml，用水定容至100ml，显色10min，于分光光度计测定500-800nm的吸收谱。A. 4. 3 确结合量测定A. 4. 3. , 测定称取重量相当于含O.1000g淀粉的烘干马铃薯直链淀粉纯品于100ml容量瓶中，加几滴无水乙醇湿
10、润后再加入0.5mol.L-1氢氧化纳溶液10ml，置沸水浴完全分散，冷却、加水定容。吸5ml(含直链淀粉5mg)分散被放入200ml烧杯中，加入85ml水，5ml 1mol.L-1盐酸及5mlO.1mol L-1腆化饵榕喊，按电位滴定装rl要求，把烧杯胃于电磁搅拌器上，将铀电极及甘乘电极插入液面下，在电磁搅拌下，用5ml微量滴定管滴加硝酸锦标准榕液，每次滴加O.2ml (或O.lml).加后lmin读取毫伏数，滴定终点用二次微商法计算。A. 4. 3. 2计11:0.6346 直链淀粉腆结合量，%=一百一一XT X 100 式中:TII一一直链淀粉质量，mg;T一-8. 34 X 10-mo
11、l.L-1腆酸饵溶液滴定体积，ml;O. 6346一一一每毫升8.34X 10叶mol.L腆酸押溶液相当于腆的质量.0.6346mg 0 A. 4. 4 马铃薯直链淀粉纯品标准马铃薯直链淀粉纯品必须具备:a.儿，.，为640-650nm;b.淀粉含量在85%以上;c.腆结合量在19.5以上;d.A:I.!叼.m.，在20(时为340以立。GB 7648 - 87 附录自永黯、玉米、谷子支链淀精标准品的选择与市j备(参考件)B.l 醺-淀粉复合物吸收光谱测定取5.5榕液5mlOmg/ml支链淀粉)，加50ml水稀释后，再加入Imol.L-乙酸溶液Iml和腆试剂1时，加水至100ml，显色10mi
12、n，用分光光度计测定400-640nm的吸收谱。B.2 标准品的选择水稻、玉米、谷子支链淀粉标准品可以从相应的蜡质谷物品种中选择，标准品必须分别具备:水稻zm.520-530nm，Ac% ，620nm，在20C时为17以下;玉米zm.530-540nm，Ac% ，620nm，在20C时为25以下;谷子gm.530-540nm，对c%，620nm，在20C时为22以下。B.3 标准品制备取适量(10-20g)通过O.177 -0. 149mm孔径筛(80-100号)的蜡质谷粉，分别用甲醇及石油酷在索式脂肪抽提器回流脱脂16h，放入真空于燥箱烘干(55-56C)备用，同时按GB5006-85测定淀粉含量。附加说明z本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室负责起草。本标准主要起草人孟广琴、李霞辉、何照施。5 h|叮h目。华人民共和国家标准水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法(j 7648- 87 |可中 ，tt罔标准111版社111版(北京复外二E旦河trr司标准出版社北京印刷f印刷l新华彷店北京发行所发行各地新华(51，!;经传版校专有不得翻印* 开本880X1230 1/16 印张1/2字数90001987年12月第-版1987年12月第.1.欠印刷印数1-2200 .介O.30元34 书号:15169. 1-5313 标1180
