1、UDC 633. 1 I 543 B 20 GB 中华人民共和国国家标准6B . lS49-7-f活母一8子ly什kt鸟7一17谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法谷物籽粒色氨酸测定法Pretreatment method for determination of amino acids in cereal grains Determination of tryptophan in cereal grains 1987-04-08发布1987-1-15实施国家3标准局发布目录GB 7649- 87 谷物籽桩氨基酸测定的前处理方法. . ., ( 1 ) GB 7650- 87 谷物籽粒色氨酸测定法.
2、 . . ( 4 ) 中华人民共和国国家标准谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法1 适用范围Pretreatment method for determination of amino acids in cereal grains 本标准适用于氨基酸分析仪测定谷物籽粒中氨基酸含量的样品前处理。2 方法原理UDC 633.1 543.05 .t,;B 7S49 一意771 (、r-b- (qgJ 谷物籽粒中的氨基酸，系按一定顺序结合成不同类型的肤和蛋白质，因而在测定前要用4定浓度的酸使蛋白质中肤键断裂，水解成多种氨基酸后，用氨基酸分析仪测定。由于色氨酸在酸性溶液中水解时易被破坏，须用碱水解。3 仪踊设
3、备3. 1 分析天平:感量O.0001g. 3.2 实验室用粉碎机。3. 3 啧灯。3.4 真空泵。3. 5 真空规。3.6 恒温干燥箱。3.7 水解管z用九五料玻璃制的球形管或回底试管。体积1520mlo3.8 囊四氟乙烯管s10X100mm o 3. 9 玻璃试管.l15X180mm. 3.10 浓缩器(可控温，减压)或真空干燥器。3.11 容量瓶.25m).4 试剂除注明者外均为分析纯。配制试剂均用去离子水，电导率大于1mr 0 4.1 6mol/L盐酸z盐酸(GB622一77).优级纯，与水按I: 1 11昆合。4.2 4mol!L氮氧化惺z用水溶解168.8g氢氧化惺(Q!HG12-
4、 325 - 83) ，稀释至IOOOml 0 4.3 pH2.2缓冲液:19. 6g拧穰酸三饷(HG3129880)用水榕解后，加入16.5ml盐酸(GB622 77，优级纯)，5m125%硫代双乙醇，lg苯酣(HG3一门65-78)，最后定容至1000ml。.4 pH4.3缓冲液:14.71g拧幢酸三铺(HG3一1298-80)和2.92g虱化饷(GBI266-77)，10.50g拧镰酸(HG3一1108-81)，溶解在500ml水中，再加入5ml25%硫代双乙醇，0.lml辛酸，最后定容至1000ml。4:5 冷冻剂g液氮或干冰加丙嗣(或加乙醇)。中华人民共和国农牧渔业部1987-03-
5、26批准1987-11-15实施GB 7649-87 5 试样制备5. 1 取有代表性的样品，用四分法分取25g左右，拣去杂质，带壳籽粒进行脱壳。5.2 将样品放在6065C恒温干燥箱中。干燥8h左右冷却后在粉碎机中碾碎，全部通过孔径为0.25mm的筛子，充分棍匀后装入磨口瓶中备用。6 处理方法6. 1 酸永解步骤6. 1. 1 称样称取样品30士5mg，准确至O.lmg，置于水解管中，同时另称样品按GB3523-83(谷类、油料作物种手水分测定法机测定水分含量。6.1.2 水解6.1.2. 1 在水解管内加入6mol/L盐酸10时，在距管口2cm左右处，用喷灯灼烧并拉细颈。再将管子放入冷冻剂
6、中.冷却至溶被呈固体后取出，接在真空泵的抽气管上，使减压至7Pa(5 X 10-2 mmHg)后封口。6.1.2.2 将封好口的水解管放在110士IC的恒温干燥箱内，水解22-24h后，取出冷却。6.1.2.3 打开水解管.将水解液定量转移到25ml容量瓶内，定容过撞.吸取掘液lml，用旋转浓缩器(.15-50 C)或缸子真空干燥器内真空干燥.残留物用1-2ml去离子水溶解蒸干，如此反复进行1-2次.最后一次蒸干后.加pH2.2缓冲破溶解，供仪器测定。6.2 碱水解步囔6.2.1 称样称取样品60士5mg准确至O.lmg，在于聚四氟乙烯管内，同时按GB3523-83测定水分。6.2.2 水解6
7、.2.2.1 在聚四氟乙烯管内加入4mol/L氢氧化鲤Iml，使样品均匀温润，然后把管子放入玻璃试管中.在玻璃管上端.离聚四氟乙烯管4-5cm处，用喷灯灼烧并拉一细颈，再放到冷啄剂中，冷却至榕液呈固体后取出，接在真空泵的抽气管上.减压至7Pa(运5X 10-2 mmHg)后封口。6.2.2.2 把管子放在110士IC的恒温干燥箱内水解2恤，取出冷却，将水解液定量转移到25ml容量瓶内，用6mol/L盐酸中和后，再用pH1.3的缓冲液定容，过滤后供测定色氨酸用。2 A.l 计算公式GB 7649-87 附景A氨基曾分析仪测定的结果计算(补充件)某种氨基酸，%(干基)=一一王一一X10-6 X 2
8、5 X 100 m(1- H) 式中:A-一一测得的某种氨基酸在每毫升水解液中的含量，mg，m一一样品的质量，mg，H一一样品的水分百分率$25一一稀释倍数。A.2 结果寝示两个平行样品的测定结果用算术平均值表示，保留小数点后有效数字两位。A.3 结果的允许蕴两个平行测定值相对差不得大于8%.附加说明z本标准由上海农科院测试中心负责起草.本标准主要起草人顾金炎。3 h|om212h 目。华民只:阳国家标准谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法谷物籽槌色氨酸测定法G I3 619765v-87 l叫书1闲书J;1# ill版社fH版(Jt!发外开!.iJ) 1闽中j;1#:tl版社JtJ;:印刷J.印刷新华151，iJt求发行所发fj行地新华ISl，li约1t;版权专有不得翻印1(-丰二880X 1 :30 1/16 f1张:l!4 宁数门0001987 .f 12 )j寄:版198q. 12 ) j给次印刷11坡1- 80 .: f介Q.39 元) i IS .;-: 15169. 1-5314 11 80 斗，t ,
