1、UDC 633. 1 I 543 B 20 GB 中华人民共和国国家标准6B . lS49-7-f活母一8子ly什kt鸟7一17谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法谷物籽粒色氨酸测定法Pretreatment method for determination of amino acids in cereal grains Determination of tryptophan in cereal grains 1987-04-08发布1987-1-15实施国家3标准局发布目录GB 7649- 87 谷物籽桩氨基酸测定的前处理方法. . ., ( 1 ) GB 7650- 87 谷物籽粒色氨酸测定法.
2、 . . ( 4 ) 中华人民共和国国家标准UI)C 633.1:543.06 谷物籽粒色氨酸测定法GB 7650 - 8 7 Determlnatlon 01 tryptophan ln cereal pains 1 遁用范围本标准适用于测定谷物籽植色氨酸含量。2 原理谷物蛋白质醺解后,降解成肤和游离的氨基酸。在酸性介质中,有硝酸盐存在条件下,色氨酸呵|噪环与对二甲踱蓦苯甲醒反应,生成蓝色化合物,在一定范围内颜色深浅与色氨酸含量成正比。3 倪帽、谊3.1 分析天平,感量O.lmg.3.2 实验室用精碎机.3.3 721型分光光度计,或相当的仪器。3.4 离心机,4000r/min. 3.5
3、培养箱。3.6 20ml具塞刻度玻璃试管(须按准)。4 试剂除注明者外均为分析纯.水为燕锢水-4.1 浓盐酸(GB622-77),比重1.19. 4.2 10%盐酸榕液:22.7ml榷盐酸加水至100ml.4.3 5%对二甲踱基苯甲醒(HGB3486-62)溶液:5g对二甲胶摹苯甲醒榕于10%盐酸中,并定容100ml. 4.4 1%硝酸饷(GB636-77)水槽液(m/V) 注I4 c冰箱中保存,一周内使用有效.4.5 10%氢氧化(GB2306-80)水槽液(m/V) 4.6 L-色氨酸,层析纯.4.7 L-色氨酸标准溶液g准确称25mgL-色氨酸(105 C干燥2的,加少量O.lmoI/L
4、氢氧化饷(GB629-81)愤之槽解,定量地转移到250ml棕色容量瓶中,用水定容。浓度为1OOllg/mI 0 注I4C咏箱中保存,一个月内使用有效.5 试样的遭与饵5.1 选取具有代表性谷物籽栓,挽拣干净,按四分法缩减取样,样量不得少于20S.籽粒充分风干后用粉碎机蟠碑t带费将被先脱壳),使95%以上通过O.25mm孔径筛-06.2 按GB2906-82C谷类、油料作物种子粗脂肪测定法脱脂并测定脂肪含量。脱脂样品风干后.攫匀,装入口跟中备用.中华人民费帽辙.尴业部1987-03-26批准1987-11-15实施4 GB 7 6 5 0 一一8 7 6 校准曲线的绘制l吸L-色氨酸标准溶液o
5、.2 , o. 3 , o. 4 , O. 5 , O. 6 , O. 7ml分别置于20ml具塞刻度玻璃试管中,加lml10%氢氧化饵溶液,摇匀s加0.2ml5%对二甲胶基苯甲醒,摇匀p加0.2ml1%硝酸俐,摇匀s将试管白于冰水中,再加5ml浓盐酸。取出试管,强烈振摇后放入25C培养箱中显色75min(温度升到25C时记时),取出后用水稀释至刻度,摇匀。以试剂空白作对照在590nm波长处测读吸光度。以色氨酸含量(g)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制校准曲线。在温度较高的季节和地区,制定校准曲线时,参见附录A. 7 测定步骤7.1 称样g称取40mg试样两份,准确至O.lmg,与此同时,另称样
6、品,按GB3523-83。如脂肪含量为4%以F时,二个结果在允许差之内。5 GB 7 6 5 0 - 8 7 附景A(参考件)在温度较高的季节和地区,制定校准曲线时,L-色氨酸标准溶攘的显色条件可采用300C60mn,测定结果与25C75mn一致。6 附加说明B本标准由中国农业科学院分析室负责起草。本标准主要起草人崔淑文。h|om212h 目。华民只:阳国家标准谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法谷物籽槌色氨酸测定法G I3 619765v-87 l叫书1闲书J;1# ill版社fH版(Jt!发外开!.iJ) 1闽中j;1#:tl版社JtJ;:印刷J.印刷新华151,iJt求发行所发fj行地新华ISl,li约1t;版权专有不得翻印1(-丰二880X 1 :30 1/16 f1张:l!4 宁数门0001987 .f 12 )j寄:版198q. 12 ) j给次印刷11坡1- 80 .: f介Q.39 元11 80. :l:, IS .;-: 15169. 1-5314 斗,t ,