SN T 2190-2008 进出口动物源性食品中非甾体炎抗炎药残留量检测方法.液相色谱-质谱 质谱法.pdf

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资源描述

1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口动物源性食品中非甾体类抗炎药残留量检测方法液相色谱质谱质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狉犲狊犻犱狌犲狊狅犳狀狅狀狊狋犲狉狅犻犱犪犾犪狀狋犻犻狀犳犾犪犿犿犪狋狅狉狔犱狉狌犵狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犔犆犕犛犕犛犿犲狋犺狅犱发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准的附录为规范性附录,附录和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中国检验检疫科学研究院和中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人:于静、

2、彭涛、代汉慧、李建中、安娟、林维宣、岳振峰、唐英章。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖犜进出口动物源性食品中非甾体类抗炎药残留量检测方法液相色谱质谱质谱法范围本标准规定了进出口动物源性食品中种非甾体类抗炎药残留量的液相色谱质谱质谱测定方法。本标准适用于牛肉、猪肝、兔肝、牛奶和鸡蛋中对乙酰氨基酚、邻乙酰水杨酸(残留标示物:水杨酸)、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、非诺洛芬、甲芬那酸、萘普生、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、氟比洛芬、萘丁美酮、舒林酸、托美汀、吲哚美辛和苯基丁氮酮残留量的检测。方法提要用乙腈提取试样中残留的非甾体类抗炎药,经正己烷去除脂肪后,采用液相色

3、谱质谱质谱检测,外标法定量。试剂和材料除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为去离子水或相当纯度的水。乙腈:高效液相色谱级。正己烷:高效液相色谱级。甲醇:高效液相色谱级。甲酸:高效液相色谱级。乙酸铵。无水硫酸钠:灼烧,置于干燥器中备用。乙腈饱和的正己烷:乙腈()中加入正己烷(),充分振荡后,静置分层,取上层液体。甲酸水溶液(含乙酸铵):准确量取甲酸()和称取乙酸铵()于容量瓶中,用水定容至。稀释液:甲酸水溶液(含乙酸铵)()乙腈(,体积比)。标准品:对乙酰氨基酚、水杨酸、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、非诺洛芬、甲芬那酸、萘普生、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、氟比洛芬、萘丁美

4、酮、舒林酸、托美汀、吲哚美辛和苯基丁氮酮,纯度大于等于。标准物质信息见附录表。标准储备溶液:称取各药物标准品()(精确至),用乙腈溶解,配制成浓度为的标准储备溶液,冷冻避光保存。中间标准溶液:分别移取单个药物的标准储备液于容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配制成浓度为的中间标准溶液,冷藏避光保存。混合标准工作溶液:根据需要用稀释液()稀释中间标准溶液()成适合浓度的混合标准工作溶液,现用现配。微孔滤膜:,有机相。犛犖犜仪器和设备液相色谱质谱质谱仪:配备电喷雾离子源()。组织捣碎机。天平:感量为和。均质器:。振荡器。离心机:。减压浓缩仪。超声波水浴。涡旋混合器。具塞离心管:聚四氟乙烯,。试样制备与保存

5、牛肉、猪肝、兔肝从原始样品取出有代表性样品约,用组织捣碎机充分捣碎混匀,均分成两份,分别装入洁净容器作为试样,密封,并标明标记。将试样置于冷冻避光保存。牛奶从原始样品取出有代表性样品约,充分混匀,均分成两份,分别装入洁净容器作为试样,密封,并标明标记。将试样置于冷藏避光保存。鸡蛋从原始样品取出有代表性样品约,去壳后用组织捣碎机搅拌充分混匀,均分成两份,分别装入洁净容器作为试样,密封,并标明标记。将试样置于冷藏避光保存。在制样的操作过程中,应防止样品污染或发生残留物含量的变化。测定步骤提取和净化称取约试样(精确至)于离心管中,加入适量无水硫酸钠(),再加入乙腈,用均质器以均质,再用振荡器振摇提取

6、后,离心,收集上清液于分液漏斗中。残渣用乙腈再提取一次。合并上清液,加入乙腈饱和后的正己烷(),振荡,静置,收集下层液体。水浴中减压浓缩至近干,残留物依次用乙腈、和甲酸水溶液(含乙酸铵)()溶解,超声波水浴助溶后,转移至刻度试管,用甲酸水溶液(含乙酸铵)定容到,再加入乙腈饱和后的正己烷混匀后静置,取下层液体,离心后过微孔滤膜(),待测定。基质混合标准溶液的制备称取份约阴性试样(精确至)于离心管中,按照标准曲线最终定容浓度分别加入中间标准溶液()或混合标准工作溶液(),余下操作同。测定液相色谱条件色谱柱:,(内径),或相当者。流动相及洗脱条件(梯度为线性变化)见表。柱温:。流速:。进样量:。犛犖

7、犜质谱条件参见附录,其中氮气和氩气纯度均大于等于。表液相色谱洗脱条件时间乙腈甲酸水溶液(含乙酸铵)色谱测定根据样液中待测物的含量,选定浓度相近的混合基质标准溶液,待测样液中非甾体类抗炎药的响应值应在仪器检测的线性范围内。对混合基质标准溶液及样液()等体积参插进样测定。在上述仪器条件下,种非甾体类抗炎药的保留时间参见附录表。液相色谱质谱质谱色谱图参见附录图。定性测定按照上述条件测定样品和混合基质标准工作液,如果检测的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致,允许偏差小于;定性离子对的相对丰度与浓度相当混合基质标准工作液的相对丰度一致,相对丰度偏差不超过表的规定,则可判断样品中存在相应的被测物。

8、表定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差空白试验除不加试样外,按上述测定步骤进行。结果计算和表达试样中的残留含量,按式()计算,计算结果需将空白值扣除。犡犻犃犮犞犃犿()式中:犡犻试样中残留药物含量,单位为毫克每千克();犃样液中药物的峰面积;犮基质标准溶液中药物的浓度,单位为纳克每毫升();犞样液最终定容体积,单位为毫升();犃基质标准溶液中药物的峰面积;犿最终样液所代表的试样质量,单位为克()。测定低限和回收率测定低限本标准的测定低限为:吡罗昔康、托美汀、酮洛芬、氟尼辛:;对乙酰氨基酚、舒林酸、美洛昔康、氟比洛芬、吲哚美辛、双氯芬酸、苯基丁氮酮、甲芬那酸:犛犖犜;邻

9、乙酰水杨酸(残留标示物:水杨酸)、二氟尼柳、非诺洛芬、布洛芬、萘丁美酮、托芬那酸:;萘普生:;卡洛芬:。回收率见表。表种非甾体类抗炎药添加回收率(狀)化合物添加浓度()回收率范围猪肝兔肝鸡蛋牛奶牛肉对乙酰氨基酚水杨酸吡罗昔康舒林酸托美汀酮洛芬萘普生美洛昔康氟尼辛二氟尼柳非诺洛芬布洛芬氟比洛芬犛犖犜表(续)化合物添加浓度()回收率范围猪肝兔肝鸡蛋牛奶牛肉卡洛芬萘丁美酮吲哚美辛双氯芬酸苯基丁氮酮甲芬那酸托芬那酸犛犖犜附录犃(规范性附录)标准物质信息表犃非甾体类抗炎药的基本信息英文名称中文名称号结构式分子式相对分子质量邻乙酰水杨酸水杨酸对乙酰氨基酚卡洛芬酮洛芬托芬那酸美洛昔康犛犖犜表犃(续)英文名称

10、中文名称号结构式分子式相对分子质量氟尼辛布洛芬非诺洛芬甲芬那酸萘普生双氯芬酸吡罗昔康二氟尼柳氟比洛芬犛犖犜表犃(续)英文名称中文名称号结构式分子式相对分子质量萘丁美酮舒林酸托美汀吲哚美辛苯基丁氮酮犛犖犜附录犅)(资料性附录)质谱条件表犅质谱条件电离方式毛细管电压源温度去溶剂温度锥孔气流氮气,去溶剂气流氮气,碰撞气压氩气,监测模式多反应监测表犅多反应监测条件化合物电离方式母离子子离子驻留时间锥孔电压碰撞能量保留时间对乙酰氨基酚水杨酸吡罗昔康舒林酸托美汀酮洛芬萘普生美洛昔康氟尼辛二氟尼柳)附录所列参数是在质谱仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试采

11、用不同厂家或型号的仪器。犛犖犜表犅(续)化合物电离方式母离子子离子驻留时间锥孔电压碰撞能量保留时间非诺洛芬布洛芬氟比洛芬卡洛芬萘丁美酮吲哚美辛双氯芬酸苯基丁氮酮甲芬那酸托芬那酸离子用于定量。犛犖犜附录犆(资料性附录)标准物质质量色谱图图犆种非甾体类抗炎药液相色谱质谱质谱多反应监测色谱图犛犖犜图犆(续)犛犖犜图犆(续)犛犖犜图犆(续)犛犖犜犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犲犃犻狊狀狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犲,犪狀狀犲狓犲狊犅犪狀犱犆狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犲狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犼狌狉犻狊犱犻犮狋犻狅狀

12、狅犳狋犺犲犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犆犺犻狀犲狊犲犃犮犪犱犲犿狔狅犳犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犪狀犱犔犻犪狅狀犻狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳犘犚犆犪狀犱犛犺犲狀狕犺犲狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳犘犚犆犕犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲:犢狌犑犻狀犵,犘犲狀犵犜犪狅,犇犪犻犎犪狀犺狌犻,

13、犔犻犑犻犪狀狕犺狅狀犵,犃狀犼狌犪狀,犔犻狀犠犲犻狓狌犪狀,犢狌犲犣犺犲狀犳犲狀犵犪狀犱犜犪狀犵犢犻狀犵狕犺犪狀犵犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犈狀狋狉狔犈狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲犖狅狋犲:犜犺犻狊犈狀犵犾犻狊犺犞犲狉狊犻狅狀,犪狋狉犪狀狊犾犪狋犻狅狀犳狉狅犿狋犺犲犆犺犻狀犲狊犲狋犲狓狋,犻狊狊狅犾犲犾狔犳狅狉犵狌犻犱犪狀犮犲犛犖犜犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狉犲狊犻犱狌犲狊狅犳狀狅狀狊狋犲狉狅犻犱犪犾犪狀狋犻犻狀

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15、犮犻犱(犿犪狉犽犲狉狉犲狊犻犱狌犲:犛犪犾犻犮狔犾犻犮犪犮犻犱),犆犪狉狆狉狅犳犲狀,犓犲狋狅狆狉狅犳犲狀,犜狅犾犳犲狀犪犿犻犮犪犮犻犱,犕犲犾狅狓犻犮犪犿,犉犾狌狀犻狓犻狀,犐犫狌狆狉狅犳犲狀,犉犲狀狅狆狉狅犳犲狀,犕犲犳犲狀犪犿犻犮犪犮犻犱,犖犪狆狉狅狓犲狀,犇犻犮犾狅犳犲狀犪犮,犘犻狉狅狓犻犮犪犿,犇犻犳犾狌狀犻狊犪犾,犉犾狌狉犫犻狆狉狅犳犲狀,犖犪犫狌犿犲狋狅狀犲,犛狌犾犻狀犱犪犮,犜狅犾犿犲狋犻狀,犐狀犱狅犿犲狋犪犮犻狀犪狀犱犘犺犲狀狔犾犫狌狋犪狕狅狀犲犻狀犫犲犲犳,狊狑犻狀犲犾犻狏犲狉,狉犪犫犫犻狋犾犻狏犲狉,犿犻犾犽,犪狀犱犲犵犵犘狉犻狀犮犻狆犾犲犜犺犲犖犛犃犐犇狊狉犲狊犻犱狌犲

16、犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犻狊犲狓狋狉犪犮狋犲犱狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犃犳狋犲狉犱犲犳犪狋狋犲犱狑犻狋犺狀犺犲狓犪狀犲,狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狊狋犺犲狀犱犲狋犲狉犿犻狀犲犱犫狔犔犆犕犛犕犛,犪狀犱狇狌犪狀狋犻犳犻犲犱犫狔犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱,犪犾犾狉犲犵犲狀狋狊狌狊犲犱犪狉犲犃犚,犪狀犱狆狌狉犲“狑犪狋犲狉”犻狊狉犲犱犻狊狋犻犾犾犲犱狑犪狋犲狉犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲狀犺犲狓犪狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犕犲狋犺犪狀狅犾:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犉狅狉犿犻犮犪

17、犮犻犱:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犃犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲犃狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲:犅狌狉狀犪狋犳狅狉犺犪狀犱狋犺犲狀狊狋狅狉犲犻狀犪犱犲狊犻犮犮犪狋狅狉狀犺犲狓犪狀犲狊犪狋狌狉犪狋犲犱狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲:犃犱犱犿犔狀犺犲狓犪狀犲()犻狀狋狅犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犛犖犜(),犿犻狓犪犱犲狇狌犪狋犲犾狔,狋犺犲狀狑犪犻狋犳狅狉犱犲犾犪犿犻狀犪狋犻狅狀,狌狊犲狋犺犲狊狌犫狊狋狉犪狋犲犾犪狔犲狉犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀(犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵犿犿狅犾犔犪犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲):犃犱犱犿犔犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱()犪狀犱犵犪犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪

18、狋犲()犻狀狋狅犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽,狋犺犲狀犱犻犾狌狋犲狋狅犔狑犻狋犺狑犪狋犲狉犇犻犾狌狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀:犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀(犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵犿犿狅犾犔犪犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲)()犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲(,犞犞)犃犮犲狋犪犿犻狀狅狆犺犲狀,犛犪犾犻犮狔犾犻犮犪犮犻犱,犆犪狉狆狉狅犳犲狀,犓犲狋狅狆狉狅犳犲狀,犜狅犾犳犲狀犪犿犻犮犪犮犻犱,犕犲犾狅狓犻犮犪犿,犉犾狌狀犻狓犻狀,犐犫狌狆狉狅犳犲狀,犉犲狀狅狆狉狅犳犲狀,犕犲犳犲狀犪犿犻犮犪犮犻犱,犖犪狆狉狅狓犲狀,犇犻犮犾狅犳犲狀犪犮,犘犻狉狅狓犻犮犪犿,犇犻犳犾狌狀犻狊犪犾,犉犾狌狉犫犻狆狉

19、狅犳犲狀,犖犪犫狌犿犲狋狅狀犲,犛狌犾犻狀犱犪犮,犜狅犾犿犲狋犻狀,犐狀犱狅犿犲狋犪犮犻狀犪狀犱犘犺犲狀狔犾犫狌狋犪狕狅狀犲犛狋犪狀犱犪狉犱狊:犘狌狉犻狋狔犗狋犺犲狉犻狀犳狅狉犿犪狋犻狅狀狊犲犲犪狀狀犲狓犃狋犪犫犾犲犃犛狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀:犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺犪狀犪犱犲狇狌犪狋犲犪犿狅狌狀狋狅犳犲犪犮犺狊狋犪狀犱犪狉犱()(犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅犿犵),犱犻狊狊狅犾狏犲犻狀犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犪狀犱狆狉犲狆犪狉犲犪狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犿犵犔犪狊狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀,狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犪狏狅犻犱犻狀犵狊狌狀犾犻犵犺狋犕犻犱犱犾犲狊

20、狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀:犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狋狉犪狀狊犳犲狉犿犔狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀犻狀狋狅犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽,狋犺犲狀犿犪犽犲狌狆狋狅犵狉犪犱狌犪狋犻狅狀狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲,狆狉犲狆犪狉犲犪狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犵犿犔犪狊狋犺犲犿犻犱犱犾犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀,狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犪狏狅犻犱犻狀犵狊狌狀犾犻犵犺狋犕犻狓狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀:犃犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲狉犲狇狌犻狉犲犿犲狀狋,犱犻犾狌狋犲狋犺犲犿犻犱犱犾犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀()狋狅犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犮狅狀犮犲狀狋

21、狉犪狋犻狅狀狑犻狋犺犱犻犾狌狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀()犼狌狊狋犫犲犳狅狉犲狌狊犲犕犲犿犫狉犪狀犲犳犻犾狋犲狉:犿,狅狉犵犪狀犻犮狋狔狆犲犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔,犲狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犲犾犲犮狋狉狅狊狆狉犪狔犻狅狀狊狅狌狉犮犲犜犻狊狊狌犲犫犾犲狀犱犲狉犅犪犾犪狀犮犲:犪犮犮狌狉犪犮狔:犵犪狀犱犵犎狅犿狅犵犲狀犻狕犲狉:狉犿犻狀犛犺犪犽犲狉犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲:狉犿犻狀犚狅狋犪狉狔狏犪犮狌狌犿犲狏犪狆狅狉犪狋狅狉犛犖犜犝犾狋狉犪狊狅狀犻犮狑犪狋犲狉犫犪狋犺犞狅狉狋犲狓犿犻狓犲狉犆犲狀狋狉犻犳

22、狌犵犲狋狌犫犲:犘狅犾狔狋犲狋狉犪犳犾狌狅狉狅犲狋犺狔犾犲狀犲,犿犔犛犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲犅犲犲犳,狊狑犻狀犲犾犻狏犲狉犪狀犱狉犪犫犫犻狋犾犻狏犲狉犃犾犾狆狉犻犿犪狉狔狊犪犿狆犾犲犻狊狉犲犱狌犮犲犱狋狅犵犪狊狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊犫犾犲狀犱犲犱犪狀犱犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱,犪狀犱狋犺犲狀犱犻狏犻犱犲犱犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊犈犪犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆犾犪犮犲犱犻狀犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狊狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾

23、犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犻狀犪狏狅犻犱犻狀犵狊狌狀犾犻犵犺狋犕犻犾犽犃犾犾狆狉犻犿犪狉狔狊犪犿狆犾犲犻狊狉犲犱狌犮犲犱狋狅犵犪狊狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱,犪狀犱狋犺犲狀犱犻狏犻犱犲犱犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊犈犪犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆犾犪犮犲犱犻狀犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狊狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犻狀犪狏狅犻犱犻狀犵狊狌狀犾犻犵犺狋犈犵犵犃犾犾狆狉犻犿犪狉狔狊犪犿狆犾犲犻狊狉犲犱狌犮犲犱狋狅犵犪

24、狊狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊狊犺犲犾犾犲犱犪狀犱犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱,犪狀犱狋犺犲狀犱犻狏犻犱犲犱犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊犈犪犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆犾犪犮犲犱犻狀犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狊狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲,狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犻狀犪狏狅犻犱犻狀犵狊狌狀犾犻犵犺狋犐狀狋犺犲犮狅狌狉狊犲狅犳狊犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀,狆狉犲犮犪狌狋犻狅狀狊狊犺狅狌犾犱犫犲狋犪犽犲狀狋狅犪狏狅犻犱犮狅狀狋犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅狉犪狀狔犳犪犮狋狅狉狊

25、狑犺犻犮犺犿犪狔犮犪狌狊犲狋犺犲犮犺犪狀犵犲狅犳狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋犘狉狅犮犲犱狌狉犲犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪狀犱犮犾犲犪狀狌狆犠犲犻犵犺犪犫狅狌狋犵(犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅犵)狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅犪犿犔狆犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲,犪犱犱犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犪狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲()狋狅犪犫狊狅狉犫狑犪狋犲狉狅犳狋犺犲狊犪犿狆犾犲,犪狀犱狋犺犲狀犪犱犱犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犻狀狋狅狋犺犲犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲犎狅犿狅犵犲狀犻狕犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀犅犲犳狅狉犲犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀,狊犺犪犽犲犳狅狉犿犻狀

26、犜狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋犻狀狋狅犪犿犔狊犲狆犪狉犪狋犻狀犵犳狌狀狀犲犾犈狓狋狉犪犮狋狋犺犲犾犲犪狏犻狀犵狊狑犻狋犺犪狀狅狋犺犲狉犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲,犪狀犱狋犺犲狀犮狅犿犫犻狀犲狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋犃犱犱犿犔狀犺犲狓犪狀犲狊犪狋狌狉犪狋犲犱狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲()犛犺犪犽犲犳狅狉犿犻狀犪狀犱狋犺犲狀狑犪犻狋犳狅狉犿犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲狊狌犫狊狋狉犪狋犲犾犪狔犲狉,犪狀犱犛犖犜犲狏犪狆狅狉犪狋犲狋狅狀犲犪狉犾狔犱狉狔狀犲狊狊犻狀狑犪狋犲狉犫犪狋犺狌狀犱犲狉狏犪犮狌狌犿犜犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狊犱犻狊狊狅犾狏犲犱犫狔犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲,犿

27、犔犪狀犱犿犔犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀(犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵犿犿狅犾犔犪犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲)()犻狀狊犲狇狌犲狀犮犲,犪狊狊犻狊狋犲犱犫狔狌犾狋狉犪狊狅狀犻犮狑犪狋犲狉犫犪狋犺犳狅狉犮犪狊犃犾犾狋犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊狋狉犪狀狊犳犲狉狉犲犱狋狅犪犿犔犵狉犪犱狌犪狋犲犱犮狌狏犲狋狋犲,狋犺犲狀犿犪犽犲狌狆狋狅犿犔狑犻狋犺犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀(犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵犿犿狅犾犔犪犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲)犃犱犱犿犔狀犺犲狓犪狀犲狊犪狋狌狉犪狋犲犱狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲,狏狅狉狋犲狓犳狅狉狊,犪狀犱狋犺犲狀犮狅犾犾犲犮狋狋犺犲狊狌犫狊狋狉犪狋犲犾犪狔犲

28、狉犉犻犾狋狉犪狋犲狋犺狉狅狌犵犺犪犿犲犿犫狉犪狀犲犳犻犾狋犲狉()犜犺犲犳犻犾狋狉犪狋犲犻狊狉犲犪犱狔犳狅狉犔犆犕犛犕犛犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犕犪狋狉犻狓犿犻狓狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犠犲犻犵犺犳犻狏犲狀犲犵犪狋犻狏犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犻狀狋狅犳犻狏犲犿犔狆犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲狊,犲犪犮犺狅狀犲犪犫狅狌狋犵(犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅犵)犛狆犻犽犲犿犻犱犱犾犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀()狅狉犿犻狓狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀()犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犳犻狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犮狌狉狏犲犉狅犾犾狅狑犻狀犵狅狆犲狉犪狋犻狅狀犻狊狊犪犿犲犪狊犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀

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