1、中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验小肠结肠炎耶尔森氏菌检验Microbiological examination of food hygiene Examination of Y ersinia enterocolitica 1 主题内容与适用范围本标准规定了小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。本标准适用于食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。2 51用标准GB 4789. 28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3. 1 温箱z包括41，26士1，361三种。3. 2 样品均质器。3. 3 无菌平皿。3.4 灭菌吸管g包括1mL,5 mL及10mL兰种，带橡胶乳头的吸管数只。
2、3. 5 pH试纸：PH范围为6.0 8. 0。3. 6显微镜。3. 7三角瓶。3. 8玻片染色缸。4培弊基和试剂4. 1 改良磷酸盐缓冲液PSB：按GB4789. 28中4.46规定。4. 2 CIN-1培养基：按GB4789. 28中4.47规定。4. 3 改良Y培养基z按GB4789. 28中4.48规定。4. 4 改良克氏双糖g按GB4789. 28中4.49规定。4. 5 山梨醇、鼠李糖、煎糖、甘露醇等发酵管s按GB4789. 28中3.2规定。4.6 鸟氨酸脱竣酶肉汤g按GB4789. 28中3.12规定。4. 7 半固体琼脂z按GB4789. 28中4.30规定。4.8 V-P试
3、剂g按GB4789. 28中3.4规定4. 9无菌矿物油。4. 10 碱处理液，o.5%氯化物0.5%氢氧化饵混合液。4. 11 尿素培养基：按GB4789. 28中4.38规定。中华人民共和国卫生部199403 18批准182 GB 4789. 8-94 代替GB4789. 8一841994 09 01实施GB 4789. 594 5检验程序小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序如下z液一冲缓JU盐E酸A碗豆样帧tL寸1检阳t;l 2: 一-L- m一g- 5E ZE 肉且真制品，真他食晶碱扯理.15,4,5皿L+o.SmL样液接种CIN-I，改良Y培挥基26C,48h 挑取可疑菌事接种改良克民双糖2
4、6 24h 26C 2 4h 半固体26C.24h137.24h 民6操作步骤6. 1 样品的采集和处理g与沙门氏菌食物中毒的采集和处理相同。6.2 增菌培养g将食物样品与改良的磷酸盐缓冲液增菌液以1: 10的比例混合，置4冰箱进行冷增菌。6.3 碱处理z将肉及其制品的冷增菌液o.5 mL与碱处理液4.5 mL混合15S0 6.4 分离培养z将冷增菌液和碱处理的冷增菌液分别接种CINI和改良Y培养基，于26C48h培养后，在CINI上挑取红色牛眼状菌落，在改良Y上挑取无色透明、不粘稠的菌落，进行进一步的鉴定。6. 5 改良克氏双糖试验s将上述可疑菌落接种改良可氏双糖管，于2624h培养，将斜面
5、和底部皆变黄者做进一步的生化鉴定。6.6尿素酶试验和动力观察z将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养基上，注意接种量要大，挑取一接种环，振摇几秒钟，放置于26培养24h，然后将阳性者接种两管半固体，分别放置26和183 GB 4 7 89. 8二9437孵箱，培养24h检查，如在26有动力者可进行镜检和进一步的生化试验。6. 7 染色镜检z将上述可疑菌落做涂片染色，进行显微镜观察，呈革兰氏阴性球杆菌，有时呈椭圆或杆状，大小为0.8 3. 0 m 0. 8 m者。6.8 生化特性z将上述可疑的菌落做进一步的生化试验。所有的生化反应皆在26培养。本菌的主要生化特性以及与其他菌的区别见下表。小肠
6、结肠炎耶尔森氏菌与其他相似菌的生化性状鉴别表项目小肠结肠炎中间型耶弗氏耶克氏耶假结核耶鼠疫耶耶尔森氏菌尔森氏菌尔森氏菌尔森民菌尔森氏菌尔森民菌动力26c J 十十十十+ 尿素酶+ + + + + V-P试验（26十十十鸟氨酸脱嫂酶十+ + + 煎糖d + + 棉子糖十d 山梨醇十+ + 十甘露醇十十+ + + + 鼠李糖+ + + 注2十阳性，阴性，d有不同生化型。6. 9 血清型鉴定：除进行生化鉴定外，亦可做血清型鉴定。目前国内可生产27种0型血清因子，供各地使用。具体操作方法与沙门氏菌。因子血清分型相同。附加说明g本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人王淑颖、周桂莲。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。184
