1、ICS 65.020.30 B 41 毒国中华人民共和国国家标准G/T 20443-2006 鸡组织中己烯雌酣残留的测定高效液相色谱-电化学检测器法Method for the determination of diethylstilbestrol in chicken tissue- High performance liquid chromatography with electrochemical detection 061214000021 2006-08-28发布2006-11-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局也士中国国家标准化管理委员会.Q(.IJ GB/T 2044
2、3-2006 前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位:农业部畜禽产品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人:杨清峰、吴银良、薛毅、单吉浩、李卫东、王海、刘勇军。I 1 范围鸡组织中己烯雌盼残留的测定高效液相色谱-电化学检测器法G/T 20443-2006 本标准规定了鸡组织中己烯雌酣残留量测定的高效液相色谱-电化学检测器方法。本标准适用于鸡组织中(鸡肌肉和鸡肝脏)己烯雌酣残留量的测定。2 原理鸡组织中的己烯雌酣经叔丁基甲基酷提取、C18柱净化，甲醇和水的混合液洗脱。以甲醇磷酸盐缓冲液(pH3.5)为流动相，用高效液相色谱电化学检测器法测定，外标法
3、定量。电化学检测器对可氧化还原的化合物具有很高的灵敏度，利用这一特点，可测出痕量的己烯雌酣。3 试剂和材料所有试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。3. 1 叔丁基甲基酷:色谱纯。3.2 甲醇z色谱纯。3.3 氢氧化铀溶液;1moL/L水榕液。3.4 乙酸。3.5 乙酸溶液:体积分数为20%水榕液。3.6 磷酸盐缓冲液;0.05moL/L磷酸二氢饵水溶液，pH3.5 0 3. 7 己烯雌酣标准品z纯度99%。3.8 己烯雌酣标准储备液z准确称取一定量的己烯雌酣标准品于棕色容量瓶中，用甲醇溶解后定容至刻度，得100g/mL的标准储备液。储存于40C冰箱中，使用前恢复至室温。3.9 己烯雌酣
4、标准工作液:用前将储备液用甲醇稀释为50ng/ mL 2 000 ng/ mL的浓度系列。4 仪器和设备4. 1 高效液相色谱仪，配电化学检测器。4.2 均质器。4.3 固相萃取装置。4.4 固相萃取小柱;C18柱，容积为6mL。4.5 旋转蒸发仪。4.6 心形瓶;100mL。4. 7 分液漏斗;100mL。4.8 酸度计。4.9 涡旋混均器。4. 10 真空泵。4. 11 样品浓缩仪。5 样晶处理样品采集后于10000r/min下匀浆(或者将样品尽量粉碎)，于一200C以下冷冻保存，分析用时将其GB/T 20443-2006 解冻后使用。6 分析步骤6.1 提取称取试样10g(精确至0.01
5、g)于50mL带盖离心管中，加入15mL叔丁基甲基酶，用均质器以10 000 r/min的速度均质15s后以3000 r/min的速度离心10min.收集上清液，再用15mL叔丁基甲基酷提取一次，合并有机相至100mL分液漏斗中，加入1moL/L的氢氧化铀溶液10mL.剧烈振摇1 min.静置分层30min.收集水相并用体积分数为20%的乙酸调pH至4.5.备用。6.2 净化依次用5mL甲醇、5mL水6.1中备用液过柱，弃去流出d再用4蒸发仪浓缩至约1mL后效液相色谱-电化学检6. 3 Y!U定60+40J; 流速:1. 0 电化学检进样量:6.3.4 结果计算用色谱数据处式中:X一一试样中己
6、烯雌酣A一一样液中己烯雌酣峰面As一一标准工作液中己烯雌酣峰C一一标准工作液中己烯雌盼的质量浓度，单位为微克每升(g/L); V一一样液最终定容体积，单位为毫升(mL); m一一最终样液所相当的试样质量，单位为克(g)。7 检测限、回收率7. 1 检测限本方法在鸡组织(鸡肉和鸡肝)中的检测限为1g/险。7.2 回收率本方法在1g/kg100g/kg添加浓度的回收率为60%1l0%。2 用300L流动相溶解供高液和样液中己烯定。在上述色谱. ( 1 ) 附录A(资料性附录)标准晶色谱困己烯雌酣标准品的液相色谱图见图A.L40.00. mV 35.00 30.00 25.00 20.00 15.0
7、0 DES 10.00 5.00 0.00 |叶-、-5.00 2.00 4.00 6.00 8.00 圄A.l己烯雌酣标准晶的液相色i曾圄GB/T 20443-2006 町1In10.00 12.00 OON|的叮叮ONH阁。华人民共和国家标准鸡组织中己烯雌酣残留的测定高效液相色谱-电化学检测器法GB/T 20443-2006 国出，当岳中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤印张O.5 字数6千字2006年11月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2006年11月第一版7巳如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价8.00晤书号:155066 -28258 GB/T 20443-2006
