1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准2003-08-11发布GB/T 5009.128-2003 代替GB/T15206-1994 食品中胆固醇的测定Determination of chole唱terinin foods 2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员高G/T 5009.128-2003 136 前言本标准代替GB/T15206-1994食品中脱阁醇的测定方法。本标准与GB/T15206-1994相比主要修改如下g一一-修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中胆固醇的测定h一一按GB/T20001. 4-2001标准编写规则第4部
2、分g化学分析方法对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位z中国预防医学科学院营营养与食品卫生研究所e本标准主要起草人2玉春荣、张坚、王苹、辈革文沟.盖在标准于1约4年蓄次发布，本次为第一次修订.食品中能噩蕃的满定1 范题本标准规定了用分光光度计测定各类动物性食品中胆固酶的方法。本标准适用于各类动物性食品中胆固碎的测定.2原理GB/T 5009.128-2003 当固醇类化合物与峻作用树，可脱水并发生聚合反应，产线颜色物质。因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁镀试剂作为显色剂，测定食品中应渴望事豹合t组3 试押j3.1 石油截。3.2 无水乙撼。
3、3.3.浓硫酸。3.4 冰乙重量2优级络组3.5磷酸.3.6 胆固醇标准物质。3.7 胆固蹲标准液。3.7.1 豆豆黯董事标准储备液。mg/mU，准确称草草翅题董事100m草，溶于冰乙理庭中，并定容釜100mL。此液至少在2个月内保持稳定。3.7.2 但西德标准使用液(100g/mLl，吸取腿固醇标准储备液10mL.用冰乙酸定容窒100mL。此液湾对i施对配制。3.8 铁矶显色lfiJ.3.8.1 铁矶储备液榕解4.463g硫酸铁锁FeNH.(SO.)， H，O于100mL8S%礁酸中，贮子干燥器内，此浪在室浪中稳定.3.8.2 铁哥在毅色液z吸浓储备液10mL，用浓然重量定容至1古自由L.贯
4、主子干燥器内，以防吸水。3.9 氢氧化树溶液(500g!Ll，称取50g氢氧化掷，用蒸馆水溶解，并稀释至100mL. 3.10 氯化纳溶液(50g/L) ，称取5g氯化锁，用蒸溜水浴麟，并稀释3100 mL. 3.11 锅瓶氯气g纯度99.约%.4 仪器4.1 实验室常用设备。4.2 721型分光光度计。4.3 电热恒混水浴回4.4 电动振荡着警a4.5 具玻寨试管z体积10mL、25mL. 5 分析步骤5.1 距离薄标准磁盘量吸取胆固静标准使用液。.0、0.5、1.0，1.5、2.0mL分别援子10mL试管内，在各管内加入冰乙酸137 GB/T 5009.128-2003 使总体积雪达4mL
5、.沿管壁恕入2mL铁碗豆草包液，滚匀，在15min-部由m内，在560nm-575怒目泼伏下比色b以JffiJM董事标准浓度为横坐标，吸光度古董为纵坐标做标准涵线g5.2 测定5.2.1 食品脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏黯肪提取法，研磨授提法和罗高氏法提取脑肪并计算出每100g食品中的脂肪含量甸5.2.2 食晶胆固酶的测定将提取的油脂3滴-4滴(约含胆固醇300月-500g)，置于25mL试管内，准确记法其质量。加入4mL无水乙酶，0.5mL 500 g/L氢氧化仰溶液，在65(;恒温水浴中皂化1h.皂化时每隔20min-30 min振摇一次使皂化完全。皂化完毕，取出试管，冷却。加入
6、3mL 50 g/L氯化锅溶液，10mL石油礁，盖章紧玻裹，在电动振荡器上振摇2mn，静进分层一般约需1h以上)。取上层石油磁液2mL，置于10mL具汲鑫t武警内，在65(;水浴中用氮气吹干，加入4mL冰乙酸，2 mL铁哥瓦墨色液，混匀，鼓置15min后在560nm-575 nm波长下比色;混得吸光度，在标准蓝蓝线上查出丰富皮的主主题董事含量。S 综果计算按下式计算g中gX一一试样中胆固醇含量，单位为毫克每:fl(mg/100g); A一一测得的吸光度值在胆固醇标准幽线上的胆固醇含量，单位为微克仰自); VJ-一石油隧总体积，单位为毫升(mL);V，一取出的石油隧体积，单位为毫升(mL)，m一一-称取食品油腾试祥量，单位为:fl(g); C一试祥中f的量含量，单位为克每:l(g!100g); 王一一一折算成每100g试挥中理题董事毫克数。1000 测定结果表示到小数点后一位.7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。138
