1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准2003-08-11发布GB/T 5009.141-2003 代替GB/T16346-1996 食品中诱惑红的测定Determination of allura red in foods 2004-01-的实施中华人民共和困卫生部发布中国国家标准化管理委员会GB/T 5009.141-2003 前言本标准代替GB/T16346-1996食品中诱惑红的测定。本标准按GB/T20001. 4-2001(标准编写规则第4部分z化学分析方法对原标准的结构进行了修改。210 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位z卫生部食品卫生监督检
2、验所、河北省卫生防疫站、嘟嘟市卫生防疫站。本标准主要起草人:杨祖英、李良学、焦淑婷、玉平、贾丽华。原标准于1996年首次发布，本次为第一次修订。GB/T 5009.141-2003 食品中诱惑缸的测定1 范翻本标准规定了食品中诱惑红的测定方法。本标准适用于糖果包衣等食品中诱惑红的测定。本标准的取祥量为10g 时，检ttl限为25mg/险。线性范E曾为G白喜/L-12mg/Lo2 原现诱惑红在酸性条件下被聚酸胶粉吸附，而在碱候条件下解吸附，再用纸色谱法进行分离后，与标准比较定性、定量。3试剂3. 1 :fi冶磁z沸程30C-60C。3.2 甲醇。3.3 黛酷胶粉(尼龙6):200目。3.4硫酸，
3、1十1告。3.5 50 g/L氢氧化销。3.6 海沙z先用量最酸0+10)煮沸15min，用水洗至中俭，再用氢氧化纳(50g/L)煮沸15min，用水洗至中散，再于105C干燥，储于具裹瓶中保存，备用.3.7 50% (体积分数)乙醉溶液.3.8 乙董事-氨溶液s京2mL的氨水，如70%体积分数)乙董事至100mL。3.9 pH6的水:ffl20%的拧襟酸满至pH6。3.10 200 g/L拧攘酸溶液。3.11 100 g/L铐酸镇滚滚给3.12 诱惑红的标准溶液s准确称取0.025日诱惑红，加水溶解，并定容至25mL.即得1mg/mLo 3.13诱惑红的标准使用溶液g吸取诱惑红的标准溶液5.
4、0mL于50mL容量瓶中，加水稀释到50 mL，ep得0.1mg/mL。3.14 展开剂3.14.1 了翻十丙醇十水+氨水(7+3+3十0.5).3.14.2 正丁醇+无水乙醇+1%策水(6十2+3)03.14.3 2.5%持橡酸销十氨水+乙醉(8+1+2)。4 仪瓣4.1 可见分光光度计。4.2 微量注射器，10L、50Lo4.3 展开槽。4.4 也吹风机。4.5 滤纸:中速滤纸，纸包谱用.4.6 饭温水浴锅4.7 台式离心机。211 GB/T 5009.141-2003 5 分析步骤5.1 试样的处理5. 1. 1 汽水2将试样加热去二氧化碳后，称取10.0g试样于烧杯中，然后用20%拧橡
5、酸调pH呈酸性，加人O.5 gl. 0 g聚酷胶粉吸附色素，将吸附色素的聚酷胶粉全部转到漏斗中过滤，用pH4的酸性热水洗涤多次(约200mL)，以洗去糖等物质。若有天然色素，用甲醇-甲酸溶液洗涤1次3次，每次20 mL，至洗液无色为止。再用70C的水多次洗涤至流出液中性。洗涤过程必需充分搅拌然后用乙醇氨水溶分次解吸色素，收集全部解吸液，于水浴上躯除氨，蒸发至2mL左右，转入5mL的容量瓶中，用50%的乙醇分次洗涤蒸发皿，洗涤液并人5mL的容量瓶中，用50%的乙醇定容至刻度.此液留作纸色谱用。5. 1. 2 硬糖g称取10.0g的已粉碎的试样，加30mL的水，温热溶解，若试样溶液的pH值较高，用
6、拧橡酸癖液(3.10)调至pH4左右。以下按5.1. 1汽水中加人O.5 g1. 0 g加聚酷氨粉吸附.起操作。5. 1. 3 糕点:称取10.0g已粉碎的试样，加入30mL石油磁提取脂肪，共提三次，然后用电吹风吹干，倒人漏斗中，用乙醇-氨解吸色素，解吸液于水浴上蒸发至20mL，加入1mL的鸽酸销溶液沉淀蛋白，真空抽滤，用乙醇-氨解吸滤纸上的诱惑红，然后将滤液于水浴上挥去氨，调pH呈酸性，以下按5.1.1汽水中加入0.5g1.0 g禀酷胶粉吸附色素.起操作.5. 1. 4 冰漠淋g称取10.0g已均匀的试样于烧杯中，加入20g海沙15mL石油隧提去脂肪，提取2次，倾去石油酶，然后在50C的水浴
7、上挥去石油酶，再加人乙醇-氨解吸液解吸诱惑红，解吸液倒人100mL 的蒸发皿中，直至解吸液无色。将解吸液于水浴上挥去乙醇，使体积约为20mL时，加入1mL硫酸。+10)，1mL鸽酸销溶液沉淀蛋白，放置2min，然后用乙蹲-氨调至pH呈碱性，将榕液转人离心管中，5000r/min，离心15min，倾出上清液，于水裕上挥去乙醇，然后用拧橡酸溶液(3.10)调p日呈酸性，以下按5.1.1汽水中加入0.5g1.0 g聚酸胶粉吸附.起操作。5.2 定性取色谱用纸，在距底边2cm起始线上分别点3L10L的试样处理液、1mL色素标准液，分别按于盛有3.14. 1、3.14.2、3.14.3展开剂的展开捕中，
8、用上行法展开，待溶剂前沿展至15cm处，将滤纸取出空气中晾干，与标准斑比较定性。5.3 定量5.3.1 标准曲线的制备吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL诱感红标准使用液，分别置于10mL比色管中，各加水稀释到刻度.用1mL比色杯，以零管调零点，于波长500nm处，测定吸光度，绘制标准曲线。5.3.2 试样的测定取色谱用纸，在距离底边2cm的起始线上，点0.20mL试样处理液，从左到右点成条状。纸的右边点诱惑红的标准溶液1L，依法展开，取出晾干，将试样的色带剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入10mL的比色管中，加水稀释至刻度，混匀后，与标准管同时在500nm处，测定吸光度。6 结果计算试样中诱惑红的含量按下式计算z式中zx= AX1000 -mX V, X 1 000 x-一一试样中的诱惑红的含量，单位为克每千克(g/kg), 212 A一一测定用试样处理液中诱惑红的髦，单饺为毫克四g)多用一一试样的质援，单位为克(g); V，一一试样解吸后总体积，单位为毫升(mL);2一一试样纸层析用体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留二位有效数字。7 精密度GB/T 5009. 141-2003 在2重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对爱值不得超过算术平均值的10%，213
