1、JCS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.157-2003 食品中有机酸的测定Determination of organic acid in foods 20白，由-11发布2004蝇的-01实施中华人民持和国卫生变发布中随国家标准化管理委员刑GB/T 5009.157-2003 316 前言本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位g华西医科大学公共卫生学院.本标准主要起草，黎源倩、王光建、杨庆、杨元。GBjT 5009.157-2003 食品中有钱酸的j1Y定1 范因本标准规定了测定食品中有机酸(酒石酸、苹果酸、拧糠酸、丁二酸的高效液相色谱
2、法。本标准适用于果蔬及其制品、饮料等食品中有机酸含量的测定。本方法的检出限为z酒石酸O.1g/mL、苹果酸O.3g/mL、拧橡酸O.5g/mL，丁酸2.0g/mL。2 原混食品试辛辛经匀浆提取、离心后，祥液经0.3m滤蹊撼滤，以(NH.)，HPO，-H，PO，缓冲滚液(pH也币2.7)j号流动裙，路离效液招色谱法在c，窑色谱柱上分寓，于21告nm处经紫外捡瓣器被瓣，用蜂离草草串串黯积标准战线苦苦定有极酸的含量e3试IIJ本方法中所用试JfIJ均为分析纯，试验用水为囊蒸水或阅等纯度的水，经0.45m滤膜真空拍溅。3.1 80%乙畔。3.2 1 mol/L;磷酸氢二镀溶液。3.3 1 mol/L磷
3、酸.3.4 有机般标准溶液z称取酒石酸、苹果酸、拧橡磁备队5000 g;丁二酸0.1000 g，用超滤水溶解尉，定容350 mL。酒石酸、苹果酸、拧橡酸的浓度分别为10.0mg/mL，丁二酸为2.0mg/mL，此液为标准储备液。标准使用液s取5.00皿L标准储备液子50mL容量瓢中用超滤水稀释到费j度q酒石重量、苹果毅、狞襟梭的浓度分别为1.0mg!mL，了二重量为0.2mg/mL. 4 t立德4.1 级织撼碎事L4.2 饭混水浴籍。4.3 高效液相色谱仪，配紫外可见检测器。4.4 股股计。4.5 针头过滤器.0.3m合成纤维树脂滤膜。5 分听古怪I!5.1试样处理5. 1. 1 l目体试撑z
4、称取50g试祥于组织捣碎机中，加入100四L80%乙喜事，匀浆1mino取一定最匀浆相当于5革试撑以300号r/min离心10min分t挂上消液，转入50mL容量瓶中，残渣再用80%乙喜事洗涤两次，每次15四L.离心10min，合并上清液，主u80%乙董事至度，混匀，此液为提浓浓。取5.00mL 援取辑辈子董事发践中，在7号恒温水浴上蒸去乙董事，残碍物海1t蒸水定量转入10mL具塞比色管内，靠在人1 mol!L磷酸(H，PO，)O.2mL.患重蒸水定容我110mL.混匀。滚部分样液经内装0.3严m滤E盖章针头过滤器过滤，滤液供高效液相色谱分析用e317 GB/T 5009. 157-2003
5、5. 1. 2 液体试样g准确吸取5.00mL试样(若试样中含二氧化碳应先加热除去$若试样中含有人工合成色素应先加入聚酿胶粉于70C水浴中加热脱色，样液在3000 r/min下离心10min，再取上清液)，加入o.2 mL 1 mol/L磷酸，用重蒸水稀释至10mL，经0.3m滤膜过滤，滤液供分析用。6 测定6.1 色谱条件预柱:C18柱，10m，4.6mmX30 mmo 分析柱C18柱，5m，4.6mmX250 mmo 流动相.0.01mol/L磷酸氢二钱，用1mol/L磷酸调至pH=2.70，临用前用超声波脱气。流速.1mL/min. 进样量.20L。紫外检测器波长.210nm. 6.2
6、标准曲线的绘制取标准使用液0.50、1.00、2.00、5.00、10.00mL，加人O.2 mL 1 mol/L磷酸，用超滤水稀释至10 mL，混匀。进样20L，于210nm处测量峰高或峰面积，每个浓度重复进样2次3次，取平均值。以有机酸的浓度为横坐标，色谱峰高或峰面积的均值为纵坐标，绘制标准曲线或经过线性回归得出回归方程。6.3 试梓测定在与绘制标准曲线相同的色谱条件下，取20L试样液注入色谱仪，根据标准曲线或线性回归方程，求出样液中有机酸的浓度。7 结果计算试样中有机酸的浓度按下式计算2固体试样2V一一叭叭一-m c-X 液体试样2x= c ;x: .V1 一-V 式中gX 试样中有机酸
7、的含量，单位为毫克每千克(毫克每升)mg/kg(mg/L)，C一一由标准曲线或线性回归方程中求得样液中某有机酸的浓度，单位为微克每毫升(g/mL), V1一一试样的最后定容体积，单位为毫升(mL)，V 固体试样为提取液的总体积液体试样为用于分析的试样体积，单位为毫升(mL)，V2 分析用试样提取液的体积，单位为毫升(mL), m 试样的质量，单位为克(g)0 8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的9%。9 其他有机酸的标准溶液色谱图见图10318 1一吉普石薇，2学巢童，S一-2二酸s4一符橡酸$5-丁二酸.圈1标准溶液包销固GBjT 5009. 1572003 319
