1、ICS 67.040 C 53 B 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.163-2003 动物性食品中氨基硝酸醋类农药多组分残留高效液相色谱测定Determination of carbamate pesticides multiresidues in animal food明CHPLC)2003-08-11发布2004-01-的实施中华人民共如回卫生部发布中国国家标准化管理委员会GB/T 5009. 163-2003 前言本标准对应于WHO/GEMS/FOOD推荐的测定方法:Steinwandter，H. :农药残留和工业化学物的提取和分析通用方法.AnalChem(1985)322,
2、 752 754 0 本标准与WHO/GEMS/FOOD推荐的测定方法的一致性程度为非等效。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位2中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所、北京市卫生防疫站、卫生部食品卫生监督检验所。本标准主要起草人g李摔、王绪卿、吴国华、杨大进。;:-)7 GBjT 5009. 163-2003 苦i富沸灭威、速灭威、峡喃丹、甲荼威、异丙威为我国常用的一类氨基甲酸黯类农药。由于动物性食品基质的特殊性，试样净化是测定方法的关键技术之一。本标准提出了以凝胶渗透净化技术的动物性食品中涕灾戚、速灭威、峡喃丹、甲荼威、异丙威多组分残留最测定方法。:R GB/T 50
3、09. 163-2003 1 范罔动物性食品中氨基甲酸酶类农药多组分残留高效液相色i蕾测定本标准规定了.ffl离效液稽色谱法吉普定动物位食品中涕灭咸、速灭蓝蓝、攻母害;玲、凉菜咸、异w或残留量。本标准适用于肉类、蛋类及乳类食品中涕灾威、速lR!d、破嗨丹、甲主革戚、异丙威残留量测定。本方法检出限分别为涕灭威9.8g/烛，速灭威7.8g/k臣，唉喃丹7.3g/k碍，甲茶威3.2严g/kg.异丙威13.3g/kg，2 原藩试样经提取、净化、浓缩、定容，微孔滤膜过滤后边样，用反相离效液相色谱分离，紫外梭测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。3试lIlJ3.1 甲蹲重蒸。3.2 丙翻=重蒸。
4、3.3 乙酸乙黯，量蒸e3.4 环巳烧s重熬。3.5 氯化锵e3.6 X水硫酸跳。3.7 燕惚水z重燕园3.8 凝跤，Bio-BeadsS-X, 200 11-400吕蜀3.9 氨基甲酸酶类农药(NMCs)标准g涕灭戚、甲荼威、峡喃丹、速灭威、界丙威纯度均大于99%。3.10 NMCs标准溶液配制U，将五种NMCs分别以甲醉配成一定浓度的标准储备液，冰箱保存。使用前取标准储备液一定量，用甲蹲稀释配成混合标准应用液。5种NMCs的浓度分别为涕灭威6.0 mg/L、甲茶威5.0mg/L、峡喃丹5.0mg/L、速灭威10.0mg/L、异丙威10.0mg/L。导仪部4.1 高效液相谱仪2附紫外检测楼及
5、数据处理器。4.2 旋转蒸发仪。4.3 凝胶净化校t长50cm.内径2.5cm带m塞玻璃层析柱，校底垫少撞玻璃棉，用洗脱剂(乙酸乙醋+环己烧:1+1)浸泡过夜始凝泼以湿法装入校中，往床高约40cm，柱床始终保持在洗娩剂中。5 试桦制备蛋昌在去壳，和d!i主匀浆g肉品切块后，制成9号攘$乳品挂号匀后待瘤。6 分析步骤6.1 摄取与分配l : ) GB/T 5009. 163-2003 6. 1. 1 称取蛋类试样20g(精确到0.01g).于100mL具塞三角瓶中，加水5mL(视试样水分含量加水，使总水量约20go通常鲜蛋水分含量约75%.加水5mL即可).加40mL丙阁，振摇30min，加氯化
6、纳6g.充分摇匀，再加30mL二氯甲烧，振摇30mino取35mL上清液，经无水硫酸销滤于旋转蒸发瓶中，浓缩至约1mL.加2mL乙酸乙酶-环己烧(1十1)溶液再浓缩，如此重复3次，浓缩至约1mL。6. 1. 2 称取肉类试样20g(精确JJj0.01 g).加水6mL(视试样水分含量加水，使总水量约20g。通常鲜肉水分含量约70%.加水6mL即可).以下按照6.1.1蛋类试样的提取、分配步骤处理。6. 1. 3 称取乳类试样20g(精确到0.01go鲜乳不需加水，直接加丙朋提取。)以下按照6.1. 1蛋类试样的提取、分配步骤处理。6.2 净化将此浓缩液经凝胶往以乙酸乙醋-环己炕(1十1)溶液洗
7、脱，弃去。mL35mL流分，收集35mL 70 mL流分。将其旋转蒸发浓缩至约1mL.再经凝胶柱净化收集35mL70 mL流分，旋转蒸发浓缩，用氮气吹至约lmL.以乙酸乙酶定容至1mL.留待HPLC分析。6.3 高效液相色谐测定6.3.1 色谱条件6.3. 1. 1 色谱柱，AltimaC18 4. 6 mmX25 cmo 6.3. 1. 2 流动相，甲醇+水(60+40);流速0.5mL/mino 6.3. 1. 3 柱温，30OC。6. 3. 1. 4 紫外检测波长为210nm。6.3.2 测定将仪器调至最佳状态后，分别将5L混合标准溶液及试样净化液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高
8、或峰面积与标准比较定量。6.3.3 色谱图色谱图见图101 涕灭威$2 速灭威g3 峡喃丹$4-西维困$5 异丙威.:)1)0 困1氨基甲酸醋农药标准色谱固7 结果计算按下式计算=式中gX?_， X V 2 X 1000 mX V, X 1000 X 试祥中各农药的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), m 被测样液中各农药的含量，单位为纳克(ng), m 试样质量，单位为克(g), V，一一样液进样体积，单位为微升(L)，V2一一试样最后定容体积，单位为毫升(mL)，计算结果保留两位有效数字。8 精密度GB/T 5009.163-2003 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。卅1
