1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.18-2003 代替GBjT5009.18-1996 食c 日日中氟的测定Determination of fluorine in foods 2003-四-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员哥GB/T 5009.18一2003前古同本标准代替GB/T5009.18-1996(食品中氟的测定方法儿本标准与GB/T5009.181996相比主要修改如下z修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中氟的测定h按照GB/T20001. 4-2001(标准编写规则第4部分g化学分析方法
2、对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准第一法、第三法由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所、卫生部食品E生监督检验所负责起草。第二法由四川省绵阳地区卫生防疫站负责起草。本标准于1985年首次发布，于1996年第次修订，本次为第二次修订。144 GB/T 5009.18-2003 食品中氟的测定1 范围本标准规定了粮食、蔬菜、水果、豆类及其制品、肉、鱼、蛋等食品中氟的测定方法。本标准适用于食品中氟的测定。氟离子选择电极法不适用于脂肪含量高而又未经灰化的试样(如花生、肥肉等)。本方法检出限第一法为0.10mg/阳，第二法为1.25 mg/kg, 第一法扩散氟试剂
3、比色法2 原理食品中氟化物在扩散盒内与酸作用，产生氟化氢气体，经扩散被氢氧化纳吸收。氟离子与制(ill)、氟试JliJ(茜素氨竣络合剂)在适宜pH下生成蓝色三元络合物，颜色随氟离子浓度的增大而加深，用或不用含胶类有机溶剂提取，与标准系列比较定量。3试lfIJ本方法所用水均为不含氟的去离子水，试剂为分析纯，全部试剂贮于聚乙烯塑料瓶中。3.1 丙嗣。3.2 硫酸银硫酸溶液(20g/L) :称取2g硫酸银，溶于100mL硫酸(3十1)中。3.3 氢氧化纳-无水乙醇溶液(40g/L):取4g氢氧化销，溶于元水乙醇并稀释至100mL, 3.4 乙酸溶液(1mol/L)取3mL冰乙酸，加水稀释至50mL,
4、 3.5 茜素氨竣络合剂溶液称取0.19g茜素氨竣络合剂，加少量水及氢氧化纳溶液(40g/L)使其溶解，加O.125 g乙酸锅，用乙酸溶液(3.4)调节pH为5.0(红色)，加水稀释至500mL，置冰箱内保存。3.6 乙酸纳溶液(250g/L)。3. 7 硝酸钢溶液:称取0.22g硝酸娴，用少量乙酸溶液(3.4)溶解，加水至约450mL，用乙酸纳溶液(250 g/L)调节pH为5.0，再加水稀释至500mL，置冰箱内保存。3.8 缓冲液(pH4.7)称取30g无水乙酸钩，溶于400mL水中，加22mL冰乙酸，再缓缓加冰乙酸调节pH为4.7，然后加水稀释至500mL。3.9 二乙基苯胶异戊醇溶液
5、(5+100):量取25mL二乙基苯胶，溶于500mL异戊醇中。3.10 硝酸侯溶液(100g/L)。3.11 氢氧化纳溶液(40g/L):称取4g氢氧化锅，溶于水并稀释至100mL, 3.12 氟标准溶液z准确称取0.2210 g经95C105C干燥4h冷的氟化俐，溶于水，移入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。置冰箱中保存。此溶液每毫升相当于1.0 mg氟。3.13 氟标准使用液:吸取1.0 mL氟标准溶液，置于200mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于5.。g氟。3.14 困滤纸片把滤纸剪成14. 5 cm，浸于氢氧化纳(40g/L)元水乙醇溶液，于100C烘干、备用。4
6、 仪器4.1 塑料扩散盒:内径4.5cm，深2cm，盖内壁顶部光滑，并带有凸起的圈(盛放氢氧化饷吸收液用)，盖紧后不漏气。其他类型塑料盒亦可使用。145 GB/T 5009.18-2003 4, 2 恒温箱，55C士1C，4.3 可见分光光度计。4.4 酸度计。4.5 马弗炉。5 分析步骤5.1 扩做单色法5. 1. 1 试样处理5. 1. 1. 1 谷类试样:稻谷去壳，其他粮食除去可见杂质，取有代表性试样50g 100 g.粉碎，过40目筛。5. 1. 1. 2蔬菜、水果E取可食部分，洗净、晾干、切碎、混匀，称取100g200 g试样，80C鼓风干燥.粉碎，过40目筛，结果以鲜重表示，同时要
7、拥tl水分。5. 1. 1.3 特殊试样(含脂肪高、不易粉碎过筛的试样，如花生、肥肉、含糖分高的果实等)，称取研碎的试样1.00 g2. 00 g于瑞塌(镇、银、瓷等)内，加4mL硝酸楼溶液(100g/L)，加氢氧化锅溶液(100g/L) 使呈碱性，混匀后浸泡0.5h，将试样中的氟固定，然后在水浴上挥干，再加热炭化至不冒烟，再于600C马弗炉内灰化6h，待灰化完全，取出放冷，取灰分进行扩散。5. 1. 2 测定5.1.2.1 取塑料盒若干个，分别于盒盖中央加0.2mL氢氧化锅-无水乙醇溶液(40g/L)，在圈内均匀涂布，于55C士1C恒温箱中烘干，形成一层薄膜，取出备用。或把滤纸片(3.14)
8、贴于盒内。5. 1. 2. 2 称取1.00 g2. 00 g处理后的试祥子塑料盒内，加4mL水，使试祥均匀分布.不能结块。加4 mL硫酸银硫酸溶液(20g/L)，立即盖紧，轻轻摇匀。如试样经灰化处理，则先将灰分全部移人塑料盒内，用4mL水分数次将增塌洗净，洗液均倒入塑料盒内，并使灰分均匀分散，如增塌还未完全洗净，可加4mL硫酸银硫酸溶液(20g/L)于增揭内继续洗涤，将洗液倒入塑料盒内，立即盖紧，轻轻摇匀，置55C士1C恒温箱内保温20人5.1.2.3 分别于塑料盒内加。、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mL氟标准使用液(相当0、1.0 , 2. 0 , 4. 0、6.0、8.0问氟
9、)。补加水至4mL，各加(20g/L)硫酸银-硫酸溶液4mL，立即盖紧，轻轻摇匀(切勿将酸溅在盖上)，置恒温箱内保温20人5. 1. 2. 4 将盒取出，取下盒盖，分别用20mL水，少量多次地将盒盖内氢氧化纳薄膜溶解，用滴管小心完全地移入100mL分液漏斗中。5. 1. 2. 5 分别于分液漏斗中加3mL菌素氨竣络合剂溶液，3.0mL缓冲液，8.0mL丙酬，3.0mL硝酸惆溶液，13.0mL水，混匀，放置0min.各加人10.0mL二乙基苯胶-异戊醇(5+100)溶液，振摇2 min，待分层后，弃去水层，分出有机层，并用滤纸过滤于10mL带塞比色管中。5. 1. 2. 6 用1cm比色杯于58
10、0nm波长处以标准零管调节零点，那j吸光值绘制标准曲线，试样吸光值与曲线比较求得含量。5. 1. 3 结果计算146 试样中氟的含量按式(1)进行计算。式中X一生羊1000m X 1000 X 试样中氟的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);A 测定用试样中氟的质量，单位为微克(g); m 试祥的质量，单位为克地人计算结果保留两位有效数字。( 1 ) GB/T 5009.18-2003 5. 1. 4 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。5.2 扩散复色法5.2.1 试样处理同5.1.1。5.2.2 测定5.2.2.1同5.1.2. 1。5.2.2.
11、2同5.1. 2. 20 5.2.2.3同5.1.2.3。5.2.2.4 将盒取出，取下盒盖，分别用10mL水分次将盒盖内的氢氧化纳薄膜溶解，用滴管小心完全地移入25mL带塞比色管中。5.2.2.5 分别于带塞比色管中加2.OmL茜素氨竣络合剂溶液、3.0mL缓冲液、6.0mL丙酣、2.0 mL硝酸钢溶液，再加水至刻度，混匀，放置20min，以3cm比色杯(参考波长580nm)用零管调节零点，测各管吸光度，绘制标准曲线比较。5.2.3 结果计算同5.1. 3 0 5. 1. 4 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第二法灰化蒸锢一一氟试剂比色法6 原
12、理试样经硝酸续固定氟，经高温灰化后，在酸性条件下，蒸馆分离氟，蒸出的氟被氢氧化纳溶液吸收，氟与氟试剂、硝酸铺作用，生成蓝色三元络合物，与标准比较定量。7 试剂本方法所用水均为不含氟的去离子水，试剂为分析纯，全部试剂贮于聚乙烯塑料瓶中。7.1 丙酣。7.2 盐酸(1+ll)，取10mL盐酸，加水稀释至120mLo 7.3 乙酸纳溶液(250g/L)。7.4 乙酸溶液g同3.4，7.5 茜素氨竣合剂溶液z同3.507.6 硝酸缓溶液(100g/L)。7.7 硝酸制溶液z同3.7。7.8 缓冲液(pH4.7)，同3.8。7.9 氢氧化纳溶液(100日/L)。7.10 盼歌乙醇指示液(10g/L)。7
13、.11 硫酸(2十1)。7.12 氮氧化纳溶液(40g/L)，同3.II 0 7.13 氟标准使用液:同3.13。8 仪器8.1 电热恒温水浴锅。147 GB/T 5009.18-2003 8.2 电炉:800W o 8.3 酸度计。8.4 马弗炉。8.5 蒸馆装置见图101二一电炉52一蒸馆瓶33 温度计号4 冷凝管$5一小烧杯B8.6 可见分光光度计。9 分析步骤9.1 试样处理9. 1. 1 粮食同5.1.1.109. 1. 2 蔬菜s间5.1. 1. 2。图1蒸锢装置困9.1.3 鱼、肉类:取鲜肉绞碎，混合。鱼应先去骨.再捣碎混匀。9. 1. 4 蛋类2去壳，将蛋白、蛋黄打匀。9. 1
14、. 5 豆制品:将试样捣碎、混匀。9.2 灰化称取1昆匀试样5.00g(以鲜重计)，于30mL士甘揭内，加5.0mL硝酸镶溶液(100日/U和0.5mL氢氧化锅溶液(100g/U.使呈碱性，混匀后浸泡0.5h，置水浴上蒸干，再低温炭化，至完全不冒烟为止。移入马弗炉中，6000C灰化6h，取出，放冷。9.3 蒸锢9.3.1 于增塌中加10mL水，将数滴硫酸(2十1)慢慢加入增塌中，防止溶液飞溅，中和至不产生气泡148 GB/T 5009: 18-2003 为止。将此液移入500mL蒸馆瓶中，用20mL水分数次洗涤增塌，并入蒸馆瓶中。9.3.2 于蒸馆瓶中加60mL硫酸(2十门，数粒元氟小玻珠，连
15、接蒸馆装置，加热蒸馆。馆出液用事先盛有5mL水、7滴20滴氢氧化纳溶液(100g/L)和1滴酣睡t指示液的50mL烧杯吸收，当蒸馆瓶内溶液温度上升至190C时停止蒸馆(整个蒸馆时间约15min20 min)。9.3.3 取下冷凝管，用滴管加水洗涤冷凝管3次4次，洗液合并于烧杯中。再将烧杯中的吸收液移入50mL容量瓶中，并用少量水洗涤烧杯2次3次，合并于容量瓶中。用盐酸。+11)中和至红色刚好消失。用水稀释至刻度，混匀。9.3.4 分别吸取0、1.0、3.0、5.0、7.0、9.0mL氟标准使用液置于蒸馆瓶中，补加水至30mL，以下按9.3.2和9.3.3操作。此蒸馆标准液每10mL分别相当于0
16、、1.0、3.0、5.0、7.0，9.0问氟。9.4 测定9.4.1 分别吸取标准系列蒸馆液和试样蒸馆液各10.0mL于25mL带塞比色管中。9.4.2 同5.2.2.5操作。9.4.3 结果计算:试样中氟的含量按式(2)进行计算。nu-nu n-nu n-AU l- x-V-2-m x-x 千1A-v x .( 2 ) 式中X 试样中氟的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A 测定用样液中氟的质量，单位为微克(p.g), V, 比色时吸取蒸馆液体积，单位为毫升(mL)，V2一一蒸馆液总体积，单位为毫升(mL)，m 试样质量，单位为克(g)。结果的表述:同5.1. 3。9.4.4 精密度s
17、同5.1.4.第三法氟离子选择电极法10 原理氟离子选择电极的氟化制单晶膜对氟离子产生选择性的对数响应，氟电极和饱和甘*电极在被测试液中，电位差可随溶液中氟离子活度的变化而改变，电位变化规律符合能斯特(Nernst)方程式，见式(3)。2.303 RT E = E 一F一一19CF-.( 3 ) E与19CF成线性关系。2.303RT/F为该直线的斜率(25C时为59.16)。与氟离子形成络合物的铁、铝等离子干扰测定，其他常见离子无影响。测量溶液的酸度为pH56，用总离子强度缓冲剂，消除干扰离子及酸度的影响。11 试剂本方法所用水均为不含氟的去离子水，试剂为分析纯，全部试剂贮于聚乙烯塑料瓶中。
18、11. 1 乙酸纳溶液(3mol/L):称取204g乙酸纳(CH3COONa.3H20)，溶于300mL水中，加乙酸(1 mol/L)调节pH至7.0，加水稀释至500mL。11. 2 拧橡酸纳溶液(0.75mol/L):称取110g拧橡酸销(Na3CH30, 2H，O)溶于300mL水中，加14mL高氯酸，再加水稀释至500mL。11. 3 总离子强度缓冲剂z乙酸纳溶液(3mol/L)与拧橡酸纳溶液(0.75 mol/U等量混合，临用时现GB/T 5009.18-2003 配制。11.4 盐酸。+11)，同7.2。11.5 氟标准溶液z同3.12。11. 6 氟标准使用液z吸取10.0mL氟
19、标准溶液置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。如此反复稀释至此溶液每毫升相当于1.0问氟。12 仪器12.1 氟电极。12.2 酸度计s土O.OlpH(或离子计)。12.3 磁力搅拌器。12.4 甘柔电极。13 分析步骤13.1 称取1.00 g粉碎过40目筛的试样，置于50mL容量瓶中，加10mL盐酸。十11)，密闭浸泡提取1h(不时轻轻摇动)，应尽量避免试样粘于瓶壁上。提取后加25mL总离子强度缓冲剂，加水至刻度，混匀，备用。13.2 吸取0、1.0、2.0、5.0、10.0mL氟标准使用液(相当0、1.0、2.0、5.0、10.0月氟)，分别置于50 mL容量瓶中，于各容量瓶中分别加入
20、25mL总离子强度缓冲剂，10mL盐酸。+11)，加水至刻度，混匀，备用。13.3 将氟电极和甘柔电极与测量仪器的负端与正端相联接。电极插入盛有水的25mL塑料杯中，杯中放有套聚乙烯管的铁搅拌棒，在电磁搅拌中，读取平衡电位值，更换2次3次水后，待电位值平衡后，即可进行样液与标准液的电位测定。13.4 以电极电位为纵坐标，氟离子浓度为横坐标，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，根据试样电位值在曲线上求得含量。13.5 结果计算z试样中氟的含量按式(4)进行计算。A X Vx 1 000 x= .( 4 ) m X 1000 式中X 试样中氟的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A 测定用样液中氟的浓度，单位为微克每毫升(g/mL);m 试样质量，单位为克(g); V 样液总体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留两位有效数字。13.6 精密度=在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。150
