1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GBjT 5009.183-2003 部分代替GB16322-1996 植物蛋白饮料中朦酶的定性测定Qualitative analysis of urease in vegetable protein drinking 2003-08-11发布2004-01幽01实施中华人民共租国卫生部发布中国国家标准化管理委员会475 GB/T 5009.183-2003 前言本标准代替GB16322-1996(植物蛋白饮料卫生标准中附录A腺酶定性测定方法。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由辽宁省食品卫生监督检验所、北京市食品卫生监督检验
2、所、天津市食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人=王旭太、徐继康、杨玉芝、徐留发、陆守政。476 GB/T 5009. 183-2003 植物蛋白饮料中服酶的定性测定1 范围本标准规定了植物蛋白饮料中腺酶的定性测定方法。本标准适用于植物蛋白饮料中腺酶的定性测定。2 原理腮酶在适当的pH和温度下催化尿素，转化成碳酸镀，碳酸镀在碱性条件下形成氢氧化馁，再与纳氏试剂中的腆化饵乘复盐作用形成腆化双亲钱，如试样中腺酶活性消失，上述反应即不发生。朦酶NH, CONH2 +2H20一一(NH，)，CO，(NH，)，CO，十2NaOH一一-Na，CO，+NH，OH2K2 HgI4J十3KOH+NH3一一
3、.NH2Hg,OI+7KI+2H,O (黄棕色沉淀)3试J3.1 1%尿素溶液。3.2 10%鸽酸纳溶液。3.3 2%酒石酸苦甲纳溶液。3.4 5%硫酸。3.5 中性缓冲液z取0.067mol/L磷酸氢二锅溶液611mL.加入389mL O. 067 mol/L磷酸二氢饵溶液混合均匀即可。3.5. 1 0.067 mol/L磷酸氢二纳溶液称取元水磷酸氢二锅9.47g溶解于1000 mL水中。3.5.2 0.067 mol/L磷酸二氧梆溶液称取磷酸二氢饵9.07g溶于1000 mL水中即成。3.6 纳氏试弗:称取红色殃化求(HgI，)55g.腆化惆41.25 g溶于250mL水中，溶解后，倒入1
4、000mL 容量瓶中。再称取氢氧化纳144g，溶于500mL水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒入以上1000 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀后倒入试剂瓶，静止后用上清液。4 分析步骤4.1 取10mL比色管甲、乙两支，各加入0.1g试样，再各加1mL水，振摇半分钟(约100次).然后各加入中性缓冲液1m_，4.2 向上两管中的甲管(试样管)中加入尿素溶液1mL，再向乙管(空白对照管)中加入1mL水，将甲、乙两管摇匀置于40.C水浴中保温20min. 4.3 从水浴中取出二管后，各加4mL水，摇匀再加10%鸽酸纳溶液lmL.摇匀，再加5%硫酸1mL, 摇匀过滤备用。4.4 取上述滤液2mL分别加入25mL具塞纳氏比色管(配套管)中，再按下述步骤操作。4.4.1 各加水15mL后再加入2%酒石酸饵纳lmL.4.4.2 各加入纳氏试剂2mL后再加水至25mL刻度。4.5 摇匀后观察结果(见表1)。477 GBjT 5009. 183-2003 表1服酶定性表m符号显耶情况强阳性+十十砖红色混浊或澄清液次强阳性+ 桔红色澄清液阳性+ 深金黄色或黄色澄清液弱阳性十淡黄色或微黄色澄清液阴性试样管与空白对照管同色或更换478
