1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.188-2003 部分代替GBI丁5009.38-1996蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定Determination of thiophanate-methyl ,carbendazim in vegetables and fruits 2003-郎-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员高495 GB/T切09.188-2003 前言本标准代替GB/T5009.38-1996蔬菜、水果卫生标准的分析方法中4.7甲基托布津、多菌灵的测定。496 本标准由中华人民共和国卫生部提出
2、并归口。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。GB/T 5009. 188一2003蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定1 范围本标准规定了蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定方法。本标准适用于蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定。2 原理用甲醇自试样中提取出甲基托布津，在pH12时，用二氯甲烧提取，甲基托布津经闭环反应转变为多菌灵，提纯后，用紫外分光光度法进行定量测定。多菌灵经提取后可直接测定吸光度而进行定量。定量时为了排除各种作物中的干扰影响，采用作图法，求得校正吸光度，再根据校正吸光度和甲基托布津或多菌灵的关系绘制成标准曲线。多菌灵具有苯并咪略的特异吸收，植物成分于扰不大。3 试剂3
3、. 1 甲醇3.2 二氯甲烧。3.3 三氯甲烧。3.4 石油隧z沸程30C60C。3.5 乙酸乙酸铜溶液2称取2g乙酸铜，加100mL冰乙酸，稍加热溶解，用水稀释至200mL. 3.6 盐酸(1十11)，量取盐酸90mL，加水稀释至1000mL. 3.7 氢氧化纳溶液(80g/L)，称取8g氢氧化销，加水溶解并稀释至100mL. 3.8 氢氧化镀溶液(1十7)，量取氨水10mL，加水稀释至80mL. 3.9 氯化销溶液(100g/L)。3.10 甲基托布津标准溶液z准确称取50.0mg甲基托布津，置于烧杯中，用三氯甲烧溶解并移至50 mL容量瓶中，稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1.0 mg甲基
4、托布津。3.11 甲基托布津标准使用液z吸取10.0mL甲基托布津标准溶液置于100mL容量瓶中，加三氯甲烧稀释至刻度，此溶液每毫升相当于100.。g甲基托布津。3.12 多菌灵标准溶液z准确称取50.0mg多菌灵置于烧杯中，用盐酸。+11)溶解移入50mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0 mg多菌灵。3.13 多菌灵标准使用液，吸取10.0mL多菌灵标准溶液，置于100mL容量瓶中，加盐酸(1十11)稀释至刻度。此溶液每毫升相当于100.0吨多菌灵。4 仪器4.1 紫外分光光度汁。4.2 空气冷凝管，或用60cm长的玻璃管(自制)。5 分析步骤5.1 标准曲线剖制备5. 1.
5、 1 甲基托布津标准曲线z吸取0、0.10、0.30、0.50mL甲基托布津标准使用液(相当于0、10、30、50问甲基托布津)，分别置于30mL圆底离心管中，挥干溶剂后，各加10mL乙酸-乙酸铜溶液及2粒497 GB/T 5009. 188-2003 玻璃珠，接上空气冷凝管，小火缓缓煮沸0.5h，取下，用20mL盐酸。十11)从冷凝管顶端洗涤冷凝管和圆底离心管，并移入125mL分液漏斗中，用二氯甲炕提取二次，每次10mL，弃去二氯甲烧层，酸溶液中加25mL氢氧化销溶液(80g/L)至pH6. 06. 5(pH试纸试)，用二氯甲烧提取二次，每次20mL, 合并二氯甲烧提取液，用10mL水洗涤一
6、次，静置分层后，将二氯甲烧层分人另一个干的分液漏斗中，准确加入10mL盐酸。+11)，振摇5min，静置分层后，盐酸提取液用1cm石英比色杯，以盐酸0+11)调节分光光度计零点，测读250nm300 nm的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收困谱。将图谱上260nm和290nm吸光度读数点连成直线，设直线上282nm的吸光度为A，吸收图谱上282nm的吸光度为A，两者之差为M(M=A-A，为校正吸光度)。再以校正吸光度为纵坐标，甲基托布津的含量为横坐标，绘制各甲基托布津标准点M值的标准曲线。5. 1. 2 多菌灵标准曲线g吸取0、0.10、0.30、0.50mL多菌灵标准使用液(相
7、当0、10、30、50问多菌灵)，置于盛有20mL盐酸o十11)的分液漏斗中，各用二氯甲炕提取二次，每次10mL，弃去二氯甲烧层，水溶液用氢氧化镀0+7)中和到pH为6.06. 5(pH试纸试)，用二氯甲统提取二次，每次20mL , 提取液用10mL水洗涤一次，以下按5.1.1甲基托布津标准曲线自将二氯甲烧层分入另一个干的分液漏斗中，准确加入10mL盐酸。+11)起依法操作，并绘制吸收图谱，计算出M值后，绘制多菌灵的标准曲线。5.2 试样的提取和分离称取50.0g切碎、混匀的试样，加50mL甲醇振摇0.5h，用布氏漏斗抽滤，容器和滤器用甲醇洗涤二次，每次15mL20 mL，抽干后，滤液移人烧杯
8、中，抽滤瓶用约10mL水洗涤，洗液并入滤液内，在水浴土用空气流吹去部分甲醇后，移人分液漏斗中，加30mL氯化纳溶液(100g/L)，用石油酷振摇提取二次，每次25mL.弃去石油酶，加盐酸酸化至pH为12(用pH试纸试)，用二氯申炕提取二次，每次25 mL.合并二氯甲烧提取液，用25mL水洗涤一次分出三氯甲烧层留作甲基托布津测定用。水洗涤液合并入水层，留作多菌灵测定用。5.3 甲基托布津的测定二氯甲烧提取液自然挥干后，用10mL乙酸乙酸铜溶液分次溶解残渣，并移人30mL圆底离心管中，加2粒玻璃珠，以下按5.1.1自接上空气冷凝管起依法操作，计算出试样的M值，再与甲基托布津的标准曲线比较，计算试样
9、中的含量。5.4 多菌灵的测定取5.2中留作多菌灵测定的水溶液，用氢氧化镀0+7)中和至pH6. 06. 5，然后按5.1.2多菌灵标准曲线自用二氯甲烧提取二次起依法操作，计算出试样中的M值，再与多菌灵标准曲线比较，计算试样中的含量。甲基托布津在植物中的主要代谢物是多菌灵，是甲基托布津水解和闭环所形成，因而目前甲基托布津的残留量是以这两个化合物测得的残留量之和表示。6 结果计算试样中甲基托布津和多菌灵含量按下式计算z式中:x=mj +m2) x 1000 m X 1000 X 试样中甲基托布津和多菌灵含量，单位为毫克每千克(mg/kg); mj-一测定用试样中甲基托布津的质量，单位为微克(g)
10、; m，一一-测定用试样中多菌灵的质量，单位为微克(g); m一一试样的质量，单位为克(g)。计算结果表示到两位有效数字。498 GB/T 5009. 188-2003 精密度7 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。浓度3050r .A 1 = O. 052 - O. 019 = O. 033 .A2 =0.112 -0.022=0.090 .A 3 = 0.180 - O. 030 = 0.150 o 10r AA1 -101 AA2 -30 AA3 -50 塑墨M0.10 0.08 0.06 0.04 。.020.12 -, 、 .; .;: l 二131 I 士披*/nm 298 86 11 00 副棋圈，、。.140.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.12 其他8 499 甲基托布津标准曲线固2甲基托布津标准紫外吸收光谱图1
