1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.215-2008 食品中有机锡含量的测定2008-12-03发布Determination of organotins ilJ foods 中华人民共和国卫生部也舍中国国家标准化管理委员会。叩2009-03-01实施中华人民共和国国家标准食品中有机锡含量的测定GB/T 5009.215-2008 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码100045网址电话，6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本880XI2301/16 印张0.75字数14千字2009年4月
2、第一版2009年4月第一次印刷书号155066 1-36567定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究-举报电话沃01068533533前言根据中华人民共和国食品卫生法制定本标准.本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。GB/T 5009.215-2008 本标准负责起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、中国科学院生态环境研究中心。本标准参加起草单位:中国检验检疫科学研究院、首都医科大学、烟台大学、福建省疾病预防控制中心、北京疾病预防控制中心。本标准主要起草人:吴永宁、赵云峰、江桂斌、赵孔
3、祥、凌云、封锦芳、付武胜、李志军、邵兵.GB/T 5009.215-2008 食品中有机锡含量的测定1 范围本标准规定了气相色谱-脉冲火焰光度检测器检测食品中有机锡含量的方法回本标准运用于鱼类、贝类、葡萄酒和酱油等样品中二甲基锡、三甲基锡、一丁基锡、二丁基锡、三丁基锡、一苯基锡、二苯基锡、三苯基锡的测定.本标准测定食品样品的定量限(g/kg)为:二甲基锡o.5、三甲基锡1.2、一丁基锡1.5、二丁基锡0.5、三丁基锡0.6、一苯基锡1.7、二苯基锡0.8、三苯基锡0.80方法的检测限及定量限与所使用仪器的灵敏度、取样量以及干扰水平等多种因素有关。2 原理本标准分别以一甲基锡为单取代有机锡的内标
4、，三丙基锡为二、三取代有机锡的内标，采用内标法定量。在试祥中定量加入一甲基锡和三丙基锡内标，超声辅助有机锡析出，有机溶剂萃取，提取后的样品溶液经凝胶渗透色谱净化、戊基格林试剂衍生、衍生化产物再经弗罗里硅土(Florisil)净化，采用气相色谱-脉冲火焰光度检测器(GC-PFPD)测定.3试Jlj3.1 正己烧(n-CsHl)分析纯，重蒸。3.2 囚氢唉喃(CH2CH，OCH，CH，)，分析纯，重蒸。3.3 乙酸乙!rn(CH3COOC，Hs)，分析纯，重蒸.3.4 环己烧CC，H，)，分析纯，重蒸.3.5 甲醇CCH30H识分析纯。3.6 乙隧(C，HSOC2Hs)，分析纯，重蒸。3.7 澳代
5、正戊烧(n-CsHBr) ，分析纯，重蒸。3.8 元水硫酸纳(Na2S0)，将无水硫酸纳置干燥箱中，于120OC干燥4h，冷却后，密闭保存.3.9 氯化销CNaCl)，分析纯。3.10 浓硫酸(H，SO，)，优级纯。3.11 浓盐酸(HC!)，优级纯。3.12 氢澳酸(HBr)，分析纯。3.13 乙二胶四乙酸销(EDTANa)，分析纯。3.14 金属销(Na)，分析纯.3.15 续条(Mg)，分析纯。3.16 环庚三烯盼翻(tropolone)，分析纯，98%。3. 17 0.03%环庚三烯翻正己统溶液z量取正己统100mL，加入0.03g环庚三烯盼回混匀。3.18 20%氯化纳溶液z称取氯化
6、纳100g，加入去离子水400mL，摇匀。3.19 饱和氯化销溶液z在100mL去离子水中加入过量氯化锁，水浴使溶解，恢复室温后要求有结晶析出。3.20 甲蹲水(4十1)溶液2取甲醇适量，制备甲醇-水(4+1)滚液，并根据每1mL甲蹲加1L盐酸的要求，加入盐酸，制得含盐酸的甲醇-水(4+1)溶液。3.21 弗罗里硅土(Florisi!)，60目100目，120OC烘熔12h。G/T 5009.215-2008 3.22 聚苯乙烯凝胶(bio-beads S-X3 ): 100目200目，或同类产品。3.23 有机锡标准品及其标准溶液z见表10除二甲基锡纯度为95%外，其他标准品纯度均大于97%
7、。表1有机锡标准溶液的制备组分储备溶液的浓度/(g/L)中文名称|英文缩写|含有机锡| 以h计三甲基锡I TMT I 4.071 I 2.425 二甲基锡I DMT 三丁基锡TBT 二丁基锡一丁基锚苯基锡二苯基锡三苯基锡一甲基锡三丙基锡4.3 4.4 振荡器。4.5 超声波清洗器。4.6 旋转蒸发仪。4.7 氮气浓缩器。4.8 三口瓶、分液漏斗和加热回流装置.4.9 加热磁力搅拌装置。4.10 玻璃层析柱.4.11 分析天平。4.12 电加热套。中间溶液的浓度以Sn计)/(ng/L)24.25 工作溶液的浓度以Sn计)/(ng/L)1.口。1. 00 1. 00 1. 00 1. 00 1.
8、00 GB/T 5009.215-2008 5 分析步骤5.1 戊基梅林试剂的合成5. 1. 1 乙隧重蒸与除水z在60c下，采用全玻璃蒸馆装置重蒸两次。在蒸馆的乙隧中，加入光洁金属纳片，至不再产生明显气泡后，放置1h-2 h，继续加入金属锅片，保存备用。5. 1. 2 澳代正戊烧的重蒸z量取澳代正戊:院100mL，置于蒸馆瓶中，在140c下，采用全玻璃蒸馆装置重蒸两次，馆分避光收集团,.,-.1 作溶液50L，加-1.冉画，为15cm o 5.4.2 净化z在试样提取液的浓缩残渣中加入四氢吱喃乙酸乙醋。+1)溶液1mL，将此溶液全部转移至层析柱上，用1mL四氢咬喃-乙酸乙酶0+1)溶液洗涤茄
9、形瓶。待层析柱中试样溶液的液面降至接近凝胶时，将洗液转移至柱上回用四氢吠喃-乙酸乙醋。+1)溶液洗脱，弃去omL-18 mL流分，收集18mL-33 mL流分，收集流出体积15mLo 5.5 戊基漠化镶格林试剂衍生将上述收集的净化溶液旋转蒸发浓缩至近干，加入环己统10mL，继续旋转蒸发浓缩至约1mL，转移至10mL离心管中，用环己烧洗涤茄形瓶，合并在离心管中，并定容至2mL用1mL注射器加取上述合成的戊基澳化续格林试剂。.8mL，旋涡振摇混匀，超声反应15min后，逐滴加入0.5moi/L硫酸-约3.mL，振摇，终止衍生反应，旋涡振摇，静宜使上层溶液澄清。GB/T 5009.215-2008
10、5.6 弗罗里硅土(Florisil)柱净化5.6.1 层析柱装填:用玻璃棉封堵玻璃柱底端后，从底部到顶端依次装入活化弗罗里硅土(Florisil)1. 5 g、元水硫酸纳2g.用正己统10rnL预淋洗.5.6.2 净化z将上述衍生榕液的上层有机相全部转移至弗罗里硅土柱上，当柱中溶液的液面降至无水硫酸销层时，用正己烧洗脱，收集洗脱液5rnL，在氮气流下浓缩至约1rnL后，转移至另一根填以1.5 g 弗罗里硅土(FlorisiD和2g无水硫酸纳的层析柱上，用正己烧甲苯(5+1)溶液10rnL预淋洗，用正己烧甲苯(5十1)溶液洗脱，收集10rnL流分。5.7 浓缩在氯气流下，将5.6.2净化的试样
11、溶液浓缩至1rnL.转移到进祥小瓶中，待GC测定。5.8 标准系列溶液的制备准确称取空白基质适量，加入5rnL 20%氯化销溶液，分别加人有机锡混合标准工作溶液。L、10L、30L、50L、100L、200L、400L及内标工作溶液50L.按试样提取与净化过程要求同步操作目6 测定6.1 气相色谱参考条件6. 1. 1 色谱柱，D8-1柱(或等效柱).柱长30m.膜厚0.25m.内径。.25 mm 6. 1. 2 采用不分流方式，进样口温度280C。6.1.3 柱温程序开始温度为50C.保持1min;以10C/min升温至120C, 5 C/min升温至200C , 10 C/min升温至28
12、0C ，保持5min 6. 1. 4 载气为高纯氮气(纯度99.999%)。6. 1. 5 脉冲火焰光度检测器参考条件6. 1. 5.1 模式z硫滤光片。6. 1. 5. 2 温度，350C. 6. 1. 5. 3 燃气和助燃气流速:空气，21 rnL/min.氢气22mL/min.空气z11 mL/min. 6. 1. 5. 4 光电倍增管电压，550V。6. 1. 5. 5 门槛时间4mS;门延迟时间:5ms，激发电压100rnV.6.2 色谱分析吸取标准溶液和试样溶液各1L进样，记录色谱图(参见附录A).以保留时间定性。7 结果计算计算目标化合物与内标的峰面积或峰高比，以标准系列溶液中目
13、标有机锡的进样量(ng)与对应的目标有机锡与内标的峰面积或峰高比绘制线性曲线，根据线性曲线计算试样中有机锡含量，计算公式见式(1), 式中zx=生兰im X一一试样中目标有机锡含量(以Sn计).单位为微克每千克(g/kg)或微克每升(g/U，. ( 1 ) A一一试样色谱峰与内标色谱峰的峰高比值对应的目标有机锡质量(以Sn计).单位为纳克(ng); f一一试样稀释因子;m一一试样的取样量，单位为克(g)或毫升(rnL)。计算结果保留三位有效数字。(.1 G/T 5009.215-2008 8 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%，方法测定不确定度参见附
14、录Bo5 GB/T 5009.215-2008 附录A(资料性附录)色谱图溶剂空白色谱图、混合标准溶液色谱图、实际试样(白蛤)色谱图分别见图A.l、图A.2、图A.30宝II :t E 4 护20 :且10 15 20 25 30 图A.1溶剂空白色谱图;li fRii11 E 10 -5 10 15 20 25 30 35 注z各化合物浓度以5n计，为50g/L.图A.2混合标准溶渡的色谱图GB/T 5009.215-2008 图A.3实际试样(自蛤色谱图, ;l|i! il-L 、CON-mR.go凶皂白。附录B资料性附录方法的不确定度GB/T 5009.215-2008 方法的不确定度见
15、表B.10表B.1以丁基锡为目标化合物，采用本方法测定的不确定度结果量值/(闯/问)I 相对标准不确定度l 扩展不确定度1o O. 052 I O. 104 o063 I O. 126 0.053 I 0.106 组分TBT 1. 0 DBT 1. 0 究阳一元必到一DE-ot-侵-H恤因一有m专臼一闹吼一批自书一定r.可川、?川.，_ 叫阳唱曲，:.i比0导.t.;u.，4:彷伽如j山卢卢a j鼻r，飞，苦 巧 ， _，垂.飞l鼻:i_.lf 户，崎吨苛J启R毗 i ! -1 i巴i4.JJj户仨台/j诩且A川?7币J卢1川川f忖叫!汗7二:kk;f:1_乙牛汁;甲叮十叮v叫m町.庐吭扩F哥二且F屹J川、牛气!峦. lJ，.垃r打印日期2009年4月21日MBT
