1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准2003-08-11发布GB/T 5009.28-2003 代替GB/T5009. 28一1996食品中糖精铀的测定Determination of sacchar in sodium in foods 2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员哥GB/T 5009.28-2003 前言本标准代替GB/T5009.28-1996(食品中糖精纳的测定方法儿本标准与GB/T5009.28-1996相比主要修改如下:修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中糖精俐的测定h按照GB/T20001. 4-2001(标准编
2、写规则第4部分z化学分析方法对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准第一法由天津市食品卫生监督检验所、辽宁省食品卫生监督检验所、武汉市E生防疫站、浙江省卫生防疫站、四川省卫生防疫站负责起草。本标准第二法由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准第三法由上海市食品卫生监督检验所、扬州市卫生防疫站、上海市南市区卫生防疫站、广西壮族自治区卫生防疫站、太原市卫生防疫站负责起草。本标准于1985年首次发布，1996年第一次修订，本次为第二次修订。224 食晶中糖精铀的测定1 范围本标准规定了食品中糖精纳的测定方法。本标准适用于食品中糖精销的测定。GB/T 5009.28-
3、2003 本方法检出限s高效液相色谱法为取样量为10g.进样量为10L时检出量为1.5 ngo 第-法高效液相色谱法2 原理试样加温除去二氧化碳和乙酶，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。3试J3.1 甲醇g经0.5m滤膜过滤。3.2 氨水0+1):氨水加等体积水混合。3.3 乙酸镀溶液(0.02mol/Ll:称取1.54 g乙酸馁，加水至1000mL溶解，经0.45m滤膜过滤。3.4糖精锅标准储备溶液z准确称取0.0851 g经120C烘干4h后的糖精销(C，H，CONNaSO， 2H，O).加水溶解定容至100mL。糖精销含量1.0
4、 mg/mL.作为储备溶液。3.5糖精销标准使用溶液2吸取糖精销标准储备液10mL放入100mL容量瓶中，加水至刻度，经0.45m滤膜过滤，该溶液每毫升相当于0.10mg的糖精锅。4 仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。5 分析步骤5.1 试样处理5.1.1 汽水z称取5.00 g10. 00 g.放人小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水0+1)调pH约70加水定容至适当的体积，经0.45m滤膜过滤。5. 1. 2 果汁类:称取5.00 g10. 00 g.用氨水。+1)调pH约7.加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经0.45m滤膜过滤。5.1.3 配制酒类s称取10.00g.放小烧杯中，水
5、浴加热除去乙醇，用氨水0+1)调pH约7.加水定容至20mL.经0.45m滤膜过滤。5.2 高效液相色谱参考条件5.2.1 柱:YWG-C184.6 mmX250 mm 10m不锈钢柱。5.2.2 流动相=甲醇2乙酸镀溶液(0.02mol/L)(5+95)。5.2.3 流速:1mL/mino 5.2.4 检测器z紫外检测器.230nm波长.0.2AUFS。5.3 测定取处理液和标准使用液各10L(或相同体积)注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的225 GB/T 5009.28-2003 保留时间为依据进行定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。5.4 结果计算试样中糖精锅含量
6、按式(1)进行计算。-o川一一只一叽A一-m x . ( 1 ) 式中.X 试样中糖精销含量，单位为克每千克(g/kg), A 进样体积中糖精纳的质量，单位为毫克(mg)，V2 进样体积，单位为毫升(mL)，V1 试样稀释液总体积，单位为毫升(mL)，m 试样质量，单位为克(g)。计算结果保留三位有效数字。5.5 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的lO%。5.6 其他应用5.2的高效液相分离条件可以同时测定苯甲酸、山梨酸和糖精销，其分离色谱图见图1。苯甲酸山梨酸糖精铀图1分离色谱图第二法薄层色谱法6 原理在酸性条件下，食品中的糖精纳用乙酷提取、浓缩、薄层色
7、谱分离、显色后，与标准比较，进行定性和半定量测定。7 试剂7.1 乙隧z不含过氧化物。7.2 元水硫酸纳。7.3 元水乙醇及乙醇(95%)。7.4 聚酷胶粉，200目。7.5 盐酸。+1)取100mL盐酸，加水稀释至200mL。226 GB/T 5009.28-2003 7.6 展开剂如下.7.6.1 正丁醇+氨水+元水乙醇(7十1+2)。7.6.2 异丙醇十氨水+元水乙肆(7+1+2)。7.7 显色弗IJ，澳甲盼紫溶液(0.4g/L) ，称取0.04g澳甲盼紫，用乙醇(50%)溶解，加氢氧化销溶液(4 g/L)1. 1 mL调制pH为8，定容至100mL。7.8 硫酸铜溶液(100g/L)
8、，称取10g硫酸铜(CuS. 5H，)，用水溶解并稀释至100mL. 7.9 氢氧化销溶液(40g/L)。7.10 糖精锦标准溶液z准确称取0.0851 g经120C干燥4h后的糖精销，加乙醇溶解，移入100mL 容量瓶中，加乙醇(95%)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1mg糖精锅(C，H.CNNaS， 2H，)。8 仪器8.1 玻璃纸2生物制品透析袋纸或不含增自剂的市售玻璃纸。8.2 玻璃喷雾器。8.3 微量注射器。8.4 紫外光灯z波长253.7nm。8.5 薄层板，10cmX20 cm或20cmX20 cm。8.6 展开槽。9 分析步骤9.1 试样提取9. 1. 1 饮料、冰棍、汽水.取
9、10.0mL均匀试样(如试样中含有二氧化碳，先加热除去.如试样中含有酒精，加4%氢氧化纳溶液使其呈碱性，在沸水浴中加热除去)，置于100mL分液漏斗中，加2mL盐酸。+1)，用30、20、20mL乙隧提取三次，合并乙隧提取液，用5mL盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层。乙隧层通过元水硫酸纳脱水后，挥发乙隧，加2.0mL乙醇溶解残留物，密塞保存，备用。9.1.2 酱油、果汁、果酱等:称取20.0g或吸取20.0mL均匀试样，置于100mL容量瓶中，加水至约60 mL，加20mL硫酸铜溶液(100g/L) ，混匀，再加4.4mL氢氧化销溶液(40g/L) ，加水至刻度，混匀，静置30min，过滤，取5
10、0mL滤液置于150mL分液漏斗中，以下按9.1. 1自加2mL盐酸。+1).起依法操作。9. 1. 3 固体果汁粉等称取20.0g磨碎的均匀试样，置于200mL容量瓶中，加100mL水，加温使溶解、放冷，以下按9.1.2自加20mL硫酸铜溶液(100g/L)起依法操作。9. 1. 4 糕点、饼干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品g称取25.0g均匀试样，置于透析用玻璃纸中，放入大小适当的烧杯内，加50mL氢氧化销溶液(0.8g/L)。调成糊状，将玻璃纸口扎紧，放入盛有200mL氢氧化纳溶液(0.8g/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析过夜。量取125mL透析液(相当12.5g试样)，加约0.4mL盐酸。
11、十1)使成中性，加20mL硫酸铜溶液(1 00 g/L)，混匀，再加4.4mL氮氧化纳溶液(40g/L)，混匀，静置30min，过滤。取120mL(相当10g 试样)，置于250mL分液漏斗中，以下按9.1.1自加2mL盐酸。十1).起依法操作。9.2 薄层板的制备称取1.6g聚戳胶粉，加0.4g可溶性淀粉，加约7.0mL水，研磨3min_S min，立即涂成O. 25 mmO. 30 mm厚的10cmX 20 cm的薄层板，室温干燥后，在80C下干燥1h。置于干燥器中保存。9.3 点样在薄层板下端2cm处，用微量注射器点10L和20L的样液两个点，同时点3.0、5.0、7.0、10.0L糖精
12、锅标准溶液，各点间距1.5 cm. 227 GB/T切09.28-20039.4 展开与思色将点好的薄层板放入盛有展开剂(7.6.1或7.6.幻的展开槽中，展开剂液层约0.5cm，并预先已达到饱和状态。展开至10cm，取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑点显黄色，根据试样点和标准点的比移值进行定性，根据斑点颜色深浅进行半定量测定。9.5 计算试样中糖精纳的含量按式(2)进行计算。式中zX 一与i旦LmX言X1000 x 试样中糖精纳的含量，单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L); A一一测定用样液中糖精销的质量，单位为毫克(mg);m一一试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL);V1 试样提取
13、液残留物加入乙醇的体积，单位为毫升(mL);V2 点板液体积，单位为毫升(mL)。第三法离子选择电极测定方法10 原理.( 2 ) 糖精选择电极是以季镀盐所带PVC薄膜为感应膜的电极，它和作为参比电极的饱和甘示电极配合使用以测定食品中糖精销的含量。当测定温度、溶液总离子强度和溶液接界电位条件一致时，测得的电位遵守能斯特方程式，电位差随溶液中糖精离子的活度(或浓度)改变而变化。被测溶液中糖精销含量在0.02mg/mL-1 mg/mL范围内。电极值与糖精离子浓度的负对数成直线关系。11 试剂11. 1 乙隧:使用前用盐酸(6mol/L)饱和。11. 2 元水硫酸销。11. 3 盐酸(6mol/L)
14、:取100mL盐酸，加水稀释至200mL，使用前以乙腿饱和。11.4 氢氧化销溶液(0.06mol/L):取2.4g氢氧化锅加水溶解并稀释至1000mL。11. 5 硫酸铜洛液(100g/L):称取硫酸铜(CuSO， 5H,O)10 g溶于100mL水中。11. 6 氢氧化纳溶液(40g/L)。11.7 氢氧化铺溶液(0.02mol/L):将11.4稀释而成。11.8磷酸二氢销c(NaH2PO, 2H20) = 1 mol/L溶液z取78gNaH2PO, 2H，O溶解后转人500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。11. 9 磷酸氢二锅c(Na，HPO，.12H，O)=lmol/L溶液z取8
15、9.5gNa, HPO, 12H20于250mL容量瓶中溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。11. 10 总离子强度调节缓冲液:87.7mL磷酸二氢纳溶液。mol/U与12.3mL磷酸氢二销溶液(1 mol/U混合即得。11. 11 糖精纳标准溶液=准确称取0.0851 g经120C干燥4h后的糖精钢结晶移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。此溶液每毫升相当于1.0 mg糖精纳(C，H，CONNaSO，.2H，O)。12 仪器12.1 精密级酸度计或离子活度计或其他精密级电位计，准确到土1mV, 228 GB/T 5009.28-2003 12.2 糖精选择电极。12.3 217型甘录电
16、极z具双盐桥式甘示电极，下面的盐桥内装人含1%琼脂的氯化饵溶液(3mol/L)。12.4 磁力搅拌器。12.5 透析用玻璃纸。12.6 半对数纸。13 分析步骤13.1 试样提取13. 1. 1 液体试样2浓缩果吁汁、饮料、汽水、汽酒、配制酒等。准确吸取25mL均匀试样(汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取样)置于250mL分液漏斗中，加2mL盐酸(6mol/L) ，用20、20、10mL乙黯提取三次，合并乙隧提取液，用5mL经盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层，乙隧层转移至50mL容量瓶，用少量乙酷洗涤原分液漏斗合并入容量瓶，并用乙酷定容至刻度，必要时加入少许元水硫酸锁，摇匀，脱水备用。13. 1.
17、 2 含蛋白质、脂肪、淀粉量高的食品z糕点、饼干、酱菜、豆制品、油炸食品、称取20.00g切碎试样，置透析用玻璃纸中，加50mL氢氧化销溶液(0.02 mol/L) ，调匀后将玻璃纸口扎紧，放入盛有200 mL氢氧化纳溶液(0.02 mol/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析24h，并不时搅动浸泡液。量取125 mL透析液，加约0.4mL盐酸(6mol/L)使成中性，加20mL硫酸铜溶液混匀，再加4.4mL氢氧化销溶液(40g/L) ，混匀。静置30min，过滤。取100mL滤液于250mL分液漏斗中，以下按13.1. 1自加2mL盐酸(6mol/L)起依法操作。13. 1. 3 蜜钱类z称取10
18、.00 g切碎的均匀试样。置透析用玻璃纸中，加50mL氢氧化锅溶液(0.06 mol/L) ，调匀后将玻璃纸扎紧，放人盛有200mL氢氧化锅溶液(0.06mol/L)的烧杯中，透析、沉淀、提取按13.1.2操作。13. 1. 4 糯米和j食品g称取25.00g切成米粒状的小块的均匀试样，按13.1.2操作。13.2 测定13.2.1 标准曲线的绘制2准确吸取0、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0mL糖精纳标准溶液(相当于0、O.5、1.0、2.5、5.0、10.0mg糖精销。分别置于50mL容量瓶中，各加5mL总离子强度调节缓冲液，加水至刻度，摇匀。将糖精选择电极和甘柔电极分别与测量仪器
19、的负端和正端相连接，将电极插入盛有水的烧杯中，按其仪器的使用说明书调节至使用状态，在搅拌下用水洗至电极起始电位(例如某些电极起始电位达320 mV)。取出电极用滤纸吸干。将上述标准系列溶液按低浓度到高浓度逐个测定，得其在搅拌时的平衡电位值(-mV)。在半对数纸上以毫升(毫克)为纵坐标;电位值(-mV)为横坐标绘制标准曲线。13.2.2 试样的测定z准确吸取20mL 13.1项下的乙酷提取液置于50mL烧杯中，挥发至干，残渣加5 mL总离子强度调节缓冲液。小心转动，振摇烧杯使残渣溶解，将烧杯内容物全部定量转移入50mL 容量瓶中，原烧杯用少量水多次漂洗后，并人容量瓶中，最后加水至刻度摇匀。依法测
20、定其电位值(-mV)，查标准曲线求得测定液中糖精销毫克数。13.3 结果计算试样中糖精铀的含量按式(3)进行计算。式中sx = A X 1000 -mX卡X1000 X 试样中糖精纳的含量，单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L);. ( 3 ) 229 GB/T 5009.28-2003 A一一测定液中糖精销的质量，单位为毫克(mg), V, 乙腿提取液的体积，单位为毫升(mL)，V2 分取乙隧提取液的体积，单位为毫升(mL)，m 试样的质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。结果的表述z同5.4013.4 干扰本法对苯甲酸纳的浓度在200mg/kg 1 000 mg/同时无干扰;山梨酸的浓度在50mg/kg 500 mg/kg，糖精销含量在100mg/kg 150 mg/kg范围内，约有3%10%的正误差;水杨酸及对泾基苯甲酸醋等对本法的测定有严重干扰。230
