1、lCS 67040X 10 雷雪中华人民共和国国家标准GBT 55 1 5-2008IS0 6865：2000代替GBT 5515-1985粮油检验 粮食中粗纤维素含量测定介质过滤法Inspection of grain and oils-Determination of crude fibre content in grainMethod with intermediate filtration200808-22发布(IS0 6865：2000，IDT)2008-12-01实施宰瞀徽鬻瓣警麟瞥星发布中国国家标准化管理委员会促19前 言GBT 5515-2008IS0 6865：2000本标准
2、等同采用ISO 6865：2000动物饲料粗纤维素含量测定介质过滤法(英文版)。为了便于使用，本标准对ISO 6865：2000进行了下列编辑性修改：“本国际标准”一词改为“本标准”；用小数点“”代替作为小数点的逗号“，”；删除国际标准的前言；将引用文件中的IsO 6498：1998替换为GBT 20195；石油醚沸程由4060改为3060。本标准是对GBT 5515-19856粮食、油料检验粗纤维素测定法的修订。本标准与GBT 55151985相比主要变化如下：增加了原理、规范性引用文件、术语和定义、扦样、试样制备、半自动操作方法分析步骤、精密度和测试报告。本标准自实拖之日起代替GBT 55
3、15 1985。本标准中附录A为资料性附录。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位：国家粮食局科学研究院。本标准主要起草人：张佳欣、郝希成、吴春华。本标准所替代的标准历次版本发布情况为：GBT 5515m1985。1范围GBT 5515-2008IS0 6865：2000粮油检验粮食中粗纤维素含量测定介质过滤法本标准规定了用介质过滤法测定粮食中粗纤维含量的手工操作和半自动操作的测定步骤。本标准适用于粗纤维含量高于i0 gkg的谷物、豆类以及动物饲料中粗纤维素含量的测定。注：若粗纤维素含量不高于10 gkg，应按照ISO 6541执行。2规范性引用文件下列文
4、件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD)GBT 20195动物饲料试样的制备(GBT 20195-2006，ISO 6498：1998，IDT)3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31粗纤维素含量crude fibre content样品按照本标准规定的分析步骤，经过酸和碱消解
5、后得到的残渣，经干燥、灰化后损失的部分占试样的质量分数。注：粗纤维素含量用gkg表示。也可以用质量分数()表示。4原理试样用沸腾的稀硫酸处理，残渣经过滤分离、洗涤，用沸腾的氢氧化钾溶液处理。处理后的残渣经过滤分离、洗涤、干燥并称量，然后灰化。灰化中损失的质量相当于试样中粗纤维的质量。5试剂除非特别说明，所使用试剂均为分析纯。51水：至少应符合GBT 6682规定的三级水。52盐酸溶液：c(HCI)一05 molL。53硫酸溶液：c(H2sq)一(o13士0005)molL。54氢氧化钾溶液：c(KoH)一(o23士o005)molL。55丙酮。56过滤辅料：海砂或硅藻土545，或质量相当的其他
6、材料。使用前，海砂用沸腾的盐酸溶液c(HCl)一4 toolL处理，用水洗涤至中性，然后在50025下至少加热1 h。其他滤器辅料在500士25下至少加热4 h。57消泡剂：如正辛醇。58石油醚：沸程3060。GBT 5515-2008IS0 6865：20006仪器实验室常用仪器，特别是下列仪器：61 粉碎设备：能将样品粉碎，使其能全部通过筛孔孔径为1 mm的筛。62分析天平：分度值01 mg。63滤埚：石英、陶瓷或者硬质玻璃材质，带有烧结的滤板，孔径40 pm100 pm(按照ISO 4793：1980，孔隙度为P100)。在初次使用前，将新滤埚小心地逐步加温，温度不超过525，并在500
7、-25下保持数分钟。也可以使用具有同样性能特性的不锈钢坩埚，其不锈钢滤板的孔径为90“m。64陶瓷筛板。65灰化皿。66烧杯或锥形瓶：容量500 mL，带有配套的冷却装置。67干燥箱：电加热，可通风，能保持温度在130土2。68干燥器：盛有蓝色硅胶干燥剂，内有厚度为2 mm3 mm的多孔板，最好为铝制或不锈钢材质。69马福炉：电加热，可以通风，温度可以调控，在475525条件下能够保持滤埚周围温度准确至士25。马福炉的温度读数可能发生误差，因此对马福炉中的温度要定期校正。因马福炉的大小及类型不同，炉内不同位置的温度可能不同。当炉门关闭时，必须有充足的空气供应。空气体积流速不宜过大，以免带走滤埚
8、中的物质。610冷提取装置：需带有滤埚支架，以及连接真空、液体排出孔的有旋塞排放管和连接滤埚的连接环等部件。611 加热装置(适用于手工操作方法)：带有冷却装置，以保证溶液沸腾时体积不发生变化。612加热装置(适用于半自动操作方法)：用于酸碱消解。需包括有：滤埚支架；连接真空和液体排出孔的有旋塞排放管；容积至少270 mL的消解圆筒，供消解用，并带有回流冷凝器；连接加热装置、滤埚和消解圆筒的连接环。压缩空气可以选配。使用前装置用沸水预热5 min。7扦样本标准不规定扦样方法，推荐采用ISO 6497规定的方法。实验室接受的样品应具有代表性，并且在运输和保存过程中无损坏或变质。8试样制备按照GB
9、T 20195制备样品。用粉碎装置(61)将实验室风干的样品粉碎，使其能完全通过筛孔为1 mm的筛，然后将样品充分混合均匀。手工操作方法按第9章进行操作，半自动操作方法按第10章进行操作。9手工操作方法91试料称取1 g制备好的试样(第8章)，准确至01 mg(m，)。如果试样脂肪含量超过100 gkg，或试样中的脂肪不能用石油醚(58)提取，则将试样转移至滤埚(63)中，按92处理；如果试样脂肪含量不超过100 gkg，则将试样转移至烧杯(66)中。如果其碳酸盐(以碳酸钙计)超过50 gkg，按93处理；如果其碳酸盐(以碳酸钙计)不超过50 gkg，直接按94进行操作。92预脱脂在冷提取装置
10、(610)中，在真空条件下，试样用30 mL石油醚(58)脱脂后，抽吸干燥残渣，重复GBT 5515-2008IS0 6865：20003次。将残渣转移至烧杯(66)中。93除去碳酸盐样品中加入100 mL盐酸(52)，连续振摇5 rain，小心地将溶液倒人铺有过滤辅料(56)的滤埚中，小心地用水洗涤两次，每次i00 mL，充分洗涤使尽可能少的物质留在过滤辅料上。把滤埚中的物质转移至原来的烧杯里，按94进行操作。94酸消解向样品中加入150 mL硫酸(53)。尽快加热至沸腾，并且保持沸腾状态30 min+1 rain。开始沸腾时，缓慢转动烧杯。如果起泡，加人数滴消泡剂(57)。开启冷却装置保持
11、溶液体积不发生变化(见66和611)。95第一次过滤在滤埚(63)中铺一层过滤辅料(56)，其厚度约为滤埚高度的五分之一，过滤辅料上可盖筛板(64)以防溅起。当酸消解结束时，把液体通过搅拌棒倾入滤埚中，用弱真空抽滤，使150 mL酸消解液几乎全部通过。若发生堵塞而无法抽滤时，用搅拌棒小心地拨开覆盖在过滤辅料上的粗纤维。残渣用热水洗涤5次，每次用水约10 mL。注意使滤埚的筛板始终有过滤辅料覆盖，使粗纤维不接触筛板。停止抽气，加入一定体积的丙酮(55)，使其刚好能覆盖残渣。静置数分钟后，慢慢抽滤除去丙酮，继续抽气，使空气通过残渣，使其干燥。如果试样中的脂肪不能直接用石油醚(58)提取，按照96操
12、作，反之按照97操作。96脱脂在冷凝装置(610)中，在真空条件下试样用30 mL石油醚(58)脱脂并抽吸干燥，重复3次。97碱消解将残渣定量转移至酸消解用的同一烧杯中。加入150 mL氢氧化钾溶液(54)，尽快加热至沸腾，并且保持沸腾状态30 minil rain。开启冷却装置保持溶液体积不发生变化(见66和611)。98第二次过滤在滤埚(63)中铺一层过滤辅料(56)，其厚度约为滤埚高度的五分之一，过滤辅料上可盖一筛板(64)以防溅起。将烧杯中的物质过滤到滤埚里，残渣用热水洗涤至中性。残渣在负压条件下用丙酮(55)洗涤三次，每次用丙酮30 mL，每次洗涤后继续抽气以干燥残渣。99干燥将滤埚
13、置于灰化皿中(65)，在130干燥箱(67)中至少干燥2 h。在加热或冷却的过程中，滤埚的烧结滤板可能会部分松散，从而导致分析结果错误，因此应将滤埚置于灰化皿中。滤埚和灰化皿在干燥器(68)中冷却，从干燥器中取出后，立即对滤埚和灰化皿进行称量(m：)，称量准确至01 mg。910灰化把滤埚和灰化皿放到马福炉(69)中，在500=k25下灰化。每次灰化后，让滤埚和灰化皿在马福炉中初步冷却，待温热时取出，置于干燥器中，使其完全冷却，再进行称量，直至冷却后两次的称量差值不超过2 mg。最后一次称量结果记为m。，称量准确至01 mg。911空白测定用大约相同数量的滤器辅料(56)按94910进行空白测
14、定，但不加试样。灰化(910)引起的质量损失不应超过2 mg。结果按第11章处理。10半自动操作方法101试料称取1 g制备的试样，准确至01mg(m。)，转移至带有约2 g过滤辅料(56)的滤埚(63)中。如果试样脂肪含量超过100 gkg，或者试样中的脂肪不能用石油醚(58)提取，则按lO2处理。如果试样脂肪含量不超过100 gkg，其碳酸盐(以碳酸钙计)超过50 gkg，按103处理；反之，按lO4处理。3GBT 5515-2008ISO 6865：2000102预脱脂将滤埚和冷提取装置(610)连接，在真空条件下试样用30 mL石油醚(58)脱脂后，抽吸干燥残渣，重复3次。如果其碳酸盐
15、(以碳酸钙计)含量超过50 gkg，按103处理；反之，按104处理。103除去碳酸盐将滤埚和加热装置(612)连接，加入30mL盐酸(52)，放置1min。洗涤过滤样品，重复3次。用约30 mL的水洗涤一次，然后按104操作。104酸消解将消解圆筒和滤埚连接，将150 mL沸腾的硫酸(53)加入带有滤埚的圆筒中，如果起泡，加人数滴消泡剂(57)，尽快加热至沸腾，并保持剧烈沸腾30 min土1 min。105第一次过滤停止加热，打开排放管旋塞，在真空条件下，通过滤埚将硫酸滤出，残渣每次用30 mL热水洗涤至少三次，洗涤至中性，每次洗涤后继续抽气以干燥残渣。如果过滤器堵塞，可小心吹气以排除堵塞。
16、如果试样中的脂肪不能直接用石油醚(58)提取，按照106操作，反之按照107操作。106脱脂连接滤埚和冷却装置(610)，残渣在真空条件下用丙酮(55)洗涤三次，每次用丙酮30 mL。然后残渣在真空条件下用石油醚(58)洗涤三次，每次用30 mL石油醚。每一次洗涤后继续抽气以干燥残渣。107碱消解关闭排出孔旋塞，将150 mL沸腾的氢氧化钾溶液(54)转移至带有滤埚的圆筒，加人数滴消泡剂(57)，尽快加热至沸腾，并保持剧烈沸腾30 min士1 min。108第二次过滤停止加热，打开排放管旋塞，在真空条件下通过滤埚将氢氧化钾溶液滤去，每次用30 mL热水至少清洗残渣3次，直至中性，每次洗涤后都要
17、继续抽气以干燥残渣。如果过滤器堵塞，可小心吹气以排除堵塞。将滤埚连接到冷提取装置(610)上，残渣在真空条件下每次用30 mL丙酮洗涤残渣三次，每次洗涤后都要继续抽气以干燥残渣。109干燥将滤埚置于灰化皿中(65)，在130干燥箱(67)中至少干燥2 h。在灰化皿冷却的过程中，滤埚的烧结滤板可能会部分松动，从而导致分析结果错误，因此应将滤埚置于灰化皿中。滤埚和灰化皿在干燥器中(68)冷却，从干燥器中取出后，立即对滤埚和灰化皿进行称量(mz)，称量准确至01 mg。1010灰化把滤埚和灰化皿放到马福炉(69)中，在50025下灰化。每次灰化后，让滤埚和灰化皿在马福炉中初步冷却，待温热后取出置于干
18、燥器中，使其完全冷却，再进行称量，直到冷却后两次的称量差值不超过2 mg。最后一次称量结果记为ma，称量准确至01 mg。1011空白测定用大约相同数量的过滤辅料(56)按1041010进行空白测定，但不加试样。灰化(1010)引起的质量损失不应超过2 mg。11结果计算试样中粗纤维的含量按式(1)计算：W，：nz-m3 优1式中：Wr试样中粗纤维的含量，单位为克每千克(gkg)；GBT 5515-2008IS0 6865：2000m-试样质量(91或101)，单位为克(g)；mz灰化皿、滤埚以及在130干燥后获得的残渣(99或109)的质量，单位为毫克(mg)；m。灰化皿、滤埚以及在5002
19、5下灰化后获得的残渣(910或1010)的质量，单位为毫克(mg)。结果准确至1 gkg。注：结果也可以用质量分数()表示。12精密度121 实验室联合测试附录A列出了本方法精密度的实验室问的试验结果，该试验结果可能不适用于附录以外的其他含量范围和品种。122重复性用同一方法，对相同的试样材料，在同一实验室内，由同一操作人员使用同一设备，在短时间内获得的两个独立试验结果之间的绝对差值超过表1中列出的或由表1得出的重复性限r的情况不大于5。表1 重复性限(r)和再现性限(R)样 品 粗纤维含量(gkg) 重复性限(r)(gkg) 再现性限(R)(gkg)向日葵饼粕粉 223 3 8 4 161棕
20、榈仁饼粕 190 3 194 42 5牛颗粒饲料 1158 53 13 8玉米谷蛋白饲料 733 58 91术薯 602 56 88狗粮 300 32 89猫粮 228 27 64123再现性用同一方法，对相同的试样材料，在不同实验室内，由不同操作人员使用不同设备，获得的两个独立试验结果之间的绝对差值超过表1中列出的或由表1得出的再现性限R的情况不大于5。13测试报告测试报告应该说明：识别样品所需的全部信息；如果已知采样方法，应说明使用的采样方法；测定方法以及参考文献；所有本标准中没有具体说明的或者被认为是可选择的，以及可能影响测定结果的操作细节；一一测定结果，如果进行了重复性试验，应说明两次
21、测定值和平均值。GBT 5515-2008ISO 6865：2000附录A(资料性附录)实验室联合测试结果1996年和1997年根据ISO 5725：1986错层式试验进行的4个实验室试验，确定了本方法的精密度，在检测中采用了Grubbs溢出值检验取代了Dixon溢出值检验，在ISO 57252：1994中介绍了Grubbs溢出值检验。由10个实验室参加了实验室间验证，测定了向日葵饼粕粉、棕榈仁饼粕、牛颗粒饲料、玉米谷蛋白饲料、木薯、狗粮和猫粮等样品。表A1 实验室间实验统计结果样品参 数1 2 3 4 5 6 7剔除溢出值后保留的实验室数 10 9 10 10 10 10 10粗纤维含量平均
22、值(gkg) 2233 1903 1158 733 602 30O Z28重复性标准偏差(S。)(gkg) 300 693 189 207 200 114 096重复性变异系数 13 36 16 28 33 38 42重复性限(一It=28s。(gkg) 84 194 53 58 56 32 27再现性标准偏差(Sx)(gkg) 575 1518 493 325 314 318 229再现性变异系数 26 80 43 44 52 106 100再现性限(R)R一28X sR(gkg) 161 425 138 91 88 89 648样品：1向日葵饼粕粉；2棕榈仁饼粕；3牛颗粒饲料；4玉米谷蛋白
23、饲料；5木薯；6狗粮；7猫粮。参考文献GBT 55 T5-2008IS0 6865：2000E13 ISO 4793：1980 Laboratory sintered(fritted)filters Porosity grading，classification anddesignationE2 ISO 5725：1986 Precision of test methods-Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratorv testE3 ISO 57
24、251：1994 Accuracy(trueness and precision)of measurement methods and resultsPart 1：General principles and definitionsE4 ISO 57252：1994 Accuracy(trueness and precision)of measurement methods and resultsPart 2：Basic method for the determination of repeatability and reproducibility ofa standard measuremerit method5ISO 6492 Animal feeding stuffs Determination of fat content6ISO 6497 Animal feeding stuffs-SamplingE7 ISO 6541 Agricultural food product-Determination of crude fiber contentModined Scharrermethod
