1、ICS 67.040 X 04 中华人民共和国国家标准粮油检验GB/T 5523-2008 代替GBjT5523-1985 粮食、油料的脂肪酶活动度的测定Inspection of grains and oils一Determination of Iipase activity of grain and oilseeds 2008-11-04发布2009-01-20实施中华人民共和国国家质量监督检验检亵总局倍左中国国家标准化管理委员会侃WGB/T 5523-2008 目IJ1=1 本标准代替GB/T5523-1985(粮食、油料检验脂肪酶活动度测定法。本标准与GB/T5523一1985相比主要
2、变化如下:一一一修改了标准名称;一一增加了术语和定义;修改了标准溶液浓度、缓冲溶液pH值及滴定指示剂等内容;一一增加了检测结果的重复性要求。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位:安徽省粮油产品质量监督检测站、广东省粮油检测站、国家粮油质量检测中心、国家粮食局成都粮油质量检测中心。本标准主要起草人z季一顺、周红梅、王亚军、尚艳娥、何学超、谢月昆、沈素文、马艳。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:一-GB/T5523-19850 I G/T 5523-2008 粮油检验粮食、油料的脂肪酶活动度的测定1 范围本标准规定了粮食、油料中脂肪酶活动度测定的术语和定
3、义、原理、试剂和材料、仪器与用具、试样制备、分析步骤、结果计算及重复性。本标准适用于粮食、油料中脂肪酶活动度的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备GB 5491粮食、油料检验抨样、分样法GB/T 5497粮食、油料检验水分测定法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008，IS03
4、696:1987 ,MOD) 3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 脂肪酶活动度lipase activity; LA 一定量试样中的脂肪酶与纯油脂作用所生成的游离脂肪酸的量，用中和1g试样(干基)中生成的游离脂肪酸所消耗的氢氧化饵的毫克数表示。4 原理在pH7.4条件下，从样品中提取脂肪酶，并使其作用于一定量的纯油脂，纯油脂在脂肪酶作用下部分分解成游离脂肪酸，然后用氢氧化饵溶液进行滴定。5 试剂和材料以下试剂均为分析纯试剂。5. 1 水:符合GB/T6682实验室用水三级要求。5.2 10 g/L酷歌指示剂:称取1.0g酣歌溶于100mL95%(体积分数乙醇中。5.3 1.0
5、mol/L氢氧化饵水溶液标准储备液:按GB/T601配制和标定。5.4 0.05 mol/L氢氧化饵标准滴定溶液z准确移取50.0mL已经标定好的氢氧化饵标准储备液(5.3)于1000 mL容量瓶中，用95%(体积分数)乙醇稀释定容至1000 mL，存放于聚乙烯塑料瓶中。临用前稀释配制。5.5 元水乙醇和元水乙酶(4: 1)混合液。5.6 pH7.4缓冲液:A液:称取磷酸氢二铀11.876 g，溶于1L水中。1 GB/T 5523-2008 B液:称取磷酸二氢伺9.078g，溶于1L水中。临用时，A液、B液按4: 1混合。5. 7 纯油脂:量取国标一级油(可为浸出花生泊、葵花籽油、菜籽油、大豆
6、油等)250mL注入分液漏斗中，加入2%的氢氧化饵(KOH)溶液100mL- 150 mL，充分摇荡后，静置分层，弃去下层废液，保留上面的油脂层。用温水将油脂洗至中性，再通过元水硫酸铀过滤备用。酸值(以KOH计小于0.20mg/g，且不含抗氧化剂的一级泊，也可直接使用。5.8 石英砂。6 仪器与用具除了实验室常规仪器外，还包括以下仪器设备26. 1 锥形瓶:150mL。6.2 移液管:1mL , 5 mL，25mL。6.3 分液漏斗:500mL。6.4 恒温培养箱。6.5 研钵。6.6 磨口瓶。6. 7 天平:分度值0.001g。6.8 微量滴定管:10mL，最小刻度0.02mL。6.9 具塞
7、锥形瓶:150mLo 6. 10 比色管:50mL。6. 11 漏斗。7 试样制备按GB5491进行分样。对大颗粒样品(如大豆、玉米、花生)，要预先破碎;对带壳样品，要预先脱壳。8 分析步骤8. 1 样品水分测定按GB/T5497执行。8.2 称取试样(7)约2g(m)，精确至o.01 g，倒入研钵(6.5)中，加少量石英砂(5.8)和1mL纯油脂(5. 7)，混匀后加入5mL缓冲液(5.6)，研磨成稀糊状，小心转移至具塞锥形瓶(6.9)中，用5mL水少量多次洗净研钵，洗液并人具塞锥形瓶(6.9)中。加塞后，置于300C培养箱(6.4)内保温24ho取出，加入乙醇和乙酿混合液(5.5)50mL
8、，摇匀后静置1min-2 min，加盖过滤至50mL比色管(6.10)中。准确移取25.0mL滤液至锥形瓶(6.1)中，加入3滴-5滴盼敢指示剂(5.2)，用0.05mol/L氢氧化饵溶液(5.4)滴定，滴定至微红色且30s不褪色为止，记录消耗的氢氧化饵溶液的体积(V1)。8.3 另取2g试样做空白试验，除不用30OC保温24h外，其余操作同上，记录消耗的氢氧化饵溶液的体积(Vo)0 9 结果计算脂肪酶活动度X按式(1)计算:(V1 - VO) X c X 56. 1 60 x - . 1 _. : - /: :. -. X : X 100 ( 1 ) m X (100一品。25式中zX一一脂
9、肪酶活动度(以干基、KOH计)，单位为毫克每克(mg/g); 2 V1一一试样滴定用氢氧化饵溶液体积，单位为毫升(mL);v。一一空白试验用氢氧化饵溶液体积，单位为毫升(mL);c-一一实际氢氧化饵溶液浓度，单位为摩尔每升(mol/L); m一一试样质量，单位为克(g); M-一试样水分含量，%;56. 1一一氢氧化饵的摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol)。计算结果保留到小数点后一位。10 重复性GB/T 5523-2008 相同的实验材料，用同样的方法，在同一实验室由同一操作人员使用同一设备在较短的时间间隔内获得两个独立的测定结果，测定结果之间的绝对差值大于其算术平均值的10%的情况不得超过5%。OON|的Nm山阳阁。华人民共和国家标准粮油检验粮食、油料的脂肪酶活动度的测定GB/T 5523-2008 国中骨中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张0.5字数6千字2009年1月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2009年1月第一版等书号:155066 1-35547定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB/T 5523-2008
