1、中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定Standard methods of microbiological examination for cosmetics Standard plate c。untUDC 668. 58 576 . 85. 07 GB 7918 287 细菌总数系指1g或lml化妆品中所含的活菌数量测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。本标准采用标准平板计数法。1 方法提要化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有宫一定的生理特性，培养时对营养要求，培
2、养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37培养”的生长的一群嗜中温的需氧及兼性厌氧的细菌总数。2 培弊基和试J2. 1 生理盐水z见GB7918. 1 87化妆品微生物标准检验方法总则讥2.2 卵磷脂、吐温80营养琼脂培养基成分蛋白陈20g 牛肉膏3g 氯化销5g 琼脂15g 卵磷脂lg 吐温807g 蒸馈水lOOOml 制法s先将卵磷脂加到少量蒸馆水中加热溶解，加入吐温80将其他成分（除琼脂外加到其余的蒸馆水中，溶解加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为
3、7.17. 4，加入琼脂，121（15 I的20 min高压灭菌，储存于冷暗处备用3 仪器3. 1 锥形烧瓶。3. 2 量筒。3.3 pH计或精密pH试纸。3. 4 高压消毒锅。中华人民共和国卫生部198705 28批准1987 10-01实施137 3. 5 试管。3. 6 灭菌平I皿g直径9cm.3. 7 灭菌刻度吸管：10ml,2ml, lml. 3. 8 酒精灯。3. 9 恒温培养箱。3. 10 放大镜。4 操作步骤GB 7 91 8. 2 8 7 4. 1 用灭菌吸管吸取1 I 0稀释的检样2时，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿！ml。另取！ml注入到lj9ml灭菌生理盐水试管中（注意
4、勿使吸管接触液面，更换一支吸管，并充分混匀，使成1: 100稀释液吸取2时，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1剧。如样品含菌量高还可再稀释成1: 1000. I 10000，”等每种稀释度应换1支吸管。4. 2 将熔化并冷至4550的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15时，另倾注一个不加样品的灭菌空平皿，作空白对照随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37培养箱内培养48h.5 菌落计撇方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5IO倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数若平皿中有连成片状的菌落或花点祥菌
5、落蔓延生长时，该乎皿不宜计数着片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数6 菌落计世及报告方法s. 1 首先选取平均菌落数在30300之间的平皿，作为菌落总数测定的范围当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数见表中例。s.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数（见表中例2及例3).s. 3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例
6、的。s. 4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例5）。s. 5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30300个之间，其中一个稀精度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例的。s. 6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10个s. 7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用IO的指数来表示（见下表报告方式栏儿在报告菌落数为“不可计”时，应
7、注明样品的稀释度138 例次2 3 4 5 6 GB 7 91 8. 2 8 7 细菌计数结果及报告方法不同稀静度的平两稀樨均菌落数菌落且数度菌数个g或个ml之比10一110孟10- 1365 164 20 2760 295 46 l. 6 2890 271 60 2.2 不可tt4650 513 27 1 1 5 不可计305 12 附加说明本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口本标准由“化妆品微生物标准检碰方法”起草小组起草。本标准主要起草人周淑玉本标准由中国预防医学科学院环境E生监测所负责解释。16400 38000 27100 513000 270 30500 报告方式个g或个ml16000或l.6 10 38000或3.8 10 27000或2.7I0 510000或5.1 10 270或2.7 1 o 31000或3.1 IO 州139
