1、ICS 65. 120 B 46 道望中华人民共和国国家标准GB/T 838 1.9-2005 饲料中氯霉素的测定气相色谱法2005-09-05发布Determination of choramphenicoI in feed Gas chromatography 2006-02-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局啦士中国国家标准化管理委员会品叩GB/T 8381. 9-2005 前言本标准参考美国FDA(分析化学指导手册)0991年版)残留化学部分、SN034 -1995(出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法和SN0215-1993(出口禽肉中氯霉素残留量检验方法及相关文献，提出
2、了饲料中氯霉素的气相色谱测定法。本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心(北京)。本标准主要起草人:高生、范理、田静、李玉芳、王彤。GB/T 8381. 9-2005 饲料中氯霉素的测定气相色谱法1 范围本标准规定了用气相色谱法测定饲料中氯霉素的方法。本标准适用于配合饲料、添加剂预提合饲料中氯霉素的测定，方法最低检出限为0.005mg/kg。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准
3、达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699. 1饲料采样3 原理试样中的氯霉素用乙酸乙醋提取，取部分提取液用氮气吹去乙酸乙醋后，残渣用甲醇h氧化铀溶液溶解，与正己烧液-液分配除去油脂及脂溶物，再用乙酸乙醋提取氯霉素，吹干，C18小柱净化，经衍生剂衍生后用配有电子捕获检测器的气相色谱仪检测。4 试荆与材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4. 1 水，符合GB/T6682中二级水的规定。4.2 甲醇。4.3 乙酸乙醋。4.4 正己烧。4.5 环己烧。4.6 正己皖环己烧溶液:取
4、300mL环己烧加200mL正己皖。4. 7 三氯甲皖。4.8 乙腊溶液4.8.1 取5.0mL乙睛加水95mL; 4.8.2 吸取乙睛50mL加水50mL 4.9 氯化铀。4. 10 4%氯化锅溶液:称取40.0g氯化饷(4.9)加水溶解定容到1000mL。4. 11 氧化铀甲醇溶液:取200mL甲醇(4.2)加氯化铀溶液(4.10)800mL。4.12 日比晓。4. 13 六甲基二硅烧。4.14 氯化三甲基硅烧。4.15 衍生剂:取六甲基二硅皖(4.13月份，加氯化三甲基硅惋(4.14)1份，加毗睫(4.12月份。4.16 氯霉素标准品:纯度大于98%。4.17 氯霉素标准榕液4. 17.
5、 1 标准贮备液:准确称取20.0mg氯霉素(4.16)用甲醇溶解，定容到100mL，该榕液氯霉素浓度GB/T 8381. 9-2005 为200mg/mL，密封贮于冰箱内有效期为一年。4. 17.2 标准中间液1:吸取标准贮备液(4.17.1)5.00mL.于100mL容量瓶内，用乙酸乙醋定容至100 mL，该、溶液氯霉素浓度为10g/mL，密封贮于冰箱内，有效期3个月。4. 17 . 3 标准中间液II:吸取标准中间液1(4. 17.2) 10.0 mL于50mL容量瓶内，用乙酸乙醋定容至50 mL，该溶液氯霉素浓度为2g/mL，密封贮于冰箱内，有效期为3个月。4.17.4 标准工作榕液:
6、吸取标准中间液n(4. 17. 3)0. 25 mL、0.50mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00mL , 分别用乙酸乙醋定容至10mL，该溶液氯霉素浓度依次为o.05g/ mL、o.10g/ mL、0.20g/mL、o. 30g/ mL、0.40g/mL。4. 18 C18固相萃取小柱:200mg/ 3 mL。5 仪器5.1 5.2 5. 3 5.4 5. 5 管柱。6 试样的制备7 分析步骤7. 1 提取称取一定量的、40.0 mL乙酸乙醋(4.摇动两次，离心机(5.1 吹至近干，待净化。7.2 净化个5mL具塞试管内，在500C加热器上用氮飞7. 2. 2 固捆萃取柱净化每一试
7、样各准备一支C18小柱(4.18)，顺序用5mL甲醇，5mL三氯甲烧，5mL甲醇和10mL Jj(预清洗Cl8柱，将样液(7.2.1)转移到柱上，用5mL乙睛-水(-1.8. )淋洗，弃去，用3mL乙腊-7j(4.8.2)洗脱，收集在10mL具塞试管内，洗脱物加5mL乙酸乙醋嗣旋混合1min , 2 000 r/min离心，重复提取一次，合并乙酸乙醋提取液于5mL具塞试管内，在加热器上(500C)用氮气吹干，待衍生化。7.3 衍生化向具塞试管(7.2.2)加200L衍生剂(4.1日，塞紧塞子，涡旋混合10S，于700C烘箱内反应30min , 取出，在50C加热器上用氮气吹干，加200L正己烧
8、环己烧溶液(4.的，涡旋棍合10s，氯霉素标准榕液同时进行衍生化处理，供气相色谱测定。7.4 测定7.4. 1 气相色谱条件载气:氮气，1.5 mL/min。补充气:氮气，25mL/min。分流比:1/10。温度:气化室2800C，检测器3000C。柱温:2300C。7.4.2 试样的测定G/T 8381. 9-2005 在上述仪器条件下，分别注入标准工作液(4.17.4)和试样溶液(7.3)1L.调整试样定容体积，使试样溶液中氯霉素的峰值与标准工作液中氯霉素峰值相近，以保留时间和峰值的比较对氯霉素进行定量计算，见式。)。式中zX=h.c.V 一-m hs X一一试样中氯霉素的含量，单位为毫克
9、每千克(mg/kg); h一一试样溶液(7.3)中氯霉素的峰面积或峰高;c一一注人氯霉素标准工作液(4.17.4)的故度，单位为微克每毫升(g/mL); V 试样的定容体积，单位为毫升(mL);h，一-氯霉素标准工作液的峰面积或峰高;m一一-试样的质量，单位为克(g)。计算结果表示到0.005，最多不得超过三位有效数字。8 重复性( 1 ) 在同一实验室，由一操作人员使用同一仪器完成的两个平行测定的结果相对偏差不得大于20%。SON-mJgH阁。中华人民共和国家标准饲料中氯霉素的测定气相色谱法GB/T 838 1. 9-2005 国每中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码，100045网址电话，6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 印张0.5字数7千字2006年2月第一次印刷开本880X12301/16 2006年2月第一版?峰定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066.1-26937 8381.9-2005
