1、ICS 67040X 04 a目中华人民共和国国家标准GBT 96951 72008代替GBT 9695171988肉与肉制品葡萄糖酸一j5i一内酯含量的测定20080828发布Meat and meat products-Determination of glucono-delta-lactone content(IS0 4133：1979，MOD)2009030 1实施宰瞀嬲紫瓣警矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会“”。前 言GBT 9695172008OBT 9695由以下部分组成：GBT 96951肉与肉制品游离脂肪含量测定；GBT 96952肉与肉制品脂肪酸测定；GBT 96953肉
2、与肉制品铁含量测定；GBT 96954肉与肉制品 总磷含量测定；GBT 96955肉与肉制品pH测定；GBT 96956肉制品胭脂红着色剂测定；GBT 96957肉与肉制品总脂肪含量测定；GBT 96958肉与肉制品氯化物含量测定；GBT 96959肉与肉制品聚磷酸盐测定；GBT 969510肉与肉制品 六六六、滴滴涕残留量测定；GBT 969511肉与肉制品 氮含量测定；GBT 969513肉与肉制品钙含量测定；GBT 969514肉制品淀粉含量测定；GBT 969515肉与肉制品水分含量测定；GBT 969517肉与肉制品 葡萄糖酸一舡内酯含量的测定；GBT 969518肉与肉制品 灰分测
3、定；GBT 969519肉与肉制品取样方法；GBT 969520肉与肉制品锌的测定；GBT 969521肉与肉制品 镁含量测定；GBT 969522肉与肉制品 铜含量测定；GBT 969523肉与肉制品羟脯氨酸含量测定；GBT 969524肉与肉制品 胆固醇含量测定；GBT 969525肉与肉制品维生素PP含量测定；GBT 969526肉与肉制品维生素A含量测定；GBT 969527肉与肉制品维生素B。含量测定；GBT 969528肉与肉制品 维生素Bz含量测定；GBT 969529肉制品维生素c含量测定；GBT 969530肉与肉制品维生素E含量测定；GBT 969531肉制品总糖含量测定。
4、本部分为GBT 9695的第17部分。本部分修改采用ISO 4133：1979(肉与肉制品葡糖酸一8_内酯含量的测定(英文版)。本部分与ISO 4133：1979相比主要技术性修改如下：增加了规范性引用文件GBT 6682 2008；试剂中对水的要求修改为“应符合GBT 6682-2008中三级水的要求”；用GBT 969519代替ISO 3100；用GBT 969515代替IsO 1442。按照GBT 112000标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则和IGBT 9695172008GBT 200014200l标准编写规则第4部分：化学分析方法对ISO 4133：1979进行的主要编
5、辑性修改如下：删除ISO 4133：1978的前言；用“本部分”代替“本国际标准”；用小数点“”代替ISO 4133：1978中作为小数点的“，”；为计算公式增加了编号。本部分代替GBT 9695171988肉与肉制品葡糖酸一8一内酯含量的测定。本部分与GBT 9695171988相比主要修改如下：部分名称由“肉与肉制品 葡糖酸一8一内酯含量的测定”修改为“肉与肉制品 葡萄糖酸一8_内酯含量的测定”；按照GBT 112000、GBT 2000142001进行了结构调整和文字修改；按照GBT 112000，删除英文名称中的“Method for”；第2章增加了规范性引用文件GBT 6682-20
6、08；第4章将“所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的水”修改为“如无特别说明，所用试剂均为分析纯”，增加了部分溶液的配制方法，增加了条款“41水：应符合GBT 6682 2008中三级水的要求”；将第8章中“A(A。一A，)一(A。BB。B)”修改为“A(A。一A：)一(AzeA，e)”；用“9精密度”及其内容代替“9允许差”及其内容；增加了“试验报告”一章。本部分由全国肉禽蛋制品标准化技术委员会提出并归口。本部分起草单位：深圳市计量质量检测研究院、中国商业联合会商业标准中心。本部分主要起草人：罗美中、黄小龙、杨万颖、张进军、黎永乐、贾艳玲、靳晓蕾。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：
7、GBT 969517 1 988。1范围肉与肉制品葡萄糖酸一6_内酯含量的测定GBT 9695的本部分规定了肉和肉制品中葡萄糖酸一8一内酯的测定方法。本部分适用于肉和肉制品中葡萄糖酸一争内酯的测定。GBT 96951720082规范性引用文件下列文件中的条款通过GBT 9695的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GBT 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法(ISO 3696：1987，M
8、OD)GBT 969515肉与肉制品水分含量测定(GBT 9695152008，ISO 1442：1997，MOD)GBT 969519 肉与肉制品 取样方法3原理用冷高氯酸提取试样中的葡萄糖酸一*内酯，离心，倾析并过滤上清液。在氢氧化钾作用下葡萄糖酸一*内酯转化成葡萄糖酸酯。葡萄糖酸酯通过葡萄糖酸酯激酶和6一磷酸葡萄糖酸酯脱氢酶的作用，产生5一磷酸核酮糖并使烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐(NADP)还原。葡萄糖酸酯+腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)J堕堕塑!堕坠6一磷酸葡萄糖酸酯+ADP6一磷酸葡萄糖酸酯+NADP J堕堕竺塑!5一磷酸核酮糖+NADPH+co：+H一用分光光度计测量还原型烟酰胺腺嘌呤
9、二核苷酸磷酸的吸光度，然后计算出葡萄糖酸一8一内酯的含量。4试剂如无特别说明，所用试剂均为分析纯。41水：应符合GBT 6682 2008中三级水的要求。42高氯酸溶液：04 molL溶液。43氢氧化钾溶液：2 molL溶液。44缓冲液：称取二苷氨酞264 g和氯化镁0284 g溶于150 mL水中，用氢氧化钾溶液调pH值至80，定容到200 mL。可在4下保存四星期。45烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐(NADP)溶液：称取烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸钠盐50 mg，置于带盖的小瓶中，用50 mL水溶解。可在4下保存四星期。46腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)溶液：称取腺嘌呤核苷三磷酸钠盐250 mg和碳酸
10、氢钠250 mg，置于带盖的小瓶中，加入50 mL水溶解。可在4下保存四星期。47 6-磷酸葡萄糖酸酯脱氢酶(6一PGDH)溶液：每毫升6一磷酸葡萄糖酸酯脱氢酶(6-PGDH)悬液中含有6-PGDH 20 mg，葡萄糖酸激酶和还原型NADP氧化酶不超过005。可在4下保存6个月。48葡萄糖酸激酶(GK)溶液：每毫升葡萄糖酸激酶(GK)悬液中含有GK 10 mg，NADP氧化酶含量1GBT 9695172008不超过005。可在4下保存6个月。5仪器和设备51实验室常用设备。52绞肉机：孔径不超过4 mm。53匀浆器。54离心机。55紫外可见分光光度计。6试样61按GBT 969519取样。62
11、取有代表性的试样不少于200 g，用绞肉机绞两次并混匀。63绞好的试样应尽快分析，若不立即分析，应密封冷藏贮存，防止变质和成分发生变化。贮存的试样在启用时应重新混匀。7分析步骤71葡萄糖酸酯的制备称取试样约50 g(精确至001 g)，放入烧杯内，加入04molL冷高氯酸(42)100mL于匀浆器中匀浆，转移到离心管中，用3 000 rmin离心10rain，除去上面的脂肪层后，上清液用滤纸过滤到200mL锥形瓶中，弃去最初滤液10 mL。取滤液5000 mL于100 mL烧杯中，用氢氧化钾溶液(43)调至溶液pH值为10。然后将烧杯内容物完全转移到100 mL容量瓶中用水定容至刻度，置于冰浴
12、中放置20 min后，用滤纸过滤，弃去最初的滤液10 mL。取滤液2500 mL或适当体积移入100 mL容量瓶中用水定容至刻度。72测定取缓冲液(44)250 mL、NADP溶液(45)01 mL和ATP溶液(46)01 mL，分别置于两个比色皿中，其中一个比色皿加入提取液02 mL为试验溶液，另一个比色皿中加入水02 mL为空白溶液，然后再分别加入6一磷酸葡萄糖酸酯脱氢酶溶液(47)005 mL，混匀后放置5 min，以空气为参比在365 nm或340 nm波长处测吸光度。试验溶液的吸光度值用At表示，空白溶液的吸光度值用A，e表示。取葡萄糖酸酯激酶溶液(48)001 mL分别置于上述两个
13、比色皿中，立即混匀。10 s15 S内在365 nm或340 nm波长处测吸光度。之后每隔2 min测一次，直到吸光度恒定为止。绘制出吸光度值与时间的关系曲线，并查出吸光度最大值。试验溶液的吸光度最大值用Az表示，空白溶液的吸光度最大值用A。o表示。9计算试样中葡萄糖酸一8-内酯的含量按式(1)计算： x。必考盖溉丽100可100坐兰丑i100-52705X赢(100+訾)(1)式中：x试样中葡萄糖酸一弘内酯的含量，单位为克每百克(g100 g)；A(A2一A1)一(A2BA1B)；1961口(+)一葡萄糖酸的相对分子质量；GBT 9695172008K在365 nm波长时，K一35 cm2p
14、mol；在340 rlm波长时，K一623 cm21mol；y取滤液的体积(2500 mL或适当体积)；X，根据GBT 969515测试所得的试样含水量，；m试样质量，单位为克(g)。当平行测定符合精密度所规定的要求时，取平行测定的算术平均值作为结果，精确到001。9精密度在同一实验室由同一操作者在短暂的时间间隔内，用同一设备对同一试样获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过测定结果平均值的10。10试验报告试验报告应说明：与识别样品有关的必需信息；取样方法；依据本部分所使用的方法；未在本部分规定或被视为可选的所有操作，以及可能影响测试结果的其他事件；获得的结果；如果检验了重复性，列出最终结果。
