1、ICS 67。040X 04 囝雪中华人民共和国国家标准GBT 9695262008代替GBT 969526一1991肉与肉制品 维生素A含量测定Meat and meat products-Determination of vitamin A content2008-08-28发布 2009-03-0 1实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局磐士中国国家标准化管理委员会及仲刖 菁GBT 9695262008GBT 9695由以下部分组成：GBT 96951肉与肉制品游离脂肪含量测定；GBT 96952肉与肉制品脂肪酸测定；GBT 96953肉与肉制品铁含量测定；GBT 96954肉与肉制
2、品总磷含量测定；GBT 96955肉与肉制品pH测定；GBT 96956肉制品胭脂红着色剂测定；GBT 96957肉与肉制品 总脂肪含量测定；GBT 96958肉与肉制品氯化物含量测定；GBT 96959肉与肉制品 聚磷酸盐测定；GBT 969510肉与肉制品六六六、滴滴涕残留量测定；GBT 969511肉与肉制品 氮含量测定；GBT 969513肉与肉制品 钙含量测定；GBT 969514肉制品淀粉含量测定；GBT 969515肉与肉制品 水分含量测定；GBT 969517肉与肉制品 葡萄糖酸一争内酯含量的测定；GBT 969518肉与肉制品 灰分测定；GBT 969519肉与肉制品 取样方
3、法；GBT 969520肉与肉制品 锌的测定；GBT 969521肉与肉制品 镁含量测定；GBT 969522肉与肉制品 铜含量测定；GBT 969523肉与肉制品 羟脯氨酸含量测定；GBT 969524肉与肉制品胆固醇含量测定；GBT 969525肉与肉制品维生素PP含量测定；GBT 969526肉与肉制品维生素A含量测定；GBT 969527肉与肉制品维生素B。含量测定；GBT 969528肉与肉制品维生素B。含量测定；GBT 969529肉制品维生素C含量测定；GBT 969530肉与肉制品维生素E含量测定；GBT 969531肉制品 总糖含量测定。本部分为GBT 9695的第26部分。
4、本部分代替GBT 969526 1991肉与肉制品维生素A含量测定。本部分与GBT 9695261991相比主要修改如下：按照GBT 112000标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则和GBT 200014 2001标准编写规则 第4部分：化学分析方法进行了结构调整和文字修改；增加“标准溶液的标定”；增加了“试样制备”一章；IGBT 9695262008在“测定”一章中，增加了“柱温”、“平行试验”和“空白试验”；在“维生素A标准溶液曲线的绘制”中，由系列进样量绘制标准曲线修改为由系列浓度绘制标准陆线，计算公式作了相应的调整；用第10章“精密度”及其内容代替第9章“允许差”及其内容；增
5、加了“试验报告”一章；增加了资料性附录A。本部分的附录A为资料性附录。本部分由全国肉禽蛋制品标准化技术委员会提出并归口。本部分起草单位：中国商业联合会商业标准中心、国家加工食品质量监督检验中心(广州)、广州市产品质量监督检验所、浙江省质量技术监督检测研究院。本部分主要起草人：罗海英、侯向昶、杜志峰、何乔桑、郭新东、冼燕萍、吴玉銮。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GBT 969526一1991。肉与肉制品 维生素A含量测定1范围GBT 9695的本部分规定了肉与肉制品中维生素A含量的测定方法。本部分适用于肉与肉制品中维生素A含量的测定。2规范性引用文件GBT 969526-2008下列文件
6、中的条款通过GBT 9695的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GBT 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法(ISO 3696：1987，MOD)3原理试样经皂化后，用石油醚提取不皂化的维生素A，浓缩后，用高效液相色谱荧光检测器，于激发波长340 nm、发射波长460 nm处测定维生素A，用外标法计算试样中维生素A的含量。4试剂如无特别说明，所用试剂均为分析纯。41水：符合GBT 668
7、2 2008规定的一级水。42无水乙醇。43无水硫酸钠。44异丙醇。45石油醚：沸程为3060。46甲醇：色谱纯或重蒸后使用。47氢氧化钾溶液(c一500 gL)：称取50 g氢氧化钾，溶于水中，用水稀释至100 mL。48抗坏血酸溶液(c一100 gL)：称取10 g抗坏血酸(维生素c)，溶于水中，用水稀释至100 mL。49维生素A标准物质：视黄醇或视黄醇酯类物质。410维生素A标准溶液。4101标准贮备液(c1 000tgmL)。41011若标准物质(49)为视黄醇，则称取视黄醇500 mg，用异丙醇溶解，定容于50 mL棕色容量瓶中。于4保存。临用前用紫外分光光度计按4103标定其浓度
8、。41012若标准物质(49)为视黄醇的酯类物质，则称取标准物质500 mg，按8183进行皂化、提取、浓缩，用异丙醇溶解，定容于50 mL棕色容量瓶中。于4C保存。临用前用紫外分光光度计按4103标定其浓度。4102标准工作液：用异丙醇将已标定浓度的标准贮备液(4101)稀释成所需的标准工作液。临用前配制。】GBT 969526-20084103标准溶液的标定：移取维生素A标准贮备液(4101)10 pL于5mL具塞刻度试管中，用无水乙醇(42)稀释至30 mL。于波长325 nm处用紫外分光光度计(53)测定维生素A的吸光值。按式(1)计算出维生素A标准贮备液(4101)的浓度：A301
9、000“一EF可丽对i式中：f-维生素A标准贮备液的浓度，单位为克每毫升(gmL)A维生素A的紫外吸光值；E蟹维生素A的1比吸光系数，即溶液浓度为1、光路为1 cm时的吸收系数，值为1 835y一移取维生素A标准贮备液的体积，单位为微升(pL)。5仪器和设备实验室常规仪器及下列仪器。51机械设备：用于试样的均质化。包括高速旋转的切割机，或多孔板的孔径不超过4 mm的绞肉机。52旋转蒸发仪。53紫外分光光度计。54液相色谱仪：带荧光检测器。6取样实验室所收到的样品应具有代表性且在运输和储藏过程中无受损或发生变化。取样方法参见GBT 969519。取有代表性的样品200 g。7试样制备使用适当的机
10、械设备(51)将试样均质。注意避免试样的温度超过25。若使用绞肉机，试样至少通过该设备两次。将试样装入密封的容器里，防止变质和成分变化。试样应在均质化后24 h内尽快分析。8分析步骤注：维生素A对光敏感，应避光操作。81皂化称取试样05 g5 g(准确至0001 g)于150 mL烧瓶中，加入5 mL抗坏血酸溶液(48)、15 mL氢氧化钾溶液(47)、30 mL无水乙醇(42)，混匀，于80水浴上回流加热30 min60 min，至试样溶液澄清，皂化后用流水冷却。82提取将皂化后的试样溶液移入125mL分液漏斗中，用30mL石油醚(45)分数次洗烧瓶，洗液并人分液漏斗中，塞上塞子，轻摇分液漏
11、斗，避免乳化。静置，分层后，将水层放人第二个分液漏斗中，醚层留在第一个分液漏斗中。于第二个分液漏斗中加入i0 mL石油醚(45)，进行第二次提取，石油醚层并人第一个分液漏斗中。重复提取34次。石油醚层并人第一个分液漏斗中。石油醚层反复用水洗涤，至水层呈中性(pH约为7)。弃去水层。将分液漏斗中的石油醚层经无水硫酸钠(43)脱水后，放人棕色圆底烧瓶中。用少量石油醚(45)洗分液漏斗和无水硫酸钠，洗液并入棕色圆底烧瓶中。2GBT 969526-200883色谱分析用试样溶液的制备连接盛有石油醚提取液的圆底烧瓶与旋转蒸发仪(52)，于4060水浴上减压蒸馏石油醚，至瓶内剩约1 mL2 mL液体时，取
12、下烧瓶，用氨气吹干剩余液体，立即加入2o mL异丙醇溶液(44)，塞上塞子，防止溶剂挥发，摇匀，溶解瓶中维生素A。此为色谱分析用试样溶液。84测定841色谱分析参考条件a)色谱柱：C18柱(150 mm46 mill，5 Urn)，或相当者；b)流动相：甲醇+水一98+2(体积比)；c)流速：1J 0 mLmin；d)柱温：30；e)检测波长：激发波长为340 nm，发射波长为460 nIll；f)进样量：20 pL。842标准曲线的绘制将维生素A系列标准工作液(4102)进行高效液相色谱分析，记录峰面积或峰高。以维生素A的浓度为横坐标、以相应的峰面积或峰高为纵坐标绘制标准曲线。标准色谱图参见
13、附录A。843试样溶液的测定将制备好的试样溶液(83)按标准工作液的液相色谱条件进行测定。根据试样溶液的峰面积或蜂高，从标准曲线上查出对应的维生素A的浓度。85平行试验按8184，对同一试样进行平行试验测定。86空白试验除不加入试样外，均按8184进行测定。9计算试样中维生素A的含量按式(2)计算： x一瑞1。(2)式中：x试样中维生素A的含量，单位为毫克每百克(mg100 g)；cz根据试样的峰面积或峰高查标准曲线得到的维生素A的浓度，单位为微克每毫升(pgmL)；yz试样溶液最终定容的体积(83)，单位为毫升(mL)；m试样质量，单位为克(g)。计算结果应扣除空白，结果准确至001 rag100 g。10精密度同一分析者在同一实验室、采用相同的方法和相同的仪器、在短时间间隔内对同一样品独立测定两次。两次测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的30。11试验报告试验报告应说明：所有与识别样品有关的必需信息；3GBT 969526-2008取样方法；依据本部分所采用的方法；本部分未规定或未列为可选的所有操作，以及可能影响测试结果的其他因素；测试结果；如果检验了重复性，列出最终结果。附录A(资料性附录)维生素A标准溶液的液相色谱图GBT 9695262008图A1维生素A标准溶液的液相色谱图GBT 9695262008参考文献E1GBT 969519肉与肉制品取样方法6
