1、NY!T 719. 2-2003 10 前言NY/T 719(转基因大豆环境安全检测技术规范分为以下三个部分z第1部分g生存竞争能力检测,第2部分z外源基因流散的生态风险检测;一一第3部分z对生物多样性影响的检测。本部分是NY/T719的第2部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位2中国农业科学院植物保护研究所、南京农业大学、农业部科技发展中心。本部分主要起草人2彭于发、彭德良、喻德跃、强胜、李宁、付仲文,1 范围转基因大豆环境安全检测技术规范第2部分:外源基因流散的生态凤险检测NY/T 719的本部分规定了转基因大豆基因流散的生态风险检测方法。NY/T 719. 2-20
2、03 NY/T 719的本部分适用于转基因大EZ与野生大豆、普通栽培大豆的流散率以及基因流散距离和频率的检测。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过NY/T719本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分。NY /T 719. 1-2003 转基因大豆环境安全检测技术规范第1部分g生存竞争能力检测3 术语和定义下列术语和定义适用于本部分。3. 1 基因流散gene flow 转基因大豆中的外源基因向普通栽培大
3、豆或相关野生种自然转移的行为。3.2 流散率outCI咽singrate 辛辛基因大豆与普通栽培大豆或相关野生种发生自然杂交的比率。4 要求按NY/T 719. 1-2003中第3章的要求。5 试验方法5. 1 转基因大豆与野生及栽培大豆不同基因型流散率5. 1. 1 试验设计单行相间种植,按对比法顺序排列,受体材料不少于10个。小区面积不少于10时,囚次重复,东西向、南北向各两次重复。5. 1. 2 播种播种深度3cm4 cm,每平方米播种10g12g,5. 1. 3 管理按当地常规栽培方式管理。5. 1. 4 调查和记录调查并记录出茵期、始花期、盛花期、终花期和成熟期。5. 1. 5 检测
4、将收获的非转基因材料种子(每处理不少于1000粒)在温室或田间种植,出苗后进行生物学鉴定NY/T 719.2-2003 或分子生物学检测,记录含有外源基因的植株数。5. 1. 6 结果表述流散率按式(1)计算zp=手X100 式中gP一一流散率,%; N一一检测的含有外源基因的植株数,单位为株,T一一播种后出苗总数,单位为株。5. 1. 7 结果分析用方差分析方法比较转基因大豆与野生及普通栽培大豆不同基因型流散率的差异。5.2 基因流散距离和频率的检测5. 2. 1 试碰设计( 1 ) 采用角度末于90的扇形,扇形口位于上风口,扇形半径30m-50 m,不设重复。面积约2000m2_ 3 50
5、0 m2。转基因大豆种植在扇形口,其他材料科植于扇形脊。用转基因大豆为授粉者,半径不小于2 m,选择非转基因普通栽培大豆为接受花粉者。5.2.2 播种播种深度3cm-4 cm,每平方米播种10g-12g,5.2.3 管理按当地常规栽培方式管理。5.2.4 调查方法在成熟期以扇行口为起点,按距离梯度1m , 2 m, 5 m , 10 m、20m和50m收获非转基因大豆种子,每个距离取样不少于1000粒种子。5.2.5 检测方法收获后的种子当年在温室条件下或次年在田间种植,出苗后进行生物学鉴定或分子生物学检测,记录含有外源基因的植株数。5.2.6 结果表述12 计算基因流散距离和频率。流散率结果计算见式(1)。