1、NY/T 719. 3-2003 14 前言NY /T 719(转基因大豆环境安全检测技术规范分为以下三个部分:第1部分z生存竞争能力检测;第2部分:外源基因流散的生态风险检测;一一第3部分z对生物多样性影响的检测。本部分是NY/T719的第3部分。本部分附录A为规范性附录。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位2中国农业科学院植物保护研究所、南京农业大学、农业部科技发展中心。本部分主要起草人s彭于发、彭德良、喻德跃、强胜、李宁、付仲文。1 范围转基因大豆环境安全检测技术规范第3部分:对生物多样性影晌的检测NY /T 719.3的本部分规定了转基因大豆对生物多样性影响的检测方法
2、。NY/T 719.3-2003 NY /T 719.3的本部分适用于转基因大豆对大豆田节肢动物多样性、大豆病害及大豆根瘤菌影响的检测。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过NY/T719本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T 3543.4 农作物种子检验规程发芽试验GB 4404. 2粮食作物种子豆类NY /T 719.1-2003 转基因大豆环境安全检测技术规范第l部分z生存竞争能力检测3
3、 要求按NY/T 719. 1-2003中第3章的要求。4 试验方法4. 1 试验设计小区采用随机排列，小区间设有2m宽隔离带，小区面积不小于150m2，四次重复。处理13转基因大豆不喷施农药;处理2:受体大豆不喷施农药$一一处理32当地普通栽培大豆品种不喷施农药;一一处理42当地普通栽培大豆品种喷施农药。4.2 播种播种深度3cm4 cm，每平方米播种10g12g。4.3 管理按当地常规栽培方式管理。4.4 调查和记录4. 4. 1 对大豆田节肢动物多样性的影响4.4.1.1 调查方法直接观察法z从出苗到成熟，每10d调查一次，每次调查时每小区对角线5点取样，每点调查20株，记载大豆上、中、
4、下3个叶位的节股动物的种类和所处的发育阶段。在调查时应包括:害虫z粉虱、班牙虫、到马、蜻类、斜纹夜娥、豆天峨等;捕食性昆虫z蜘蛛、瓢虫、草龄、花蟠、猎螃;拟寄生昆虫z赤眼蜂(成虫阶段)。吸虫器调查法z在大豆齐苗后V3-V5调查第1次，以后在R1和R5期各调查1次。每处理调查NY/T 719. 3-2003 5点，每点用吸虫器由下往上吸取10株大豆(全株)及其地丽上的节肢动物。样品用75%乙醇溶液浸泡，带回室内整理和分类鉴定。4. 4. 1. 2 调查和记录记录节肢动物粉虱、螃虫、到马、蜻类、斜纹夜峨、豆夭峨、蜘蛛、瓢虫、草岭、花蟠、猪蟠、赤眼蜂等的发生种类和数量。4.4.2 对大豆主要病害的影
5、晌4. 4. 2. 1 调查方法病毒病z在大豆苗期、鼓粒期各调查次，按对角线5点取样，每点20株。霜霉病g在大豆出苗后30d、始花期、鼓粒期各调查一次，按对角线5点取样，每点20株。于包囊线虫病2在大豆出苗后V3-V5期调查一次，按对角线5点取样，每点20株。4.4.2.2 记录记录大豆田病毒病、霜霉病和于包囊线虫病的发病株数、发病级别和调查总株数。按分级标准调查植株发病程度，以发病率和病情指数表示。分级标准见规范性附录Ao4.4.2.3 结果表述发病率按式(1)计算2D=尝) l ( 式中zD一一-发病率，%; N，-发病植株数，单位为株gT，一一调查总株数，单位为株。病情指数按式(2)计算
6、:IZ旦4旦(巳xM).( 2 ) 式中zI 病情指数，%; Nz一一各级发病植株数，单位为株gR一一发病等级;T2 调查总株数，单位为株gM 分级的最高级别。4.4.3 对大豆根铺菌的影响4. 4. 3. 1 调查方法在大豆收获期，每小区按对角线5点取样，每点20株。4.4.3.2 记录统计单株大豆全根系根瘤数。4.5 结果分析用方差分析法比较转基因大豆与其他大豆对大豆田节肢动物多样性、大豆病害及大豆根瘤菌影响的差异。16 病情级别。级1级2级3级4级病情级另IJ。级级2级3级4级5级病情级别。级l级3级5级7级9级附录A(规范性附录)分级标准表A.1 大豆花叶病毒病分级标准症状描述植株正常
7、，无症状植株正常，叶平展，呈轻花叶或黄花斑驳(元脉枯植株基本正常，花叶，斑驳花叶，卷叶花叶植株略矮，皱缩花叶植株矮化，叶片畸形皱缩，系统脉枯或枯斑，芽枯表A.2大豆霜霉病分级标准症状描述无病斑或其他感染标志有少数局限型病斑，小点状，直径1mm以下$病斑约占叶面积1%以下散生不规则形褪绿病斑，直径2mm左右，病斑约占叶面积1%-5%病斑扩展，直径3mm.4 mm，病斑约占叶面积6%-20%扩展型病斑，直径4mm以上，病斑约占叶面积21%-50%扩展型病斑，病斑约占叶面积51%表A.3大豆抱隶线虫病分级标准每株泡囊数根系元抱囊。.1个-3.0个3. 1个-10.0个10. 1个-30.0个30个-100个100个以上NY/T 719. 3-2003 1 7
