1、NY/T 725-2003 前-=同本标准是在参阅了美国全国饲料协会(NFIA)推荐的通用分析方法及国内外大量文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了高效液相色谱-90%)0.1000g，置于100mL容量瓶巾，用甲醇溶解，定容，其浓度为1000g/mL的储备液，置4C冰箱中保存。4.3.2 莫能菌素标准工作液z分别准确吸取一定量的标准贮备液(4.4.1)，置于10mL容量瓶中，用甲醇稀释、定容，配制成浓度为2.0g/mL，4.0问/mL，6.0g/mL.8.0g/mL，10.0月/mL.12.0g/ml.的标准工作液。5 仪器和设备实验宰常用仪器、设备。5. 1 高效液相色谱仪:
2、配柱后衍生化装置和紫外检测器。5.2 离心机。5.3 振荡器。5.4 玻璃具塞三角瓶(250mL)。5.5 微量进样器。5.6 微孔滤膜(0.45 /Lm)。NY /T 725-2003 6 试样制备接GB/T14699. 1规定，取有代表性的样品，四分法缩减取约200g，经粉碎，全部过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。7 测定步骤7. 1 试样提取称取一定量的试样00.0g配合饲料，或5.0g浓缩饲料，或1.0g添加剂预混合饲料)，置于250mL 玻璃具塞三角瓶中，加入40mL试样提取液(4.1) ，往复震荡30min。静止10min，过滤。再向试样中分别加入30mL试样提取液(4.1) ，
3、重复提取两次。合并三次提取液，用试样提取液定容到100mL。取1mL用O.45m微孔有机滤膜过滤作为试样溶液，供高效液相色谱分析。7.2 HPLC色谱条件a) 色谱位:C18柱，长150mm，内径4.6mm，粒径5m，或相当者。讪柱温:室温。c) 流动相z甲醇冰乙酸2水(9433)。d) 流动相流速，0.7mL/min。e) 衍生液流速，0.7mL/min。反应管2不锈钢长10m，内径。.2mmo g) 反应温度，95c。h) 检测波长，520nmo i) 进样体积:20Lo7.3 HPLC测定取适量试样溶液(7.1)和相应浓度的标准工作液(4.3.2)，作单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。B 结果计算与表述8. 1 试样中莫能菌素的含量按式(1)计算=式中2X些lXnm X i式样中莫能菌素的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), m，-HPLC试祥色谱峰对应的莫能菌素的质量，单位为徽克(g), m 试样质量，单位为克(g)，n 稀释倍数。8.2 测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后一位。9 允许误差两个平行测定的相对偏差不大于10%。2 ( 1 )
